| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献回顾 | 第15-22页 |
| 一、核因子кB概述 | 第15-16页 |
| 二、NF-кB在破骨细胞中的作用 | 第16-17页 |
| 三、NF-кB在成骨细胞中的作用 | 第17-18页 |
| 四、RNA干扰的概述 | 第18-20页 |
| 五、慢病毒载体的概述 | 第20-22页 |
| 实验一 小鼠RNA干扰NF-кB/p65慢病毒载体的构建 | 第22-37页 |
| 1 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.1 细胞株 | 第22页 |
| 1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.1 小鼠NF-кB/p65 siRNA序列设计及合成 | 第23-25页 |
| 2.2 慢病毒shRNA载体构建 | 第25-28页 |
| 2.3 慢病毒包装与滴度测定 | 第28-30页 |
| 3 结果 | 第30-35页 |
| 3.1 重组载体GV248 p65的鉴定 | 第30-34页 |
| 3.2 慢病毒包装与滴度测定 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 实验二 NF-кB/p65基因的RNAi载体在小鼠成骨样细胞中的抑制效应 | 第37-46页 |
| 1 实验材料 | 第37-38页 |
| 1.1 细胞株 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-42页 |
| 2.1 实验分组 | 第38页 |
| 2.2 小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的复苏及传代 | 第38-39页 |
| 2.3 慢病毒感染MC3T3-E1细胞 | 第39页 |
| 2.4 Real-time PCR检测NF-кB/p65基因mRNA水平的表达 | 第39-41页 |
| 2.5 Western Blot检测NF-кB/p65基因蛋白水平的表达 | 第41页 |
| 2.6 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-43页 |
| 3.1 构建的三个慢病毒感染MC3T3-E1细胞后Real-time PCR检测NF-кB/p65mRNA的表达 | 第42页 |
| 3.2 构建的三个慢病毒感染MC3T3-E1细胞后Western blot检测NF-кB/p65基因蛋白水平的表达 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 实验三 构建的慢病毒载体感染MC3T3-E1细胞后细胞功能的研究 | 第46-60页 |
| 1 实验材料 | 第46-47页 |
| 1.1 细胞株 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 1.3 主要仪器 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-51页 |
| 2.1 实验分组 | 第47-48页 |
| 2.2 小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的复苏及传代 | 第48页 |
| 2.3 小鼠成骨样细胞MC3T3-E1感染慢病毒LV-p65-RNAi（38230-1） | 第48页 |
| 2.4 MTT比色实验 | 第48页 |
| 2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡情况 | 第48-49页 |
| 2.6 Real-time PCR检测ALP、OCN、RANKL、OPG基因mRNA水平的表达 | 第49-50页 |
| 2.7 Western Blot检测ALP、OCN、RANKL、OPG基因蛋白水平的表达 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-58页 |
| 3.1 小鼠成骨样细胞MC3T3-E1感染慢病毒LV-p65-RNAi（38230-1） | 第51页 |
| 3.2 抑制NF-кB/p65表达对成骨细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
| 3.3 抑制NF-кB/p65表达对成骨细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 3.4 抑制NF-кB/p65表达对成骨细胞ALP、OCN、OPG、RANKL基因表达的影响 | 第53-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 个人简历和研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
