中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
一、前言 | 第11-14页 |
二、材料和方法 | 第14-35页 |
2.1 材料 | 第14-19页 |
2.1.1 细胞株与组织样本 | 第14页 |
2.1.2 实验用仪器和试剂 | 第14-16页 |
2.1.3 常用溶液的配制 | 第16-19页 |
2.2 方法 | 第19-35页 |
2.2.1 生物信息学方法 | 第19页 |
2.2.2 细胞培养 | 第19-21页 |
2.2.3 细胞和组织中总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.4 Real-Time PCR | 第22-24页 |
2.2.5 细胞中总蛋白的提取 | 第24页 |
2.2.6 Western Blot | 第24-28页 |
2.2.7 mcroRNA瞬时转染细胞 | 第28-29页 |
2.2.8 细胞增殖检测 | 第29页 |
2.2.9 集落形成实验 | 第29-30页 |
2.2.10 重组质粒的构建 | 第30-32页 |
2.2.11 microRNA对LHX2基因作用机制的研究 | 第32-34页 |
2.2.12 统计方法分析结果 | 第34-35页 |
三、结果 | 第35-47页 |
3.1 LHX2在NSCLC细胞和组织中表达水平的检测 | 第35-37页 |
3.1.1 在NSCLC细胞中LHX2 m RNA和蛋白的表达上调 | 第35-36页 |
3.1.2 在NSCLC组织中LHX2 m RNA表达上调 | 第36-37页 |
3.2 LHX2对NSCLC细胞增殖的影响 | 第37-39页 |
3.2.1 用si-LHX2-1 和si-LHX2-2 干扰NSCLC的LHX2的表达 | 第37-38页 |
3.2.2 LHX2促进NSCLC细胞的增殖 | 第38-39页 |
3.3 LHX2与miR-1238的靶向作用关系 | 第39-42页 |
3.3.1查找LHX2基因 3’UTR序列以及预测对其有调控作用的microRNA | 第39-40页 |
3.3.2 软件预测mi R-1238和LHX2基因 3’UTR序列具有结合位点 | 第40页 |
3.3.3 双荧光素酶报告基因活性检测结果证明miR-1238可以直接与LHX2基因 3’UTR种子序列互补结合 | 第40-41页 |
3.3.4 mi R-1238对内源性LHX2的调控 | 第41-42页 |
3.4 miR-1238在NSCLC细胞和组织的表达水平以及LHX2的相互作用关系 | 第42-45页 |
3.4.1 在NSCLC细胞中miR-1238表达下调 | 第42-43页 |
3.4.2 在NSCLC组织中miR-1238表达下调 | 第43-44页 |
3.4.3 NSCLC中LHX2与miR-1238的表达是负相关的 | 第44-45页 |
3.5 miR-1238对肺癌细胞增殖的影响 | 第45-47页 |
全文总结 | 第47-48页 |
讨论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
综述 非编码RNA在肿瘤发生中的研究进展 | 第55-67页 |
参考文献 | 第62-67页 |
攻读硕士学位期间公开发表的学术论文 | 第67-68页 |
附录:英文缩略词表 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |