| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 英文缩写词 | 第11-12页 |
| 一 引言 | 第12-16页 |
| ·AtBNU-X与BR和NO的研究进展 | 第12-14页 |
| ·BR在植物生长中的作用 | 第12页 |
| ·NO在植物生长中的作用 | 第12-13页 |
| ·NO与BR关系的研究进展 | 第13页 |
| ·BR/NO对AtBNU-X基因表达的调控作用 | 第13-14页 |
| ·AtBNU-X与植物抗逆性研究进展 | 第14-15页 |
| ·植物的抗逆研究 | 第14-15页 |
| ·非生物胁迫对AtBNU-X基因表达的影响 | 第15页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 二 实验材料与方法 | 第16-30页 |
| ·在各种胁迫处理下RT-PCR检测基因AtBNU-X的表达水平 | 第16-17页 |
| ·植物材料及处理 | 第16页 |
| ·拟南芥总RNA的提取及反转录 | 第16页 |
| ·RT-PCR引物设计及合成 | 第16-17页 |
| ·RT-PCR反应 | 第17页 |
| ·Gateway克隆技术构建植物过表达载体及转化 | 第17-22页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·拟南芥总RNA的提取及反转录 | 第18页 |
| ·PCR扩增目的基因CDS区 | 第18页 |
| ·构建入门克隆 | 第18-20页 |
| ·构建目的克隆 | 第20-21页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第21页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第21页 |
| ·T1代转化植株筛选 | 第21-22页 |
| ·T2代转化植株的表型观察 | 第22页 |
| ·Aritificial miRNA构建植物RNA干扰载体及转化 | 第22-27页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·Aritificial miRNA的扩增原理 | 第22-23页 |
| ·Aritificial miRNA的引物设计 | 第23-24页 |
| ·Overlapping PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·Aritificial miRNA扩增产物连接T载体 | 第25-26页 |
| ·Aritificial miRNA扩增产物连接目的载体pSN1301 | 第26-27页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第27页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第27页 |
| ·T1代转化植株筛选 | 第27页 |
| ·T2代转化植株表型观察 | 第27页 |
| ·AtBNU-X基因Promoter::GUS载体的构建及转化 | 第27-30页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·提取拟南芥基因组DNA | 第28页 |
| ·PCR扩增目的基因启动子区 | 第28-29页 |
| ·构建入门克隆 | 第29页 |
| ·构建目的克隆 | 第29页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第29页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第29页 |
| ·T1代转化植株筛选 | 第29-30页 |
| 三 实验结果与展望 | 第30-47页 |
| ·AtBNU-X基因的生物信息学分析 | 第30-33页 |
| ·AtBNU-X基因结构分析 | 第30页 |
| ·BLAST蛋白质同源性比对分析 | 第30页 |
| ·AtBNU-X蛋白质的序列性质分析 | 第30-33页 |
| ·AtBNU-X蛋白质的亚细胞定位分析 | 第33页 |
| ·各种胁迫处理对AtBNU-X基因表达的影响 | 第33-35页 |
| ·AtBNU-X基因的过表达载体构建及转化 | 第35-38页 |
| ·PCR扩增CDS区的检测 | 第35页 |
| ·入门克隆的检测 | 第35-36页 |
| ·目的克隆的检测 | 第36-37页 |
| ·农杆菌菌液PCR检测 | 第37页 |
| ·T1代转化植株筛选 | 第37-38页 |
| ·T2代转化植株表型观察 | 第38页 |
| ·Artificial miRNA干扰载体构建及转化 | 第38-44页 |
| ·Overlapping PCR扩增的检测 | 第38-39页 |
| ·重组T载体的检测 | 第39-41页 |
| ·重组表达载体pSN1301的检测 | 第41-42页 |
| ·农杆菌菌液PCR检测 | 第42页 |
| ·T1代转化植株筛选 | 第42-44页 |
| ·T2代转化植株表型观察 | 第44页 |
| ·AtBNU-X基因Promoter::GUS载体的构建及转化 | 第44-47页 |
| ·PCR扩增启动子区的检测 | 第44页 |
| ·入门克隆的检测 | 第44-45页 |
| ·目的克隆的检测 | 第45页 |
| ·农杆菌菌液PCR检测 | 第45页 |
| ·T1代转基因植株筛选 | 第45-47页 |
| 四 讨论 | 第47-50页 |
| ·AtBNU-X基因对各种逆境胁迫的响应 | 第47页 |
| ·AtBNU-X基因的组织定位及功能研究 | 第47-48页 |
| ·RNAi对AtBNU-X基因及其相关基因沉默作用的影响 | 第48-50页 |
| 五 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
