| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-27页 |
| ·高等植物对低温胁迫的响应 | 第8-13页 |
| ·高等植物应对低温胁迫的分子信号机理 | 第9-11页 |
| ·高等植物应对低温胁迫的生理生态机理 | 第11-12页 |
| ·高等植物对于不良环境的适应具有交叉性 | 第12-13页 |
| ·抑制性消减杂交在高山离子芥响应低温相关基因筛选过程中的应用 | 第13-14页 |
| ·海藻糖合成酶类相关基因简述 | 第14-23页 |
| ·海藻糖简述 | 第14-19页 |
| ·海藻糖合成酶类相关基因简述 | 第19-23页 |
| ·研究高山离子芥CbTPS5基因功能的目的和意义 | 第23-24页 |
| ·本课题所采用的主要研究手段 | 第24-27页 |
| ·cDNA末端快速克隆的技术(RACE) | 第24页 |
| ·蛋白质印迹(Western-blot)技术 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量PCR技术(Real-Time PCR) | 第25页 |
| ·Gateway技术 | 第25页 |
| ·荧光融合蛋白的瞬时表达技术 | 第25-26页 |
| ·免疫共沉淀技术(Coimmunoprecipitation) | 第26-27页 |
| 第二章 高山离子芥CbTPS5基因功能初步研究 | 第27-36页 |
| ·高山离子芥愈伤组织及悬浮组织的继代培养 | 第27页 |
| ·高山离子芥CbTPS5基因cDNA全长克隆及分析 | 第27-29页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·CbTPS5基因的3’RACE | 第27-28页 |
| ·CbTPS5靠近5’端中间序列的扩增 | 第28页 |
| ·CbTPS5基因的5’RACE | 第28页 |
| ·CbTPS5基因cDNA全长的获得及CDS区序列验证 | 第28-29页 |
| ·高山离子芥CbTPS5基因cDNA全长的生物信息学分析 | 第29页 |
| ·CbTPS5蛋白特异区域(ΔTPS5)的原核表达及蛋白纯化 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·构建偶联ΔTPS5的原核表达载体pGEX4T-3-ΔTPS5 | 第29-30页 |
| ·原核表达及蛋白纯化 | 第30页 |
| ·目的蛋白ΔTPS5的浓度测定 | 第30页 |
| ·多克隆兔抗的制备及抗体纯化 | 第30-31页 |
| ·多克隆抗血清的获得 | 第30页 |
| ·多克隆兔抗的纯化 | 第30-31页 |
| ·低温、盐胁迫下CbTPS5蛋白翻译水平的研究 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·翻译水平上CbTPS5蛋白响应低温及盐胁迫研究 | 第31-32页 |
| ·低温、盐胁迫下CbTPS5基因转录水平的研究 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·转录水平上CbTPS5基因响应低温及盐胁迫研究 | 第32-33页 |
| ·高山离子芥CbTPS5基因的初步亚细胞定位 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·超表达载体的构建 | 第33页 |
| ·烟草表皮细胞的瞬时转染 | 第33-34页 |
| ·CbTPS5蛋白互作研究 | 第34-36页 |
| ·植物总蛋白的提取和预处理 | 第34页 |
| ·免疫共沉淀 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-52页 |
| ·CbTPS5基因cDNA全长及分析 | 第36-41页 |
| ·CbTPS5基因cDNA全长的获得 | 第36-37页 |
| ·CbTPS5基因核酸序列的分析 | 第37-38页 |
| ·CbTPS5基因氨基酸序列的分析 | 第38-39页 |
| ·CbTPS5基因氨基酸序列的同源性分析 | 第39-41页 |
| ·CbTPS5蛋白特异性区域(ΔTPS5)的原核表达 | 第41-43页 |
| ·多克隆兔抗的制备及抗体纯化 | 第43-44页 |
| ·低温和盐处理下CbTPS5基因分别在翻译和转录水平具备上调性 | 第44-48页 |
| ·低温和盐处理下CbTPS5基因翻译水平的上调性 | 第44页 |
| ·低温和盐处理下CbTPS5基因转录水平的上调性 | 第44-45页 |
| ·低温和盐处理下CbTPS5基因表达趋势的分析 | 第45-48页 |
| ·高山离子芥CbTPS5基因表达初步定位于细胞膜上 | 第48-49页 |
| ·高山离子芥CbTPS5蛋白互作研究 | 第49-50页 |
| ·高山离子芥CbTPS5基因功能研究成果总结及展望 | 第50-52页 |
| ·CbTPS5基因与高山离子芥响应低温和盐胁迫密切相关 | 第50页 |
| ·CbTPS5基因可能与植物组织的死亡或细胞凋亡有关 | 第50-51页 |
| ·CbTPS5基因可能参与植物表皮细胞的形态建成 | 第51页 |
| ·前景规划和展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
