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银耳菌袋中主要污染菌的分离鉴定及微生物的T-RFLP分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 论文综述第12-28页
 1 银耳的介绍第12-13页
   ·银耳的生物学特性第12-13页
   ·银耳的生活史第13页
   ·银耳的营养价值第13页
 2 银耳病原菌的种类及分类地位第13-16页
   ·木霉第14-15页
   ·链孢霉第15-16页
   ·杨梅霜菌第16页
 3 食用菌病原菌的研究方法第16-27页
   ·菌种鉴定技术的种类和应用研究进展第17-23页
     ·RFLP 标记第17-18页
     ·RAPD 标记第18-20页
     ·AFLP 标记第20页
     ·微卫星间隔(ISSR)第20-21页
     ·SCAR 标记第21-22页
     ·ITS 技术第22-23页
   ·T-RFLP 技术第23-27页
     ·T-RFLP 技术的基本原理与方法第23-25页
     ·T-RFLP 在微生物多样性研究中的应用第25-26页
     ·T-RFLP 分析微生物群落的局限性及其解决方法第26-27页
 4 本研究的目的和意义第27-28页
第二章 银耳相关微生物多样性的T-RFLP 分析第28-41页
 1 供试材料第28页
 2 试剂与仪器第28-29页
   ·主要试剂第28页
   ·仪器第28-29页
 3 试验方法第29-33页
   ·银耳栽培料中微生物总DNA 的提取第29-30页
   ·总DNA 的纯化第30页
   ·PCR 扩增第30-31页
     ·所用引物第30-31页
     ·PCR 反应体系第31页
     ·PCR 反应程序第31页
   ·电泳检测第31页
   ·PCR 产物的纯化第31页
   ·扩增产物的酶切第31-32页
     ·MspI 反应体系第32页
     ·HaeⅢ反应体系第32页
   ·T-RFLP 酶切条带的检测及比对分析第32页
   ·样品间相似度计算第32-33页
 4 结果与分析第33-36页
   ·银耳栽培料中微生物总DNA 的获得第33页
   ·细菌16S rDNA 扩增产物的获得第33页
   ·真菌ITS 扩增产物的获得第33-34页
   ·扩增PCR 产物的酶切第34-36页
     ·细菌的酶切第34-35页
     ·真菌的酶切第35-36页
 5 酶切产物的检测第36-38页
   ·细菌T-RFs 检测图谱第36-37页
   ·真菌T-RFs 检测图谱第37-38页
 6 银耳中微生物T-RFs 比对结果第38-41页
   ·细菌T-RFs 比对结果第38-40页
   ·真菌T-RFs 分析结果第40-41页
第三章 T-RFLP 讨论第41-45页
 1 关于银耳栽培相关微生物遗传多样性的分析第41-42页
   ·关于细菌的指纹图谱第41页
   ·关于真菌的指纹图谱第41-42页
 2 关于T-RFLP 技术及其优化第42-44页
   ·关于银耳栽培料中微生物总DNA 的提取第42-43页
   ·PCR-T-RFLP 技术体系的建立及改进第43-44页
 3 小结第44-45页
第四章 生物学特性测定第45-57页
 1 材料与方法第45-47页
   ·供试菌株第45页
   ·培养基第45-46页
   ·试验方法第46-47页
     ·菌落形态观察第46页
     ·分生孢子形态和孢子梗的观察第46页
     ·温度对菌丝生长速度的影响第46页
     ·pH 对菌丝生长速度的影响第46-47页
 2 结果与分析第47-54页
   ·菌落特征、分生孢子形状、颜色及孢子梗形态观察第47-48页
   ·温度对菌丝生长的影响第48-52页
   ·pH 对菌丝生长的影响第52-54页
 3 小结第54-57页
第五章 利用ITS 测序分类鉴定技术对供试菌株进行遗传分析第57-64页
 1 材料与方法第57-58页
   ·供试菌株第57页
   ·培养基第57页
   ·试剂第57页
   ·主要仪器第57-58页
 2 实验方法第58-61页
   ·基因组DNA 的提取第58-59页
     ·菌丝体的培养第58页
     ·基因组DNA 的提取第58-59页
   ·ITS 序列分析第59-61页
     ·ITS 引物第59页
     ·ITS 反应体系及条件第59页
     ·ITS 克隆测序第59-61页
 3 结果与分析第61-63页
   ·DNA 的提取第61页
   ·ITS 结果分析第61-63页
     ·ITS 测序分析分类鉴定结果第61-62页
     ·ITS 序列比对结果第62-63页
 4 讨论第63-64页
参考文献第64-71页
致谢第71页

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