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热应激对虹鳟免疫指标及热休克蛋白基因HSP47 mRNA表达的影响

摘要第4-6页
Summary第6-7页
第一章 文献综述第11-26页
    1 虹鳟的一般生物学第11-12页
        1.1 形态特征第11-12页
        1.2 生活习性第12页
        1.3 繁殖习性第12页
    2 应激的概念第12-13页
        2.1 应激及应激源第12-13页
        2.2 热应激第13页
    3 应激对鱼类生理的影响第13-16页
        3.1 应激对鱼类神经和内分泌系统的影响第14页
        3.2 应激对鱼类抗氧化调节能力的影响第14-16页
        3.3 应激对鱼类其它免疫机能的影响第16页
    4 热休克蛋白(HSPs)与应激的关系第16-20页
        4.1 热休克蛋白简介第16-19页
        4.2 HSP47研究进展第19-20页
    5 mRNA表达水平的real-time FQ-PCR技术第20-26页
        5.1 Real-time FQ-PCR检测mRNA的优点第20页
        5.2 Real-time FQ-PCR的技术原理第20-21页
        5.3 Real-time PCR定量分析方法第21-26页
            5.3.1 绝对定量(Absolute Quantification,AQ)分析第21-22页
            5.3.2 相对定量(Relative Quantification,RQ)分析第22-26页
第二章 材料与方法第26-37页
    1 试验材料第26-29页
        1.1 试验动物第26页
        1.2 主要试剂及工具第26-27页
            1.2.1 试验试剂第26-27页
            1.2.2 试验工具第27页
        1.3 溶液配制第27-28页
            1.3.1 呼吸爆发测定相关试剂配制第27页
            1.3.2 RNA相关试剂配制第27-28页
            1.3.3 琼脂糖凝胶电泳试剂配制第28页
        1.4 主要仪器设备第28-29页
    2 试验设计和方法第29-37页
        2.1 试验设计和样品采集第29-30页
            2.1.1 试验设计第29页
            2.1.2 样品采集第29-30页
        2.2 虹鳟免疫指标的测定第30-31页
            2.2.1 RB的测定第30页
            2.2.2 COR、CA、SOD、MDA、C3、AKP和LDH的测定第30页
            2.2.3 数据处理第30-31页
        2.3 荧光定量PCR测定HSP47 mRNA表达水平第31-37页
            2.3.1 提取总RNA第31-32页
            2.3.2 RNA浓度及纯度检测第32-33页
            2.3.3 反转录成cDNA第33-34页
            2.3.4 引物设计与合成第34-35页
            2.3.5 普通PCR反应筛选扩增条件第35页
            2.3.6 实时荧光定量PCR (real-time FQ-PCR)第35-36页
            2.3.7 数据统计处理第36-37页
第三章 结果与分析第37-49页
    1 热应激下虹鳟免疫指标的变化第37-41页
        1.1 热应激下虹鳟血清COR和CA的变化第37-38页
        1.2 热应激下虹鳟脾脏RB和血清SOD、MDA的变化第38-40页
        1.3 热应激下虹鳟血清C3、AKP和LDH的变化第40-41页
    2 荧光定量PCR检测HSP47 mRNA表达水平第41-49页
        2.1 总RNA提取质量第41-42页
        2.2 荧光定量PCR第42-46页
            2.2.1 PCR扩增条件优化第42-43页
            2.2.2 Real-time FQ-PCR扩增效率和扩增质量评估第43-46页
        2.3 热应激下虹鳟各组织HSP47mRNA表达差异第46-49页
            2.3.1 HSP47 mRNA组织表达差异第46-47页
            2.3.2 同一组织HSP47 mRNA时间表达差异第47-49页
第四章 讨论第49-55页
    1 热应激对虹鳟免疫指标的影响第49-53页
        1.1 热应激对虹鳟血清COR和CA的影响第49-50页
        1.2 热应激对虹鳟脾脏RB和血清SOD、MDA的影响第50-51页
        1.3 热应激对虹鳟血清C3、AKP和LDH的影响第51-53页
    2 热应激对虹鳟各组织HSP47 mRNA表达水平的影响第53-55页
        2.1 热应激下虹鳟肝脏组织HSP47 mRNA的表达变化第53-54页
        2.2 热应激下虹鳟脾脏和头肾组织HSP47 mRNA的表达变化第54页
        2.3 热应激下虹鳟心脏组织HSP47 mRNA的表达变化第54-55页
第五章 结论第55-56页
    1 热应激下虹鳟免疫指标的变化第55页
    2 热应激下虹鳟组织中HSP47 mRNA表达量的变化第55-56页
参考文献第56-66页
附录:英文简写对照表第66-67页
致谢第67-68页
作者简介第68-69页
导师简介第69-70页

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