| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 奶牛乳腺发育及泌乳机制 | 第11-12页 |
| 1.1.1 奶牛乳腺发育 | 第11-12页 |
| 1.1.2 奶牛乳腺泌乳机制 | 第12页 |
| 1.2 细胞增殖的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 细胞增殖与乳腺发育和泌乳 | 第12-13页 |
| 1.2.2 影响细胞增殖的信号分子 | 第13-15页 |
| 1.3 SYK基因的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 SYK简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 SYK的主要生物学功能 | 第16页 |
| 1.3.3 SYK基因对细胞增殖的调节 | 第16-17页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-37页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第18-21页 |
| 2.1.1 实验动物的选取 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 所需试剂的配制 | 第19-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21页 |
| 2.2 奶牛乳腺组织中SYK的表达与定位研究 | 第21-24页 |
| 2.2.1 奶牛乳腺组织总蛋白的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 Western blotting检测奶牛乳腺组织中SYK的表达含量 | 第22-23页 |
| 2.2.3 免疫荧光检测奶牛乳腺组织中SYK的表达部位 | 第23-24页 |
| 2.3 SYK基因对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响研究 | 第24-32页 |
| 2.3.1 奶牛乳腺上皮细胞培养 | 第24页 |
| 2.3.2 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.3.3 SYK基因沉寂检验基因功能 | 第25-27页 |
| 2.3.4 SYK基因过表达检验基因功能 | 第27-32页 |
| 2.4 SYK基因调节细胞增殖的机制 | 第32-36页 |
| 2.4.1 奶牛乳腺组织基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.4.2 AKT1基因启动子区引物的设计 | 第33页 |
| 2.4.3 AKT1基因启动子区PCR扩增 | 第33-34页 |
| 2.4.4 PCR产物纯化 | 第34页 |
| 2.4.5 提取质粒 | 第34页 |
| 2.4.6 带粘性末端质粒的制备 | 第34-35页 |
| 2.4.7 连接与转化 | 第35页 |
| 2.4.8 AKT1启动子的p GL3真核表达载体的鉴定 | 第35页 |
| 2.4.9 去内毒素质粒的提取 | 第35页 |
| 2.4.10 去内毒素质粒转染奶牛乳腺上皮细胞 | 第35-36页 |
| 2.4.11 荧光素酶活性检测 | 第36页 |
| 2.5 数据处理与统计分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 奶牛乳腺组织中SYK的表达与定位 | 第37-39页 |
| 3.1.1 奶牛乳腺组织中SYK的表达含量变化 | 第37-38页 |
| 3.1.2 奶牛乳腺组织中SYK的表达部位 | 第38-39页 |
| 3.2 SYK基因对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第39-47页 |
| 3.2.1 奶牛乳腺上皮细胞原代培养 | 第39-40页 |
| 3.2.2 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.3 SYK基因沉寂对细胞增殖的影响 | 第41-43页 |
| 3.2.4 SYK基因过表达对细胞增殖的影响 | 第43-47页 |
| 3.3 SYK基因调节奶牛乳腺上皮细胞增殖的机制 | 第47-49页 |
| 3.3.1 AKT1基因启动子区PCR扩增 | 第47页 |
| 3.3.2 p GL3-AKT1真核表达载体构建结果 | 第47页 |
| 3.3.3 荧光素酶活性检测结果 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 奶牛乳腺组织中SYK基因的表达与定位分析 | 第49页 |
| 4.2 SYK基因对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 SYK基因调节乳腺上皮细胞增殖的机制 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第59页 |
