中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
1 绪论 | 第14-24页 |
1.1 问题提出与研究意义 | 第14-15页 |
1.2 国内外研究现状 | 第15-22页 |
1.2.1 紫外线(UVA)对皮肤的影响 | 第15-16页 |
1.2.2 UVA对内质网应激的影响 | 第16-17页 |
1.2.3 EIF2α 激酶和EIF2α 磷酸化的研究进展 | 第17-19页 |
1.2.4 UVA及NRF2-ARE信号通路的研究进展 | 第19-20页 |
1.2.5 血红素加氧酶1的研究进展 | 第20-22页 |
1.3 本文研究的目的和研究内容 | 第22-23页 |
1.3.1 研究目的 | 第22页 |
1.3.2 研究内容 | 第22-23页 |
1.4 本文的创新点 | 第23-24页 |
2 长波紫外线诱导小鼠角质形成细胞氧化损伤模型的建立 | 第24-32页 |
2.1 引言 | 第24页 |
2.2 实验材料 | 第24-26页 |
2.2.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.2.2 实验试剂及药品 | 第25页 |
2.2.3 相关试剂的配制 | 第25-26页 |
2.3 相关实验方法 | 第26-28页 |
2.3.1 JB6细胞的增殖分化 | 第26-27页 |
2.3.2 细胞分组(对照组及UVA辐射组) | 第27页 |
2.3.3 显微镜观察细胞形态的变化 | 第27页 |
2.3.4 Immunofluorescence 检测细胞形态变化 | 第27-28页 |
2.3.5 MTS检测细胞活力 | 第28页 |
2.4 结果 | 第28-31页 |
2.4.1 UVA辐射对JB6细胞形态方面的影响 | 第28页 |
2.4.2 UVA辐射对细胞骨架及细胞核的影响 | 第28-29页 |
2.4.3 不同剂量的UVA对细胞活力的影响 | 第29-31页 |
2.5 讨论 | 第31-32页 |
3 UVA辐射诱导的内质网与氧化应激的研究 | 第32-52页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 实验材料 | 第32-36页 |
3.2.1 主要仪器设备 | 第32-33页 |
3.2.2 实验试剂及药品 | 第33-35页 |
3.2.3 相关试剂的配制 | 第35-36页 |
3.3 相关实验方法 | 第36-41页 |
3.3.1 JB6细胞的增殖分化 | 第36页 |
3.3.2 Western blotting检测P-eIF2α、eIF2α、Nrf2、HO-1 等蛋白水平 | 第36-38页 |
3.3.3 QT-PCR检测不同剂量Nrf2、HO-1mRNA表达水平 | 第38-41页 |
3.3.4MTS检测细胞活力 | 第41页 |
3.4 实验结果 | 第41-51页 |
3.4.1 不同剂量的UVA辐射对eIF2α 磷酸化的影响 | 第41-42页 |
3.4.2 150kJ/m2UVA辐射JB6细胞不同时间点eIF2α 磷酸化的改变 | 第42-45页 |
3.4.3 150kJ/m2UVA辐射JB6细胞后不同时间点Nrf2、HO-1mRNA及蛋白的影响 | 第45-47页 |
3.4.5 Salubrinal药物、GSK2606414药物对细胞活力的影响 | 第47-49页 |
3.4.6 不同浓度Salubrinal预处理对UVA辐射JB6细胞后eIF2α 磷酸化的改变 | 第49-50页 |
3.4.7 不同浓度GSK2606414预处理对UVA辐射JB6细胞后eIF2α 磷酸化的改变 | 第50-51页 |
3.5 讨论 | 第51-52页 |
4 EIF2α 磷酸化对Nrf2-HO-1 通路的影响 | 第52-62页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 实验材料 | 第52-55页 |
4.2.1 主要仪器设备 | 第52-53页 |
4.2.2 实验试剂及药品 | 第53-54页 |
4.2.3 相关试剂的配制 | 第54-55页 |
4.3 相关实验方法 | 第55-56页 |
4.3.1 JB6细胞的增殖分化 | 第55页 |
4.3.2 实时定量PCR检测eIF2α 磷酸化改变不同时间点的Nrf2、Bach1、HO-1 mRNA的表达 | 第55页 |
4.3.3 Western Blotting检测EIF2α 磷酸化改变不同时间点的Grp78、P-eIF2α、eIF2α、Nrf2、Bach1、HO-1 蛋白的表达 | 第55-56页 |
4.4 实验结果 | 第56-60页 |
4.4.1 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点Nrf2 mRNA的表达的影响 | 第56页 |
4.4.2 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点Bach1 mRNA的表达的影响 | 第56-57页 |
4.4.3 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点HO-1 mRNA的表达的影响 | 第57-58页 |
4.4.4 EIF2α 磷酸化改变对不同时间点Grp78、P-eIF2α、eIF2α、Nrf2、Bach1、HO-1 蛋白的表达的影响 | 第58-60页 |
4.5 讨论 | 第60-62页 |
5 EIF2α 磷酸化对JB6细胞生物学意义的影响 | 第62-72页 |
5.1 引言 | 第62页 |
5.2 实验材料 | 第62-64页 |
5.2.1 主要仪器设备 | 第62-63页 |
5.2.2 实验试剂及药品 | 第63-64页 |
5.2.3 相关试剂的配制 | 第64页 |
5.3 相关实验方法 | 第64-66页 |
5.3.1 JB6细胞的增殖分化 | 第64页 |
5.3.2 Immunofluorescence检测细胞形态变化 | 第64-65页 |
5.3.3 MTS检测细胞活力 | 第65页 |
5.3.4 细胞内ROS水平检测 | 第65页 |
5.3.5 流式技术检测细胞周期的影响 | 第65-66页 |
5.4 实验结果 | 第66-71页 |
5.4.1 EIF2α 磷酸化的改变对细胞形态学的影响 | 第66-67页 |
5.4.2 EIF2α 磷酸化的改变对细胞活力的影响 | 第67页 |
5.4.3 EIF2α 磷酸化的改变对细胞内ROS水平的影响 | 第67-68页 |
5.4.4 EIF2α 磷酸化的改变对细胞周期的影响 | 第68-71页 |
5.5 讨论 | 第71-72页 |
6 结论与展望 | 第72-74页 |
6.1 本研究主要结论 | 第72页 |
6.2 后期研究展望 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
附录 | 第86-90页 |
A. 作者在硕士期间发表的论文目录 | 第86页 |
B. 作者在硕士期间参与的项目 | 第86页 |
C. 作者在硕士期间取得的其他实验结果 | 第86-90页 |