| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-29页 |
| 1 水稻条纹病毒（Rice stripe virus, RSV）的研究进展 | 第10-19页 |
| ·水稻条纹叶枯病的发生及危害 | 第10页 |
| ·水稻条纹叶枯病的发病症状 | 第10-11页 |
| ·RSV 的分类地位及病毒粒体形态 | 第11-12页 |
| ·RSV 的寄主范围和传播介体 | 第12页 |
| ·RSV 的基因组结构及其编码蛋白 | 第12-17页 |
| ·RSV 的分子变异与致病性分化 | 第17-18页 |
| ·水稻条纹叶枯病的防治 | 第18-19页 |
| 2 杆状病毒表达系统 | 第19-24页 |
| ·杆状病毒简介 | 第19-22页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统的优越性与不足 | 第22-23页 |
| ·Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统的重要元件 | 第23页 |
| ·重组病毒的构建原理 | 第23-24页 |
| 3 蛋白质的表达及亚细胞定位 | 第24-26页 |
| ·蛋白质的表达 | 第24-25页 |
| ·蛋白质在昆虫细胞中的表达 | 第25页 |
| ·蛋白质的亚细胞定位 | 第25-26页 |
| 4 免疫荧光技术 | 第26-28页 |
| ·免疫荧光技术的原理 | 第26-27页 |
| ·免疫荧光技术的应用 | 第27页 |
| ·常见荧光色素及其特性 | 第27-28页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-42页 |
| 1 供试材料 | 第29-31页 |
| ·供试毒源 | 第29页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第29页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第29-30页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-42页 |
| ·水稻总RNA 的提取 | 第31页 |
| ·cDNA 的合成 | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第33页 |
| ·目的片段与克隆载体pMD18-T 的连接 | 第33页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第33-34页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组表达载体的构建与检测 | 第35-36页 |
| ·重组质粒DNA 的转座和昆虫细胞的转染 | 第36-38页 |
| ·重组蛋白的表达与 Western blotting 印记分析 | 第38-40页 |
| ·免疫荧光实验 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-52页 |
| 1 RSV NS2、NSvc2-N、CP、SP 和 NSvc4 基因的 PCR 扩增 | 第42页 |
| 2 RSV NS2、NSvc2-N、CP、SP 和 NSvc4 基因的克隆 | 第42-43页 |
| 3 杆状病毒转移载体的构建 | 第43-46页 |
| 4 重组 Bacmid DNA 的提取与鉴定 | 第46-47页 |
| 5 重组蛋白的表达与 Western blotting 检测 | 第47-48页 |
| 6 免疫荧光实验观察 RSV 编码蛋白在昆虫细胞 Sf9 中的亚细胞定位 | 第48-52页 |
| 第四章 问题与讨论 | 第52-56页 |
| 1 Bac-to-Bac 表达系统的选择 | 第52-53页 |
| 2 影响蛋白表达和细胞转染效率的因素 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录 1 缩写词与中英文对照 | 第65-67页 |
| 附录 2 所用主要试剂及缓冲液的配制方法 | 第67-69页 |
| 附录 3 载体图谱 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
