| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-24页 |
| 一、非小细胞肺癌 | 第10-12页 |
| 二、TGF-Β信号通路与肿瘤 | 第12-14页 |
| 三、表观遗传学 | 第14-15页 |
| 四、DNA甲基化研究与肿瘤发生发展的关系 | 第15-19页 |
| 参考文献 | 第19-24页 |
| 一、前言 | 第24-25页 |
| 二、材料和方法 | 第25-48页 |
| （一）材料 | 第25-30页 |
| 1、常用试剂见表 1： | 第25-26页 |
| 2、常用试剂的配制： | 第26-28页 |
| 3、Amp储液的配制 | 第28-29页 |
| 4、常用仪器见表 2： | 第29-30页 |
| （二）研究方法与步骤 | 第30-48页 |
| 1、细胞培养 | 第30-31页 |
| 2、5-Aza去甲基化药物的溶解 | 第31页 |
| 3、5-Aza去甲基化药物处理细胞 | 第31-32页 |
| 4、组织/细胞DNA的提取 | 第32页 |
| 5、组织/细胞RNA的提取 | 第32-33页 |
| 6、DNA的亚硫酸氢盐修饰 | 第33-34页 |
| 7、Transwell细胞转移和侵袭检测 | 第34页 |
| 8、功能性CpG的位点的筛选 | 第34-35页 |
| 9、重亚硫酸盐测序PCR（Bisulfite Sequencing PCR, BSP）检测-459CpG位点甲基化频率 | 第35页 |
| 10、PCR产物的T载体克隆 | 第35-36页 |
| 11、甲基化和非甲基化重组质粒的构建 | 第36-37页 |
| 12、菌液质粒DNA的抽提 | 第37页 |
| 13、Western Blot | 第37-39页 |
| 14、电泳迁移率EMSA | 第39-42页 |
| 15、染色质免疫共沉淀ChIP | 第42-46页 |
| 16、siRNA瞬时共转染细胞 | 第46-48页 |
| 三、结果 | 第48-59页 |
| （一） DNA甲基化影响RNF111的表达 | 第48-50页 |
| （二） RNF111基因近端启动子区的-459CPG位点是一个功能性位点 | 第50-52页 |
| （三） SP1能够靶向作用于RNF111基因启动子包含-459CPG位点的区域，并且增加RNF111的表达 | 第52-54页 |
| （四） RNF111基因-459CPG位点的高甲基化能够降低转录因子的结合能力 | 第54-55页 |
| （五）DNA低甲基化导致的RNF111上调对TGF-Β/SMAD信号通路的影响·46 | 第55-56页 |
| （六） RNF111增强了TGF-Β/SMAD信号通路的活性和非小细胞肺癌细胞株的转移和侵袭能力 | 第56-59页 |
| 四、讨论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
