中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略语英汉对照表 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-36页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 骨再生研究现状 | 第12-15页 |
1.2.1 骨再生过程 | 第12-14页 |
1.2.2 间充质干细胞与骨再生 | 第14-15页 |
1.3 临床上促进骨再生的方法 | 第15-20页 |
1.3.1 自体骨移植 | 第16页 |
1.3.2 异体骨移植 | 第16页 |
1.3.3 骨移植替代物 | 第16-20页 |
1.4 生物医用钛合金植入物简介 | 第20-22页 |
1.5 钛合金骨修复材料表面生物功能化改性方法 | 第22-28页 |
1.5.1 钛合金表面拓扑结构改性 | 第22-24页 |
1.5.2 钛合金表面生长因子功能化涂层改性 | 第24-26页 |
1.5.3 钛合金表面基因功能化改性 | 第26-28页 |
1.6 microRNA及其在骨再生中的作用 | 第28-32页 |
1.6.1 microRNA简介 | 第28-30页 |
1.6.2 microRNA与间充质干细胞成骨分化 | 第30-32页 |
1.7 用于骨修复基因投递方法研究进展 | 第32-34页 |
1.8 本课题的研究目的与选题意义 | 第34-36页 |
第二章 microRNA-21 诱导间充质干细胞成骨分化机制研究 | 第36-53页 |
2.1 引言 | 第36-37页 |
2.2 实验部分 | 第37-41页 |
2.2.1 主要原料与试剂 | 第37-38页 |
2.2.2 实验仪器 | 第38页 |
2.2.3 人脐带血间充质干细胞的提取和表征 | 第38-39页 |
2.2.4 细胞转染及成骨诱导 | 第39页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第39-40页 |
2.2.6 Western Blotting | 第40页 |
2.2.7 β-catenin免疫荧光分析 | 第40页 |
2.2.8 统计分析方法 | 第40-41页 |
2.3 实验结果和讨论 | 第41-51页 |
2.3.1 人脐带血间充质干细胞的表征 | 第41-42页 |
2.3.2 人脐带血间充质干细胞成骨分化中miR-21 的表达水平 | 第42-43页 |
2.3.3 miR-21 转染及表达效果分析 | 第43-45页 |
2.3.4 miR-21 诱导人脐带血间充质干细胞成骨分化能力分析 | 第45-48页 |
2.3.5 成骨分化过程miR-21 对PI3K/AKT/β-catenin信号通路的调控 | 第48-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-53页 |
第三章 基于纳米微囊的microRNA活化基质体内促成骨研究 | 第53-80页 |
3.1 引言 | 第53-55页 |
3.2 实验材料和方法 | 第55-62页 |
3.2.1 主要原料与试剂 | 第55页 |
3.2.2 实验仪器 | 第55-56页 |
3.2.3 microRNA-21 纳米微囊的合成和表征 | 第56-57页 |
3.2.4 microRNA-21 活化基质的制备 | 第57页 |
3.2.5 活化基质中miRNAs纳米微囊稳定性分析 | 第57页 |
3.2.6 活化基质中miRNAs释放行为分析 | 第57-58页 |
3.2.7 细胞培养 | 第58页 |
3.2.8 细胞毒性分析 | 第58页 |
3.2.9 miR-21 细胞内吞 | 第58-59页 |
3.2.10 原位杂交法检测hUMSCs内miR-21 表达水平 | 第59-60页 |
3.2.11 实时荧光定量PCR检测miR-21 表达量 | 第60页 |
3.2.12 实时荧光定量PCR检测成骨标志物表达水平 | 第60页 |
3.2.13 ALP染色 | 第60页 |
3.2.14 茜素红染色 | 第60-61页 |
3.2.15 活化基质体内植入 | 第61页 |
3.2.16 体内植入活化基质后骨再生效果评估 | 第61-62页 |
3.2.17 数据分析 | 第62页 |
3.3 实验结果和讨论 | 第62-78页 |
3.3.1 miR-21 活化基质的制备及稳定性分析 | 第62-67页 |
3.3.2 CMCS/n(miR-21)细胞毒性分析 | 第67-68页 |
3.3.3 CMCS/n(miR-21)细胞转染效率分析 | 第68-71页 |
3.3.4 hUMSCs内miR-21 表达量分析 | 第71-72页 |
3.3.5 基质诱导hUMSCs成骨分化能力分析 | 第72-78页 |
3.4 本章小结 | 第78-80页 |
第四章 microRNA纳米微囊功能化促进钛合金表面骨愈合研究 | 第80-105页 |
4.1 引言 | 第80-81页 |
4.2 实验部分 | 第81-87页 |
4.2.1 主要原料与试剂 | 第81-82页 |
4.2.2 实验仪器 | 第82-83页 |
4.2.3 microRNA-29b纳米微囊的合成和表征 | 第83页 |
4.2.4 细胞培养 | 第83页 |
4.2.5 n(miR-29b)纳米微囊的转染 | 第83页 |
4.2.6 n(miR-29b)纳米微囊诱导hUMSCs成骨分化 | 第83-84页 |
4.2.7 ALP染色 | 第84页 |
4.2.8 茜素红染色 | 第84页 |
4.2.9 实时荧光定量PCR检测 | 第84页 |
4.2.10 Western Blotting分析 | 第84-85页 |
4.2.11 CMCS/n(miR-29b) 涂层的制备 | 第85页 |
4.2.12 CMCS/n(miR-29b) 涂层的细胞毒性分析 | 第85页 |
4.2.13 CMCS/n(miR-29b) 涂层化钛合金的制备和表征 | 第85-86页 |
4.2.14 SEM分析 | 第86页 |
4.2.15 CMCS/n(miR-29b) 涂层化钛合金体外对hUMSCs诱导成骨的影响 | 第86页 |
4.2.16 动物实验 | 第86-87页 |
4.2.17 数据分析 | 第87页 |
4.3 实验结果和讨论 | 第87-104页 |
4.3.1 n(miR-29b)纳米微囊的制备 | 第87-88页 |
4.3.2 n (miR-29b)纳米微囊的细胞内吞效果 | 第88-89页 |
4.3.3 n (miR-29b)纳米微囊诱导hUMSCs成骨分化的能力 | 第89-92页 |
4.3.4 n (miR-29b)纳米微囊对HDAC-4 蛋白表达的抑制作用 | 第92-93页 |
4.3.5 n (miR-29b)在CMCS涂层中的分布 | 第93-94页 |
4.3.6 细胞黏附和形貌 | 第94-96页 |
4.3.7 Ti/n(miR-29b) 体外促进hUMSCs成骨分化研究 | 第96-97页 |
4.3.8 Ti/n(miR-29b) 体内促进骨缺损修复研究 | 第97-104页 |
4.4 本章小结 | 第104-105页 |
第五章 全文总结 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-120页 |
发表论文和科研情况说明 | 第120-122页 |
致谢 | 第122-123页 |