摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-13页 |
1.1 农杆菌介导的转基因技术简介 | 第9-10页 |
1.1.1. 根癌农杆菌简介 | 第9-10页 |
1.1.2 转基因植物筛选方法 | 第10页 |
1.2 拟南芥转基因简介 | 第10-11页 |
1.2.1 拟南芥(Arabidopsis thaliana) | 第10页 |
1.2.2 拟南芥转基因方法 | 第10-11页 |
1.3 Bt毒素蛋白简介 | 第11页 |
1.4 杆状病毒简介 | 第11页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第11-13页 |
第二章 实验材料与方法 | 第13-26页 |
2.1 实验材料 | 第13-17页 |
2.1.1 植物材料 | 第13页 |
2.1.2 供试虫体 | 第13页 |
2.1.3 供试病毒 | 第13页 |
2.1.4 仪器 | 第13-14页 |
2.1.5 化学试剂 | 第14页 |
2.1.6 工具酶和试剂盒 | 第14-15页 |
2.1.7 菌株和质粒 | 第15页 |
2.1.8 载体 | 第15-16页 |
2.1.9 培养基及主要试剂配制 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-26页 |
2.2.1 重组植物表达载体的构建 | 第17-20页 |
2.2.2 重组载体Cry2Ab-pSR784d转化农杆菌LBA4404 | 第20-21页 |
2.2.3 根癌农杆菌介导的拟南芥花序侵染法 | 第21-22页 |
2.2.4 转基因拟南芥的筛选 | 第22页 |
2.2.5 T_3代转基因植株的PCR检测 | 第22-23页 |
2.2.6 T_3代转基因植株的定量RT-PCR(Quantitative RT-PCR)分析 | 第23-25页 |
2.2.7 Cry2Ab转基因拟南芥株系对棉铃虫致死率和日累积虫重的测定 | 第25页 |
2.2.8 Cry2Ab转基因拟南芥对HearNPV增效作用的试验 | 第25-26页 |
第三章 实验结果分析 | 第26-33页 |
3.1 Cry2Ab基因的克隆与重组植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
3.2 转基因植株的获得 | 第27-28页 |
3.3 T_3代转基因植株的PCR检测 | 第28页 |
3.4 T_3代转基因植株的实时荧光定量RT-PCR分析 | 第28-29页 |
3.5 Cry2Ab转基因拟南芥株系对棉铃虫累积死亡率的测定 | 第29页 |
3.6 棉铃虫幼虫日积累增重的测定 | 第29-30页 |
3.7 Cry2Ab转基因拟南芥对HearNPV的增效作用 | 第30-33页 |
3.7.1 棉铃虫致死时间的测定 | 第30-31页 |
3.7.2 棉铃虫日累积增重的测定 | 第31-33页 |
第四章 结论与讨论 | 第33-35页 |
4.1 结论 | 第33页 |
4.2 讨论 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
作者简介 | 第39页 |