符号说明 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
1 前言 | 第16-33页 |
·果蝇眼睛的发育 | 第16页 |
·果蝇翅的发育 | 第16-18页 |
·Endocycle | 第18-19页 |
·Cyclin E研究进展 | 第19-23页 |
·关于cyclin E的调控概述 | 第19页 |
·Wg信号对cyclin E的调控 | 第19页 |
·Abd-A对cyclin E的调控 | 第19-20页 |
·Hh信号和cyclin E的调控 | 第20页 |
·Hippo信号对cyclin E的调控 | 第20页 |
·在中心体中Cyclin E可以通过不依赖CDK2的方式控制细胞进入S期 | 第20-21页 |
·Prospero在胶质细胞对cyclin E的调控 | 第21页 |
·Cyclin E对E2f的作用 | 第21页 |
·Cyclin E对dacapo的作用 | 第21-22页 |
·Cyclin E对Double-parked的作用 | 第22页 |
·Ago和Minus对Cyclin E的作用 | 第22-23页 |
·hedgehog在果蝇翅膀发育过程中的功能 | 第23-25页 |
·Hox基因Ubx | 第25页 |
·Apt的结构及功能 | 第25-31页 |
·Apt的结构 | 第26页 |
·apt的功能 | 第26-31页 |
·apt在果蝇头部发育过程中的功能 | 第26-27页 |
·apt在果蝇气管发育过程中的功能 | 第27-28页 |
·apt在果蝇心脏发育过程中的功能 | 第28-29页 |
·apt在果蝇神经系统形成过程中的功能 | 第29页 |
·apt限制卵室细胞迁移 | 第29-30页 |
·apt在响应乙醇刺激过程中的功能 | 第30-31页 |
·apt的其它功能 | 第31页 |
·本研究的目的及其意义 | 第31-33页 |
2 材料与方法 | 第33-45页 |
·材料 | 第33-35页 |
·果蝇及生长条件 | 第33页 |
·菌株和质粒 | 第33页 |
·酶及各种生化试剂、抗体 | 第33-34页 |
·试验中所用的引物和寡核苷酸 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-45页 |
·突变体体细胞克隆的诱导 | 第35页 |
·果蝇重组 | 第35页 |
·热激处理产生突变体体细胞克隆 | 第35页 |
·大肠杆菌的转化 | 第35-36页 |
·质粒提取(试剂盒法) | 第36页 |
·琼脂糖凝胶DNA回收(试剂盒) | 第36-37页 |
·PCR产物纯化(试剂盒) | 第37页 |
·利用CRISPR技术进行结合位点突变 | 第37-39页 |
·gRNA果蝇注射 | 第37-38页 |
·果蝇杂交 | 第38-39页 |
·粗提果蝇基因组DNA | 第39页 |
·序列分析 | 第39页 |
·免疫组化(本实验中常规抗体染色均参照以下步骤进行) | 第39-40页 |
·Caspase-3 染色 | 第40页 |
·Western Blot | 第40-42页 |
·组织样品制备 | 第40-41页 |
·分离胶制备 | 第41页 |
·浓缩胶制备 | 第41页 |
·上样 | 第41页 |
·电泳 | 第41页 |
·转膜 | 第41页 |
·封闭 | 第41-42页 |
·一抗 | 第42页 |
·洗脱 | 第42页 |
·二抗 | 第42页 |
·洗脱 | 第42页 |
·检测 | 第42页 |
·RNA的提取(试剂盒法) | 第42-43页 |
·反转录合成第一链cDNA | 第43页 |
·RT-qPCR体系及反应条件 | 第43-44页 |
·UAS/GAL系统超表达和RNA干涉基因 | 第44页 |
·扫描电子显微镜观察 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-64页 |
·Apt在果蝇眼睛发育过程中通过诱导Cyclin E的表达控制细胞进入S期 | 第45-51页 |
·Apt是进化保守的DNA结合蛋白 | 第45页 |
·Apt在果蝇眼原基的表达分析 | 第45-46页 |
·Apt对果蝇眼睛发育的作用 | 第46-47页 |
·Apt下游靶基因的鉴定 | 第47-48页 |
·Apt在MF对Cyclin E的作用 | 第48-49页 |
·Apt对Cyclin E的调控方式分析 | 第49-51页 |
·Apt在果蝇翅膀发育过程中通过协调hedgehog和cyclin E的表达调控细胞增殖和生长 | 第51-59页 |
·Apt在果蝇翅原基的表达及功能分析 | 第51-52页 |
·Apt在PE对hh的作用分析 | 第52-53页 |
·Apt在果蝇翅原基对hh的作用方式分析 | 第53-55页 |
·Apt在PE对cyclin E的作用 | 第55-56页 |
·Apt在翅原基对cyclin E的作用方式分析 | 第56-57页 |
·Apt通过诱导hh和cyclin E的表达来控制细胞增殖 | 第57-59页 |
·Apt和Ubx控制果蝇唾液腺的endocycle | 第59-64页 |
·Apt在唾液腺的表达和作用 | 第59页 |
·Apt在唾液腺发育过程中对cyclin E的作用分析 | 第59-61页 |
·Ubx和Apt对细胞endocycle的作用方式分析 | 第61-62页 |
·Apt,Ubx和E2f1协同唾液腺endocycle | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-67页 |
·Apt的功能 | 第64页 |
·Cyclin E的调控 | 第64-65页 |
·Hh的表达 | 第65-66页 |
·Hh的调控 | 第66页 |
·Endocycle中Apt,Ubx和Cyclin E之间的关系 | 第66-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第85页 |