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Apontic在果蝇器官发育过程中的功能分析

符号说明第1-11页
中文摘要第11-13页
英文摘要第13-16页
1 前言第16-33页
   ·果蝇眼睛的发育第16页
   ·果蝇翅的发育第16-18页
   ·Endocycle第18-19页
   ·Cyclin E研究进展第19-23页
     ·关于cyclin E的调控概述第19页
     ·Wg信号对cyclin E的调控第19页
     ·Abd-A对cyclin E的调控第19-20页
     ·Hh信号和cyclin E的调控第20页
     ·Hippo信号对cyclin E的调控第20页
     ·在中心体中Cyclin E可以通过不依赖CDK2的方式控制细胞进入S期第20-21页
     ·Prospero在胶质细胞对cyclin E的调控第21页
     ·Cyclin E对E2f的作用第21页
     ·Cyclin E对dacapo的作用第21-22页
     ·Cyclin E对Double-parked的作用第22页
     ·Ago和Minus对Cyclin E的作用第22-23页
   ·hedgehog在果蝇翅膀发育过程中的功能第23-25页
   ·Hox基因Ubx第25页
   ·Apt的结构及功能第25-31页
     ·Apt的结构第26页
     ·apt的功能第26-31页
       ·apt在果蝇头部发育过程中的功能第26-27页
       ·apt在果蝇气管发育过程中的功能第27-28页
       ·apt在果蝇心脏发育过程中的功能第28-29页
       ·apt在果蝇神经系统形成过程中的功能第29页
       ·apt限制卵室细胞迁移第29-30页
       ·apt在响应乙醇刺激过程中的功能第30-31页
       ·apt的其它功能第31页
   ·本研究的目的及其意义第31-33页
2 材料与方法第33-45页
   ·材料第33-35页
     ·果蝇及生长条件第33页
     ·菌株和质粒第33页
     ·酶及各种生化试剂、抗体第33-34页
     ·试验中所用的引物和寡核苷酸第34-35页
   ·方法第35-45页
     ·突变体体细胞克隆的诱导第35页
       ·果蝇重组第35页
       ·热激处理产生突变体体细胞克隆第35页
     ·大肠杆菌的转化第35-36页
     ·质粒提取(试剂盒法)第36页
     ·琼脂糖凝胶DNA回收(试剂盒)第36-37页
     ·PCR产物纯化(试剂盒)第37页
     ·利用CRISPR技术进行结合位点突变第37-39页
       ·gRNA果蝇注射第37-38页
       ·果蝇杂交第38-39页
       ·粗提果蝇基因组DNA第39页
       ·序列分析第39页
     ·免疫组化(本实验中常规抗体染色均参照以下步骤进行)第39-40页
     ·Caspase-3 染色第40页
     ·Western Blot第40-42页
       ·组织样品制备第40-41页
       ·分离胶制备第41页
       ·浓缩胶制备第41页
       ·上样第41页
       ·电泳第41页
       ·转膜第41页
       ·封闭第41-42页
       ·一抗第42页
       ·洗脱第42页
       ·二抗第42页
       ·洗脱第42页
       ·检测第42页
     ·RNA的提取(试剂盒法)第42-43页
     ·反转录合成第一链cDNA第43页
     ·RT-qPCR体系及反应条件第43-44页
     ·UAS/GAL系统超表达和RNA干涉基因第44页
     ·扫描电子显微镜观察第44-45页
3 结果与分析第45-64页
   ·Apt在果蝇眼睛发育过程中通过诱导Cyclin E的表达控制细胞进入S期第45-51页
     ·Apt是进化保守的DNA结合蛋白第45页
     ·Apt在果蝇眼原基的表达分析第45-46页
     ·Apt对果蝇眼睛发育的作用第46-47页
     ·Apt下游靶基因的鉴定第47-48页
     ·Apt在MF对Cyclin E的作用第48-49页
     ·Apt对Cyclin E的调控方式分析第49-51页
   ·Apt在果蝇翅膀发育过程中通过协调hedgehog和cyclin E的表达调控细胞增殖和生长第51-59页
     ·Apt在果蝇翅原基的表达及功能分析第51-52页
     ·Apt在PE对hh的作用分析第52-53页
     ·Apt在果蝇翅原基对hh的作用方式分析第53-55页
     ·Apt在PE对cyclin E的作用第55-56页
     ·Apt在翅原基对cyclin E的作用方式分析第56-57页
     ·Apt通过诱导hh和cyclin E的表达来控制细胞增殖第57-59页
   ·Apt和Ubx控制果蝇唾液腺的endocycle第59-64页
     ·Apt在唾液腺的表达和作用第59页
     ·Apt在唾液腺发育过程中对cyclin E的作用分析第59-61页
     ·Ubx和Apt对细胞endocycle的作用方式分析第61-62页
     ·Apt,Ubx和E2f1协同唾液腺endocycle第62-64页
4 讨论第64-67页
   ·Apt的功能第64页
   ·Cyclin E的调控第64-65页
   ·Hh的表达第65-66页
   ·Hh的调控第66页
   ·Endocycle中Apt,Ubx和Cyclin E之间的关系第66-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-84页
致谢第84-85页
攻读学位期间发表论文情况第85页

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