摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
文献综述 | 第10-20页 |
第一章 猪流行性腹泻研究进展 | 第10-20页 |
1.1 PEDV的分子和遗传特征 | 第10-12页 |
1.1.1 1ab | 第11页 |
1.1.2 ORF3蛋白 | 第11页 |
1.1.3 S蛋白 | 第11页 |
1.1.4 M蛋白 | 第11页 |
1.1.5 E蛋白 | 第11-12页 |
1.1.6 N蛋白 | 第12页 |
1.2 PEDV的细胞培养特性与分离 | 第12页 |
1.3 流行病学 | 第12-13页 |
1.3.1 易感动物 | 第13页 |
1.3.2 传染源 | 第13页 |
1.3.3 传播途径 | 第13页 |
1.3.4 流行特点 | 第13页 |
1.4 致病机理 | 第13页 |
1.5 PEDV诊断 | 第13-17页 |
1.5.1 病原学试验 | 第13-15页 |
1.5.2 聚合酶链反应(PCR) | 第15-16页 |
1.5.3 血清学方法检测PEDV特异性抗体 | 第16-17页 |
1.6 PEDV疫苗研究 | 第17-20页 |
1.6.1 灭活疫苗 | 第17-18页 |
1.6.2 弱毒疫苗 | 第18页 |
1.6.3 核酸疫苗 | 第18页 |
1.6.4 亚单位疫苗 | 第18页 |
1.6.5 转基因植物疫苗 | 第18-19页 |
1.6.6 乳酸菌载体疫苗 | 第19页 |
1.6.7 展望 | 第19-20页 |
试验研究 | 第20-35页 |
第二章 基于S1蛋白核心中和表位区的猪流行性腹泻亚单位疫苗研究 | 第20-35页 |
2.1 材料 | 第20-23页 |
2.1.1 质粒、菌株和毒株 | 第20页 |
2.1.2 主要药品及试剂 | 第20页 |
2.1.3 溶液配制 | 第20-22页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.5 实验动物 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 毕赤酵母重组表达载体的构建及鉴定 | 第23-25页 |
2.2.2 重组表达载体转化毕赤酵母GS115感受态 | 第25-26页 |
2.2.3 重组酵母菌株的鉴定与筛选 | 第26页 |
2.2.4 阳性重组酵母诱导表达 | 第26页 |
2.2.5 诱导表达上清SDS-PAGE检测 | 第26页 |
2.2.6 Western-blotting检测 | 第26-27页 |
2.2.7 目的蛋白质的纯化 | 第27页 |
2.2.8 纯化重组蛋白的动物免疫 | 第27-28页 |
2.2.9 血清IgG抗体ELISA检测 | 第28页 |
2.2.10 血清中和试验 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
2.3.1 目的基因克隆与测序 | 第29-30页 |
2.3.2 毕赤酵母表达载体pPICZaA酶切线性化 | 第30-31页 |
2.3.3 重组表达载体的鉴定 | 第31页 |
2.3.4 重组蛋白的Western-blotting鉴定 | 第31-32页 |
2.3.5 重组蛋白纯化 | 第32页 |
2.3.6 动物免疫ELASA分析 | 第32-33页 |
2.3.7 动物免疫中和抗体分析 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-43页 |
缩略词 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者简介 | 第45页 |