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microRNA纳米微囊功能化促进钛合金表面骨愈合研究

中文摘要第4-5页
abstract第5-6页
缩略语英汉对照表第11-12页
第一章 绪论第12-36页
    1.1 引言第12页
    1.2 骨再生研究现状第12-15页
        1.2.1 骨再生过程第12-14页
        1.2.2 间充质干细胞与骨再生第14-15页
    1.3 临床上促进骨再生的方法第15-20页
        1.3.1 自体骨移植第16页
        1.3.2 异体骨移植第16页
        1.3.3 骨移植替代物第16-20页
    1.4 生物医用钛合金植入物简介第20-22页
    1.5 钛合金骨修复材料表面生物功能化改性方法第22-28页
        1.5.1 钛合金表面拓扑结构改性第22-24页
        1.5.2 钛合金表面生长因子功能化涂层改性第24-26页
        1.5.3 钛合金表面基因功能化改性第26-28页
    1.6 microRNA及其在骨再生中的作用第28-32页
        1.6.1 microRNA简介第28-30页
        1.6.2 microRNA与间充质干细胞成骨分化第30-32页
    1.7 用于骨修复基因投递方法研究进展第32-34页
    1.8 本课题的研究目的与选题意义第34-36页
第二章 microRNA-21 诱导间充质干细胞成骨分化机制研究第36-53页
    2.1 引言第36-37页
    2.2 实验部分第37-41页
        2.2.1 主要原料与试剂第37-38页
        2.2.2 实验仪器第38页
        2.2.3 人脐带血间充质干细胞的提取和表征第38-39页
        2.2.4 细胞转染及成骨诱导第39页
        2.2.5 实时荧光定量PCR检测第39-40页
        2.2.6 Western Blotting第40页
        2.2.7 β-catenin免疫荧光分析第40页
        2.2.8 统计分析方法第40-41页
    2.3 实验结果和讨论第41-51页
        2.3.1 人脐带血间充质干细胞的表征第41-42页
        2.3.2 人脐带血间充质干细胞成骨分化中miR-21 的表达水平第42-43页
        2.3.3 miR-21 转染及表达效果分析第43-45页
        2.3.4 miR-21 诱导人脐带血间充质干细胞成骨分化能力分析第45-48页
        2.3.5 成骨分化过程miR-21 对PI3K/AKT/β-catenin信号通路的调控第48-51页
    2.4 本章小结第51-53页
第三章 基于纳米微囊的microRNA活化基质体内促成骨研究第53-80页
    3.1 引言第53-55页
    3.2 实验材料和方法第55-62页
        3.2.1 主要原料与试剂第55页
        3.2.2 实验仪器第55-56页
        3.2.3 microRNA-21 纳米微囊的合成和表征第56-57页
        3.2.4 microRNA-21 活化基质的制备第57页
        3.2.5 活化基质中miRNAs纳米微囊稳定性分析第57页
        3.2.6 活化基质中miRNAs释放行为分析第57-58页
        3.2.7 细胞培养第58页
        3.2.8 细胞毒性分析第58页
        3.2.9 miR-21 细胞内吞第58-59页
        3.2.10 原位杂交法检测hUMSCs内miR-21 表达水平第59-60页
        3.2.11 实时荧光定量PCR检测miR-21 表达量第60页
        3.2.12 实时荧光定量PCR检测成骨标志物表达水平第60页
        3.2.13 ALP染色第60页
        3.2.14 茜素红染色第60-61页
        3.2.15 活化基质体内植入第61页
        3.2.16 体内植入活化基质后骨再生效果评估第61-62页
        3.2.17 数据分析第62页
    3.3 实验结果和讨论第62-78页
        3.3.1 miR-21 活化基质的制备及稳定性分析第62-67页
        3.3.2 CMCS/n(miR-21)细胞毒性分析第67-68页
        3.3.3 CMCS/n(miR-21)细胞转染效率分析第68-71页
        3.3.4 hUMSCs内miR-21 表达量分析第71-72页
        3.3.5 基质诱导hUMSCs成骨分化能力分析第72-78页
    3.4 本章小结第78-80页
第四章 microRNA纳米微囊功能化促进钛合金表面骨愈合研究第80-105页
    4.1 引言第80-81页
    4.2 实验部分第81-87页
        4.2.1 主要原料与试剂第81-82页
        4.2.2 实验仪器第82-83页
        4.2.3 microRNA-29b纳米微囊的合成和表征第83页
        4.2.4 细胞培养第83页
        4.2.5 n(miR-29b)纳米微囊的转染第83页
        4.2.6 n(miR-29b)纳米微囊诱导hUMSCs成骨分化第83-84页
        4.2.7 ALP染色第84页
        4.2.8 茜素红染色第84页
        4.2.9 实时荧光定量PCR检测第84页
        4.2.10 Western Blotting分析第84-85页
        4.2.11 CMCS/n(miR-29b) 涂层的制备第85页
        4.2.12 CMCS/n(miR-29b) 涂层的细胞毒性分析第85页
        4.2.13 CMCS/n(miR-29b) 涂层化钛合金的制备和表征第85-86页
        4.2.14 SEM分析第86页
        4.2.15 CMCS/n(miR-29b) 涂层化钛合金体外对hUMSCs诱导成骨的影响第86页
        4.2.16 动物实验第86-87页
        4.2.17 数据分析第87页
    4.3 实验结果和讨论第87-104页
        4.3.1 n(miR-29b)纳米微囊的制备第87-88页
        4.3.2 n (miR-29b)纳米微囊的细胞内吞效果第88-89页
        4.3.3 n (miR-29b)纳米微囊诱导hUMSCs成骨分化的能力第89-92页
        4.3.4 n (miR-29b)纳米微囊对HDAC-4 蛋白表达的抑制作用第92-93页
        4.3.5 n (miR-29b)在CMCS涂层中的分布第93-94页
        4.3.6 细胞黏附和形貌第94-96页
        4.3.7 Ti/n(miR-29b) 体外促进hUMSCs成骨分化研究第96-97页
        4.3.8 Ti/n(miR-29b) 体内促进骨缺损修复研究第97-104页
    4.4 本章小结第104-105页
第五章 全文总结第105-106页
参考文献第106-120页
发表论文和科研情况说明第120-122页
致谢第122-123页

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