摘要 | 第4-6页 |
Summary | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1 虹鳟的一般生物学 | 第11-12页 |
1.1 形态特征 | 第11-12页 |
1.2 生活习性 | 第12页 |
1.3 繁殖习性 | 第12页 |
2 应激的概念 | 第12-13页 |
2.1 应激及应激源 | 第12-13页 |
2.2 热应激 | 第13页 |
3 应激对鱼类生理的影响 | 第13-16页 |
3.1 应激对鱼类神经和内分泌系统的影响 | 第14页 |
3.2 应激对鱼类抗氧化调节能力的影响 | 第14-16页 |
3.3 应激对鱼类其它免疫机能的影响 | 第16页 |
4 热休克蛋白(HSPs)与应激的关系 | 第16-20页 |
4.1 热休克蛋白简介 | 第16-19页 |
4.2 HSP47研究进展 | 第19-20页 |
5 mRNA表达水平的real-time FQ-PCR技术 | 第20-26页 |
5.1 Real-time FQ-PCR检测mRNA的优点 | 第20页 |
5.2 Real-time FQ-PCR的技术原理 | 第20-21页 |
5.3 Real-time PCR定量分析方法 | 第21-26页 |
5.3.1 绝对定量(Absolute Quantification,AQ)分析 | 第21-22页 |
5.3.2 相对定量(Relative Quantification,RQ)分析 | 第22-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
1 试验材料 | 第26-29页 |
1.1 试验动物 | 第26页 |
1.2 主要试剂及工具 | 第26-27页 |
1.2.1 试验试剂 | 第26-27页 |
1.2.2 试验工具 | 第27页 |
1.3 溶液配制 | 第27-28页 |
1.3.1 呼吸爆发测定相关试剂配制 | 第27页 |
1.3.2 RNA相关试剂配制 | 第27-28页 |
1.3.3 琼脂糖凝胶电泳试剂配制 | 第28页 |
1.4 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2 试验设计和方法 | 第29-37页 |
2.1 试验设计和样品采集 | 第29-30页 |
2.1.1 试验设计 | 第29页 |
2.1.2 样品采集 | 第29-30页 |
2.2 虹鳟免疫指标的测定 | 第30-31页 |
2.2.1 RB的测定 | 第30页 |
2.2.2 COR、CA、SOD、MDA、C3、AKP和LDH的测定 | 第30页 |
2.2.3 数据处理 | 第30-31页 |
2.3 荧光定量PCR测定HSP47 mRNA表达水平 | 第31-37页 |
2.3.1 提取总RNA | 第31-32页 |
2.3.2 RNA浓度及纯度检测 | 第32-33页 |
2.3.3 反转录成cDNA | 第33-34页 |
2.3.4 引物设计与合成 | 第34-35页 |
2.3.5 普通PCR反应筛选扩增条件 | 第35页 |
2.3.6 实时荧光定量PCR (real-time FQ-PCR) | 第35-36页 |
2.3.7 数据统计处理 | 第36-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-49页 |
1 热应激下虹鳟免疫指标的变化 | 第37-41页 |
1.1 热应激下虹鳟血清COR和CA的变化 | 第37-38页 |
1.2 热应激下虹鳟脾脏RB和血清SOD、MDA的变化 | 第38-40页 |
1.3 热应激下虹鳟血清C3、AKP和LDH的变化 | 第40-41页 |
2 荧光定量PCR检测HSP47 mRNA表达水平 | 第41-49页 |
2.1 总RNA提取质量 | 第41-42页 |
2.2 荧光定量PCR | 第42-46页 |
2.2.1 PCR扩增条件优化 | 第42-43页 |
2.2.2 Real-time FQ-PCR扩增效率和扩增质量评估 | 第43-46页 |
2.3 热应激下虹鳟各组织HSP47mRNA表达差异 | 第46-49页 |
2.3.1 HSP47 mRNA组织表达差异 | 第46-47页 |
2.3.2 同一组织HSP47 mRNA时间表达差异 | 第47-49页 |
第四章 讨论 | 第49-55页 |
1 热应激对虹鳟免疫指标的影响 | 第49-53页 |
1.1 热应激对虹鳟血清COR和CA的影响 | 第49-50页 |
1.2 热应激对虹鳟脾脏RB和血清SOD、MDA的影响 | 第50-51页 |
1.3 热应激对虹鳟血清C3、AKP和LDH的影响 | 第51-53页 |
2 热应激对虹鳟各组织HSP47 mRNA表达水平的影响 | 第53-55页 |
2.1 热应激下虹鳟肝脏组织HSP47 mRNA的表达变化 | 第53-54页 |
2.2 热应激下虹鳟脾脏和头肾组织HSP47 mRNA的表达变化 | 第54页 |
2.3 热应激下虹鳟心脏组织HSP47 mRNA的表达变化 | 第54-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
1 热应激下虹鳟免疫指标的变化 | 第55页 |
2 热应激下虹鳟组织中HSP47 mRNA表达量的变化 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
附录:英文简写对照表 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
导师简介 | 第69-70页 |