| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 糖化酶简介 | 第12-14页 |
| 1.2 黑曲霉生理特性介绍 | 第14-15页 |
| 1.3 研究背景 | 第15-18页 |
| 1.4 分析方法 | 第18-20页 |
| 1.4.1 淬灭和抽提 | 第18-19页 |
| 1.4.2 IDMS方法 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的、方法及意义 | 第20-22页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第20页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第20页 |
| 1.5.3 研究意义 | 第20-22页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第22-29页 |
| 2.1 菌种 | 第22页 |
| 2.2 培养基 | 第22-24页 |
| 2.2.1 平板培养基组成 | 第22页 |
| 2.2.2 摇瓶培养基组成 | 第22页 |
| 2.2.3 批发酵培养基组成 | 第22-23页 |
| 2.2.4 恒化培养培养基组成 | 第23页 |
| 2.2.5 ~(13)C内标制备培养基组成 | 第23-24页 |
| 2.3 实验平台 | 第24-26页 |
| 2.3.1 批发酵实验平台 | 第24页 |
| 2.3.2 碳限制恒化实验平台 | 第24-25页 |
| 2.3.3 ~(13)C内标制备实验平台 | 第25页 |
| 2.3.4 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.4 分析检测方法 | 第26-29页 |
| 2.4.1 生物量测量 | 第26页 |
| 2.4.2 胞外葡萄糖的测量 | 第26页 |
| 2.4.3 糖化酶酶活的测量 | 第26-27页 |
| 2.4.4 胞外有机酸的测定 | 第27页 |
| 2.4.5 胞内氨基酸的测定 | 第27页 |
| 2.4.6 胞内有机酸、磷酸糖和核苷酸类物质测定 | 第27页 |
| 2.4.7 发酵尾气中CER、OUR的测定 | 第27-29页 |
| 第3章 甘油管保存黑曲霉孢子活性的验证与黑曲霉恒化培养研究 | 第29-42页 |
| 3.1 引言 | 第29-30页 |
| 3.2 实验设计 | 第30页 |
| 3.2.1 甘油保种活性验证实验设计 | 第30页 |
| 3.2.2 恒化培养实验设计 | 第30页 |
| 3.3 材料和方法 | 第30-32页 |
| 3.3.1 材料 | 第30页 |
| 3.3.2 甘油保种及活性验证实验方法 | 第30-31页 |
| 3.3.3 恒化实验方法 | 第31页 |
| 3.3.4 生物分析方法 | 第31-32页 |
| 3.4 种子活性验证实验结果与分析 | 第32-35页 |
| 3.4.1 发酵宏观参数分析 | 第32页 |
| 3.4.2 菌体糖耗速率与菌浓分析 | 第32-33页 |
| 3.4.3 产物与副产物的生成情况分析 | 第33-34页 |
| 3.4.4 菌型分析 | 第34-35页 |
| 3.5 黑曲霉在不同比生长速率下生理特性分析 | 第35-39页 |
| 3.5.1 黑曲霉恒化培养稳态的建立 | 第35-37页 |
| 3.5.2 菌浓和稀释率的相关系 | 第37-38页 |
| 3.5.3 糖化酶的合成与稀释率的相关系 | 第38-39页 |
| 3.5.4 二氧化碳释放速率与稀释率的相关性 | 第39页 |
| 3.6 黑曲霉恒化培养副产物分析 | 第39-41页 |
| 3.7 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 基于葡萄糖脉冲的IDMS标品制备 | 第42-52页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验设计 | 第42-43页 |
| 4.3 材料和方法 | 第43-44页 |
| 4.3.1 菌种和培养基 | 第43页 |
| 4.3.2 培养方法 | 第43页 |
| 4.3.3 快速取样 | 第43-44页 |
| 4.3.4 乙醇抽提 | 第44页 |
| 4.3.5 浓缩分装 | 第44页 |
| 4.3.6 LC-MS分析 | 第44页 |
| 4.3.7 GC-MS分析 | 第44页 |
| 4.3.8 标准曲线的绘制 | 第44页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第44-51页 |
| 4.4.1 发酵过程宏观数据分析 | 第44-46页 |
| 4.4.2 胞内有机酸浓度分析 | 第46-47页 |
| 4.4.3 胞内磷酸糖浓度分析 | 第47页 |
| 4.4.4 胞内氨基酸浓度分析 | 第47-48页 |
| 4.4.5 胞内核苷酸浓度分析 | 第48-49页 |
| 4.4.6 标准曲线的建立 | 第49-50页 |
| 4.4.7 结果讨论 | 第50-51页 |
| 4.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第5章 波动环境下黑曲霉中心碳代谢动态响应机制研究 | 第52-71页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 实验设计 | 第52-53页 |
| 5.3 材料和方法 | 第53-56页 |
| 5.3.1 菌种和培养基 | 第53页 |
| 5.3.2 恒化培养的建立 | 第53-54页 |
| 5.3.3 快速取样装置 | 第54页 |
| 5.3.4 胞外代谢物快速取样 | 第54-55页 |
| 5.3.5 胞内代谢物快速取样淬灭 | 第55页 |
| 5.3.6 胞内代谢物沸乙醇提取 | 第55页 |
| 5.3.7 样品浓缩 | 第55页 |
| 5.3.8 胞外代谢物定量分析 | 第55页 |
| 5.3.9 胞内代谢物定量分析 | 第55-56页 |
| 5.4 波动环境下黑曲霉中心碳代谢动态响应分析 | 第56-69页 |
| 5.4.1 黑曲霉恒化培养宏观参数分析 | 第56-57页 |
| 5.4.2 胞外葡萄糖消耗情况 | 第57-58页 |
| 5.4.3 糖化酶合成关键前体氨基酸的变化 | 第58-61页 |
| 5.4.4 糖酵解途径代谢物变化情况 | 第61-63页 |
| 5.4.5 戊糖磷酸途径代谢物变化情况 | 第63-65页 |
| 5.4.6 三羧酸循环代谢物变化情况 | 第65-66页 |
| 5.4.7 能量代谢 | 第66-69页 |
| 5.4.8 产物和副产物分析 | 第69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第6章 总结与展望 | 第71-73页 |
| 6.1 总结 | 第71-72页 |
| 6.2 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 在读期间论文发表情况 | 第80页 |