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eIF2α磷酸化对长波紫外线诱导的小鼠角质形成细胞氧化损伤中Nrf2-HO-1通路的影响

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-9页
缩略词表第13-14页
1 绪论第14-24页
    1.1 问题提出与研究意义第14-15页
    1.2 国内外研究现状第15-22页
        1.2.1 紫外线(UVA)对皮肤的影响第15-16页
        1.2.2 UVA对内质网应激的影响第16-17页
        1.2.3 EIF2α 激酶和EIF2α 磷酸化的研究进展第17-19页
        1.2.4 UVA及NRF2-ARE信号通路的研究进展第19-20页
        1.2.5 血红素加氧酶1的研究进展第20-22页
    1.3 本文研究的目的和研究内容第22-23页
        1.3.1 研究目的第22页
        1.3.2 研究内容第22-23页
    1.4 本文的创新点第23-24页
2 长波紫外线诱导小鼠角质形成细胞氧化损伤模型的建立第24-32页
    2.1 引言第24页
    2.2 实验材料第24-26页
        2.2.1 主要仪器设备第24-25页
        2.2.2 实验试剂及药品第25页
        2.2.3 相关试剂的配制第25-26页
    2.3 相关实验方法第26-28页
        2.3.1 JB6细胞的增殖分化第26-27页
        2.3.2 细胞分组(对照组及UVA辐射组)第27页
        2.3.3 显微镜观察细胞形态的变化第27页
        2.3.4 Immunofluorescence 检测细胞形态变化第27-28页
        2.3.5 MTS检测细胞活力第28页
    2.4 结果第28-31页
        2.4.1 UVA辐射对JB6细胞形态方面的影响第28页
        2.4.2 UVA辐射对细胞骨架及细胞核的影响第28-29页
        2.4.3 不同剂量的UVA对细胞活力的影响第29-31页
    2.5 讨论第31-32页
3 UVA辐射诱导的内质网与氧化应激的研究第32-52页
    3.1 引言第32页
    3.2 实验材料第32-36页
        3.2.1 主要仪器设备第32-33页
        3.2.2 实验试剂及药品第33-35页
        3.2.3 相关试剂的配制第35-36页
    3.3 相关实验方法第36-41页
        3.3.1 JB6细胞的增殖分化第36页
        3.3.2 Western blotting检测P-eIF2α、eIF2α、Nrf2、HO-1 等蛋白水平第36-38页
        3.3.3 QT-PCR检测不同剂量Nrf2、HO-1mRNA表达水平第38-41页
        3.3.4MTS检测细胞活力第41页
    3.4 实验结果第41-51页
        3.4.1 不同剂量的UVA辐射对eIF2α 磷酸化的影响第41-42页
        3.4.2 150kJ/m2UVA辐射JB6细胞不同时间点eIF2α 磷酸化的改变第42-45页
        3.4.3 150kJ/m2UVA辐射JB6细胞后不同时间点Nrf2、HO-1mRNA及蛋白的影响第45-47页
        3.4.5 Salubrinal药物、GSK2606414药物对细胞活力的影响第47-49页
        3.4.6 不同浓度Salubrinal预处理对UVA辐射JB6细胞后eIF2α 磷酸化的改变第49-50页
        3.4.7 不同浓度GSK2606414预处理对UVA辐射JB6细胞后eIF2α 磷酸化的改变第50-51页
    3.5 讨论第51-52页
4 EIF2α 磷酸化对Nrf2-HO-1 通路的影响第52-62页
    4.1 引言第52页
    4.2 实验材料第52-55页
        4.2.1 主要仪器设备第52-53页
        4.2.2 实验试剂及药品第53-54页
        4.2.3 相关试剂的配制第54-55页
    4.3 相关实验方法第55-56页
        4.3.1 JB6细胞的增殖分化第55页
        4.3.2 实时定量PCR检测eIF2α 磷酸化改变不同时间点的Nrf2、Bach1、HO-1 mRNA的表达第55页
        4.3.3 Western Blotting检测EIF2α 磷酸化改变不同时间点的Grp78、P-eIF2α、eIF2α、Nrf2、Bach1、HO-1 蛋白的表达第55-56页
    4.4 实验结果第56-60页
        4.4.1 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点Nrf2 mRNA的表达的影响第56页
        4.4.2 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点Bach1 mRNA的表达的影响第56-57页
        4.4.3 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点HO-1 mRNA的表达的影响第57-58页
        4.4.4 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点Grp78、P-eIF2α、eIF2α、Nrf2、Bach1、HO-1 蛋白的表达的影响第58-60页
    4.5 讨论第60-62页
5 EIF2α 磷酸化对JB6细胞生物学意义的影响第62-72页
    5.1 引言第62页
    5.2 实验材料第62-64页
        5.2.1 主要仪器设备第62-63页
        5.2.2 实验试剂及药品第63-64页
        5.2.3 相关试剂的配制第64页
    5.3 相关实验方法第64-66页
        5.3.1 JB6细胞的增殖分化第64页
        5.3.2 Immunofluorescence检测细胞形态变化第64-65页
        5.3.3 MTS检测细胞活力第65页
        5.3.4 细胞内ROS水平检测第65页
        5.3.5 流式技术检测细胞周期的影响第65-66页
    5.4 实验结果第66-71页
        5.4.1 EIF2α 磷酸化的改变对细胞形态学的影响第66-67页
        5.4.2 EIF2α 磷酸化的改变对细胞活力的影响第67页
        5.4.3 EIF2α 磷酸化的改变对细胞内ROS水平的影响第67-68页
        5.4.4 EIF2α 磷酸化的改变对细胞周期的影响第68-71页
    5.5 讨论第71-72页
6 结论与展望第72-74页
    6.1 本研究主要结论第72页
    6.2 后期研究展望第72-74页
致谢第74-76页
参考文献第76-86页
附录第86-90页
    A. 作者在硕士期间发表的论文目录第86页
    B. 作者在硕士期间参与的项目第86页
    C. 作者在硕士期间取得的其他实验结果第86-90页

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