摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-15页 |
1.1 骨骼肌卫星细胞的生成概述 | 第12页 |
1.2 MicroRNAs研究进展 | 第12-13页 |
1.3 MicroRNA在肌肉中的作用 | 第13页 |
1.4 miR-2425 相关靶基因及作用 | 第13-14页 |
1.5 研究目的与意义 | 第14-15页 |
2 材料与方法 | 第15-31页 |
2.1 实验材料 | 第15-17页 |
2.1.1 菌株、质粒与细胞 | 第15页 |
2.1.2 工具酶、试剂盒和其他试剂 | 第15页 |
2.1.3 实验主要仪器 | 第15-16页 |
2.1.4 分析软件 | 第16页 |
2.1.5 主要的试剂配制 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-30页 |
2.2.1 分离原代牛MDSCs细胞 | 第17-18页 |
2.2.2 细胞转染 | 第18页 |
2.2.3 miR-2425 表达检测 | 第18-20页 |
2.2.4 miR-2425 靶基因验证 | 第20-25页 |
2.2.5 miR-2425 对牛MDSCs增殖的影响 | 第25-27页 |
2.2.6 miR-2425 表达模式的验证 | 第27-30页 |
2.3 统计分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-39页 |
3.1 miR-2425 在牛MDSCs增殖分化不同时期表达 | 第31-32页 |
3.2 miR-2425 对牛MDSCs增殖和分化的影响 | 第32-34页 |
3.2.1 Ed U检测miR-2425 对牛MDSCs增殖的影响 | 第32页 |
3.2.2 流式细胞术检测牛MDSCs的细胞周期 | 第32页 |
3.2.3 蛋白质印迹Western blot检测增殖、分化相关基因的表达 | 第32-33页 |
3.2.4 Desmin免疫荧光检测miR-2425 对牛MDSCs分化的影响 | 第33-34页 |
3.3.miR-2425 靶基因的验证 | 第34-35页 |
3.3.1 miR-2425 靶向调节基因Myo G和RAD9A功能鉴定 | 第35页 |
3.4 RAD9A抑制细胞增殖实验 | 第35-37页 |
3.5 miR-2425 表达模式的验证 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |