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非小细胞肺癌中LHX2基因异常表达的microRNA调控机制

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
一、前言第11-14页
二、材料和方法第14-35页
    2.1 材料第14-19页
        2.1.1 细胞株与组织样本第14页
        2.1.2 实验用仪器和试剂第14-16页
        2.1.3 常用溶液的配制第16-19页
    2.2 方法第19-35页
        2.2.1 生物信息学方法第19页
        2.2.2 细胞培养第19-21页
        2.2.3 细胞和组织中总RNA的提取第21-22页
        2.2.4 Real-Time PCR第22-24页
        2.2.5 细胞中总蛋白的提取第24页
        2.2.6 Western Blot第24-28页
        2.2.7 mcroRNA瞬时转染细胞第28-29页
        2.2.8 细胞增殖检测第29页
        2.2.9 集落形成实验第29-30页
        2.2.10 重组质粒的构建第30-32页
        2.2.11 microRNA对LHX2基因作用机制的研究第32-34页
        2.2.12 统计方法分析结果第34-35页
三、结果第35-47页
    3.1 LHX2在NSCLC细胞和组织中表达水平的检测第35-37页
        3.1.1 在NSCLC细胞中LHX2 m RNA和蛋白的表达上调第35-36页
        3.1.2 在NSCLC组织中LHX2 m RNA表达上调第36-37页
    3.2 LHX2对NSCLC细胞增殖的影响第37-39页
        3.2.1 用si-LHX2-1 和si-LHX2-2 干扰NSCLC的LHX2的表达第37-38页
        3.2.2 LHX2促进NSCLC细胞的增殖第38-39页
    3.3 LHX2与miR-1238的靶向作用关系第39-42页
        3.3.1查找LHX2基因 3’UTR序列以及预测对其有调控作用的microRNA第39-40页
        3.3.2 软件预测mi R-1238和LHX2基因 3’UTR序列具有结合位点第40页
        3.3.3 双荧光素酶报告基因活性检测结果证明miR-1238可以直接与LHX2基因 3’UTR种子序列互补结合第40-41页
        3.3.4 mi R-1238对内源性LHX2的调控第41-42页
    3.4 miR-1238在NSCLC细胞和组织的表达水平以及LHX2的相互作用关系第42-45页
        3.4.1 在NSCLC细胞中miR-1238表达下调第42-43页
        3.4.2 在NSCLC组织中miR-1238表达下调第43-44页
        3.4.3 NSCLC中LHX2与miR-1238的表达是负相关的第44-45页
    3.5 miR-1238对肺癌细胞增殖的影响第45-47页
全文总结第47-48页
讨论第48-49页
参考文献第49-55页
综述 非编码RNA在肿瘤发生中的研究进展第55-67页
    参考文献第62-67页
攻读硕士学位期间公开发表的学术论文第67-68页
附录:英文缩略词表第68-69页
致谢第69-70页

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