摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6页 |
第1章 前言 | 第9-22页 |
1.1 核苷酸类物质简介 | 第9-10页 |
1.1.1 核苷酸及核苷酸类似物 | 第9页 |
1.1.2 核苷酸合成方法介绍 | 第9-10页 |
1.2 脱氧鸟苷酸(dGMP)研究现状 | 第10-17页 |
1.2.1 dGMP的合成新进展 | 第10-13页 |
1.2.2 涉及dGMP合成过程中的四种酶 | 第13-16页 |
1.2.3 本课题中dGMP的合成途径 | 第16-17页 |
1.3 脱氧肌苷酸(dIMP)的合成 | 第17页 |
1.4 多酶反应体系在本课题的应用 | 第17-19页 |
1.5 大肠杆菌多基因共表达 | 第19-20页 |
1.6 本课题的研究意义及流程 | 第20-22页 |
第2章 利用多酶反应体系合成dGMP | 第22-37页 |
2.1 材料与方法 | 第22-27页 |
2.1.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.2 实验方法 | 第23-27页 |
2.2 结果与讨论 | 第27-35页 |
2.2.1 单基因重组质粒的构建 | 第27-28页 |
2.2.2 四种重组蛋白的SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
2.2.3 四种重组蛋白酶活分析 | 第29-30页 |
2.2.4 多酶合成反应 | 第30-35页 |
2.3 小结 | 第35-37页 |
第3章 应用共表达重组菌合成dGMP | 第37-47页 |
3.1 材料与方法 | 第38-40页 |
3.1.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.2 结果与讨论 | 第40-45页 |
3.2.1 双基因质粒的构建 | 第40-42页 |
3.2.2 串联重组蛋白的SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
3.2.3 串联重组蛋白的酶活分析 | 第43页 |
3.2.4 利用串联重组菌合成dGMP | 第43-45页 |
3.3 小结 | 第45-47页 |
第4章 利用多酶体系合成脱氧肌苷酸 | 第47-52页 |
4.1 材料与方法 | 第47-48页 |
4.1.1 化学试剂与仪器 | 第47页 |
4.1.2 合成方法 | 第47-48页 |
4.2 结果与讨论 | 第48-51页 |
4.2.1 脱氧鸟苷激酶(dGKase)对不同底物的选择性 | 第48-49页 |
4.2.2 研究底物浓度与dIMP产率的关系 | 第49-50页 |
4.2.3 不同磷酸供体对dIMP转化率的影响 | 第50-51页 |
4.2.4 UTP浓度对dIMP转化率的影响 | 第51页 |
4.3 小结 | 第51-52页 |
第5章 结论与展望 | 第52-54页 |
5.1 结论 | 第52页 |
5.2 展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录Ⅰ | 第61页 |