| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩写词简表 | 第14-15页 |
| 综述一：乌梅丸临床应用和现代研究进展 | 第15-26页 |
| 1 临床应用 | 第15-20页 |
| 1.1 消化系统 | 第15-17页 |
| 1.2 呼吸系统 | 第17页 |
| 1.3 心脑血管系统 | 第17-18页 |
| 1.4 内分泌系统 | 第18页 |
| 1.5 泌尿生殖系统 | 第18-19页 |
| 1.6 儿科疾病 | 第19页 |
| 1.7 肿瘤疾病 | 第19页 |
| 1.8 其他杂病 | 第19-20页 |
| 2 实验研究 | 第20-21页 |
| 2.1 溃疡性结肠炎(UC) | 第20页 |
| 2.2 肿瘤 | 第20-21页 |
| 2.3 糖尿病及其并发症 | 第21页 |
| 2.4 肛门瘙痒 | 第21页 |
| 3 展望 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-26页 |
| 综述二：抗胰腺癌中药作用机制研究进展 | 第26-33页 |
| 1 抑制胰腺癌细胞凋亡 | 第26-29页 |
| 1.1 阻滞肿瘤细胞增殖周期 | 第26-27页 |
| 1.2 作用凋亡信号传导途径诱导凋亡 | 第27页 |
| 1.3 调控癌基因和抑癌基因的表达 | 第27-28页 |
| 1.4 降低端粒酶的活性 | 第28页 |
| 1.5 激活活性氧途径及线粒体途径 | 第28-29页 |
| 2 增强人体免疫作用 | 第29页 |
| 3 抑制肿瘤细胞转移 | 第29页 |
| 4 逆转肿瘤的多药耐药性 | 第29-30页 |
| 5 抑制肿瘤血管生长 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 第一部分 加味乌梅丸对小鼠人胰腺癌SW1990细胞移植瘤生长的抑制及诱导其细胞凋亡的实验研究 | 第33-49页 |
| 前言 | 第33-34页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1 细胞株来源 | 第34页 |
| 1.2 动物来源 | 第34页 |
| 1.3 药物来源 | 第34页 |
| 1.4 主要试剂与仪器 | 第34-35页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第35页 |
| 1.5.1 1640培养基配置 | 第35页 |
| 1.5.2 0.5%胰蛋白酶的配置 | 第35页 |
| 1.5.3 胎牛血清准备 | 第35页 |
| 1.5.4 10X磷酸盐缓冲液(PBS)配置 | 第35页 |
| 1.6 细胞株SW1990复苏、培养、传代 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-37页 |
| 2.1 NOD/SCID小鼠移植瘤模型建立 | 第36页 |
| 2.2 分组给药 | 第36页 |
| 2.3 瘤径测量 | 第36页 |
| 2.4 瘤重测量 | 第36页 |
| 2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 2.6 TUNEL(DNA断裂的原位末端标记法)检测胰腺癌细胞凋亡 | 第37页 |
| 2.7 统计学方法 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-44页 |
| 3.1 移植瘤造模成功 | 第38页 |
| 3.2 肿瘤生长曲线 | 第38-40页 |
| 3.3 对各组荷瘤小鼠体重的影响 | 第40页 |
| 3.4 各组瘤重测量及抑瘤率 | 第40页 |
| 3.5 流式细胞仪检测细胞早期凋亡结果 | 第40-42页 |
| 3.6 TUNEL法检测细胞凋亡结果 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 4.1 加味乌梅丸治疗胰腺癌理论基础 | 第44页 |
| 4.2 加味乌梅丸抑瘤作用初步分析 | 第44-45页 |
| 4.3 选择AnnexinV/PI流式细胞分析法联合TUNEL法检测细胞凋亡的原因 | 第45页 |
| 5 小结 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第二部分 基于iTRAQ技术的蛋白质组学研究加味乌梅丸抑制小鼠人胰腺癌细胞移植瘤作用机制 | 第49-92页 |
| 前言 | 第49页 |
| 1 材料和试剂 | 第49-51页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.2 主要试剂 | 第49-50页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第51页 |
| 1.4.1 胰酶配制 | 第51页 |
| 1.4.2 RIPA提取液 | 第51页 |
| 1.4.3 强阳离子交换缓冲液配制 | 第51页 |
| 2 试验方法 | 第51-56页 |
| 2.1 样品质检 | 第51-53页 |
| 2.1.1 蛋白提取 | 第51-52页 |
| 2.1.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第52-53页 |
| 2.1.3 蛋白SDS-PAGE电泳 | 第53页 |
| 2.2 iTRAQ标记 | 第53-54页 |
| 2.2.1 样品预处理 | 第53页 |
| 2.2.2 丙酮沉淀清洁样品 | 第53页 |
| 2.2.3 半胱氨酸还原和碘乙酰化 | 第53-54页 |
| 2.2.4 蛋白胰酶酶切 | 第54页 |
| 2.2.5 用iTRAQ试剂标记酶切样品 | 第54页 |
| 2.2.6 混合iTRAQ试剂标记好的样品 | 第54页 |
| 2.3 强阳离子柱样品分级 | 第54-55页 |
| 2.3.1 强阳离子交换色谱缓冲液 | 第54页 |
| 2.3.2 色谱柱平衡 | 第54页 |
| 2.3.3 运行多肽测试品确认仪器和色谱柱状态良好 | 第54页 |
| 2.3.4 梯度洗脱 | 第54页 |
| 2.3.5 脱盐处理 | 第54-55页 |
| 2.4 质谱检测 | 第55-56页 |
| 2.5 数据分析 | 第56页 |
| 2.5.1 质谱数据分析及差异蛋白选择 | 第56页 |
| 2.5.2 差异蛋白的GO注释 | 第56页 |
| 2.5.3 KEGG信号通路分析 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-77页 |
| 3.1 样品质检结果 | 第56-59页 |
| 3.1.1 蛋白浓度测定结果 | 第56-57页 |
| 3.1.2 蛋白SDS-PAGE电泳 | 第57-59页 |
| 3.2 样品标记结果 | 第59-61页 |
| 3.3 二维液相色谱图 | 第61页 |
| 3.3.1 第一维液相色谱分离结果 | 第61页 |
| 3.3.2 第二维液相色谱分离结果 | 第61页 |
| 3.4 质谱检测及差异蛋白鉴定 | 第61-69页 |
| 3.5 蛋白的GO注释结果 | 第69-74页 |
| 3.6 KEGG信号通路分析结果 | 第74-77页 |
| 4 讨论 | 第77-85页 |
| 4.1 胰腺癌治疗概述 | 第77-78页 |
| 4.2 乌梅丸治疗胰腺癌进一步分析 | 第78页 |
| 4.3 本实验选用蛋白组学方法的原因 | 第78-79页 |
| 4.4 重点差异蛋白的具体分析 | 第79-84页 |
| 4.5 GO及KEGG结果讨论 | 第84-85页 |
| 5 小结 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 第三部分 部分差异表达蛋白的再验证 | 第92-107页 |
| 前言 | 第92页 |
| 1 材料及试剂 | 第92-96页 |
| 1.1 材料 | 第92页 |
| 1.2 试剂及耗材 | 第92-94页 |
| 1.2.1 抗体 | 第92-93页 |
| 1.2.2 其他试剂及耗材 | 第93-94页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第94页 |
| 1.3 试剂配制 | 第94-96页 |
| 2 实验方法 | 第96-99页 |
| 2.1 蛋白免疫印迹 | 第96-98页 |
| 2.1.1 蛋白浓度调整 | 第96页 |
| 2.1.2 SDS-PAGE方法分离蛋白 | 第96-97页 |
| 2.1.3 蛋白转移 | 第97页 |
| 2.1.4 膜的封闭和抗体孵育方法 | 第97页 |
| 2.1.5 ECL化学发光 | 第97-98页 |
| 2.1.6 图像分析 | 第98页 |
| 2.1.7 统计学方法 | 第98页 |
| 2.1.8 内参蛋白WB正式实验 | 第98页 |
| 2.2 免疫组化实验步骤 | 第98-99页 |
| 3 结果 | 第99-104页 |
| 3.1 蛋白免疫印记结果 | 第99-102页 |
| 3.2 免疫组化结果 | 第102-104页 |
| 4 讨论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 个人简历 | 第108页 |
