| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第16-33页 |
| ·果蝇眼睛的发育 | 第16页 |
| ·果蝇翅的发育 | 第16-18页 |
| ·Endocycle | 第18-19页 |
| ·Cyclin E研究进展 | 第19-23页 |
| ·关于cyclin E的调控概述 | 第19页 |
| ·Wg信号对cyclin E的调控 | 第19页 |
| ·Abd-A对cyclin E的调控 | 第19-20页 |
| ·Hh信号和cyclin E的调控 | 第20页 |
| ·Hippo信号对cyclin E的调控 | 第20页 |
| ·在中心体中Cyclin E可以通过不依赖CDK2的方式控制细胞进入S期 | 第20-21页 |
| ·Prospero在胶质细胞对cyclin E的调控 | 第21页 |
| ·Cyclin E对E2f的作用 | 第21页 |
| ·Cyclin E对dacapo的作用 | 第21-22页 |
| ·Cyclin E对Double-parked的作用 | 第22页 |
| ·Ago和Minus对Cyclin E的作用 | 第22-23页 |
| ·hedgehog在果蝇翅膀发育过程中的功能 | 第23-25页 |
| ·Hox基因Ubx | 第25页 |
| ·Apt的结构及功能 | 第25-31页 |
| ·Apt的结构 | 第26页 |
| ·apt的功能 | 第26-31页 |
| ·apt在果蝇头部发育过程中的功能 | 第26-27页 |
| ·apt在果蝇气管发育过程中的功能 | 第27-28页 |
| ·apt在果蝇心脏发育过程中的功能 | 第28-29页 |
| ·apt在果蝇神经系统形成过程中的功能 | 第29页 |
| ·apt限制卵室细胞迁移 | 第29-30页 |
| ·apt在响应乙醇刺激过程中的功能 | 第30-31页 |
| ·apt的其它功能 | 第31页 |
| ·本研究的目的及其意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-45页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·果蝇及生长条件 | 第33页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·酶及各种生化试剂、抗体 | 第33-34页 |
| ·试验中所用的引物和寡核苷酸 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-45页 |
| ·突变体体细胞克隆的诱导 | 第35页 |
| ·果蝇重组 | 第35页 |
| ·热激处理产生突变体体细胞克隆 | 第35页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第35-36页 |
| ·质粒提取(试剂盒法) | 第36页 |
| ·琼脂糖凝胶DNA回收(试剂盒) | 第36-37页 |
| ·PCR产物纯化(试剂盒) | 第37页 |
| ·利用CRISPR技术进行结合位点突变 | 第37-39页 |
| ·gRNA果蝇注射 | 第37-38页 |
| ·果蝇杂交 | 第38-39页 |
| ·粗提果蝇基因组DNA | 第39页 |
| ·序列分析 | 第39页 |
| ·免疫组化(本实验中常规抗体染色均参照以下步骤进行) | 第39-40页 |
| ·Caspase-3 染色 | 第40页 |
| ·Western Blot | 第40-42页 |
| ·组织样品制备 | 第40-41页 |
| ·分离胶制备 | 第41页 |
| ·浓缩胶制备 | 第41页 |
| ·上样 | 第41页 |
| ·电泳 | 第41页 |
| ·转膜 | 第41页 |
| ·封闭 | 第41-42页 |
| ·一抗 | 第42页 |
| ·洗脱 | 第42页 |
| ·二抗 | 第42页 |
| ·洗脱 | 第42页 |
| ·检测 | 第42页 |
| ·RNA的提取(试剂盒法) | 第42-43页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第43页 |
| ·RT-qPCR体系及反应条件 | 第43-44页 |
| ·UAS/GAL系统超表达和RNA干涉基因 | 第44页 |
| ·扫描电子显微镜观察 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-64页 |
| ·Apt在果蝇眼睛发育过程中通过诱导Cyclin E的表达控制细胞进入S期 | 第45-51页 |
| ·Apt是进化保守的DNA结合蛋白 | 第45页 |
| ·Apt在果蝇眼原基的表达分析 | 第45-46页 |
| ·Apt对果蝇眼睛发育的作用 | 第46-47页 |
| ·Apt下游靶基因的鉴定 | 第47-48页 |
| ·Apt在MF对Cyclin E的作用 | 第48-49页 |
| ·Apt对Cyclin E的调控方式分析 | 第49-51页 |
| ·Apt在果蝇翅膀发育过程中通过协调hedgehog和cyclin E的表达调控细胞增殖和生长 | 第51-59页 |
| ·Apt在果蝇翅原基的表达及功能分析 | 第51-52页 |
| ·Apt在PE对hh的作用分析 | 第52-53页 |
| ·Apt在果蝇翅原基对hh的作用方式分析 | 第53-55页 |
| ·Apt在PE对cyclin E的作用 | 第55-56页 |
| ·Apt在翅原基对cyclin E的作用方式分析 | 第56-57页 |
| ·Apt通过诱导hh和cyclin E的表达来控制细胞增殖 | 第57-59页 |
| ·Apt和Ubx控制果蝇唾液腺的endocycle | 第59-64页 |
| ·Apt在唾液腺的表达和作用 | 第59页 |
| ·Apt在唾液腺发育过程中对cyclin E的作用分析 | 第59-61页 |
| ·Ubx和Apt对细胞endocycle的作用方式分析 | 第61-62页 |
| ·Apt,Ubx和E2f1协同唾液腺endocycle | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| ·Apt的功能 | 第64页 |
| ·Cyclin E的调控 | 第64-65页 |
| ·Hh的表达 | 第65-66页 |
| ·Hh的调控 | 第66页 |
| ·Endocycle中Apt,Ubx和Cyclin E之间的关系 | 第66-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第85页 |