中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
1 前言 | 第16-51页 |
·泛素/26S蛋白酶体降解途径 | 第16-20页 |
·泛素化反应机制 | 第16-17页 |
·泛素连接酶E3的分类及特征 | 第17-20页 |
·HECT型泛素连接酶 | 第18页 |
·RING finger/U-box型泛素连接酶 | 第18-19页 |
·SCF复合体 | 第19页 |
·APC复合体 | 第19-20页 |
·CUL3-BTB复合体 | 第20页 |
·植物中的F-box蛋白 | 第20-27页 |
·F-box蛋白的结构 | 第20-21页 |
·植物F-box蛋白及复合体的功能 | 第21-27页 |
·F-box蛋白参与乙烯的信号传导途径 | 第21-22页 |
·F-box蛋白参与赤霉素的信号传导途径 | 第22-23页 |
·F-box蛋白参与生长素的信号传导途径 | 第23-24页 |
·F-box蛋白参与茉莉酸的信号传导途径 | 第24-25页 |
·F-box蛋白与花的发育 | 第25页 |
·F-box蛋白与植物的自交不亲和现象 | 第25-26页 |
·F-box蛋白与光形态建成 | 第26页 |
·F-box蛋白与生物钟节律 | 第26-27页 |
·F-box蛋白与环境胁迫 | 第27页 |
·盐胁迫 | 第27-43页 |
·高盐胁迫对植物的影响 | 第27-33页 |
·高盐抑制种子萌发及幼苗生长 | 第28-29页 |
·高盐降低植物水势 | 第29页 |
·高盐增强对植物的渗透胁迫和离子胁迫 | 第29-30页 |
·高盐破坏植物叶片解剖学结构 | 第30页 |
·高盐抑制植物光合作用和呼吸作用 | 第30-31页 |
·高盐破坏植物蛋白质和脂类的合成 | 第31-32页 |
·高盐对植物抗氧化酶及抗氧化剂的影响 | 第32-33页 |
·植物对高盐胁迫的适应性响应 | 第33-43页 |
·植物耐盐的差异性 | 第33-34页 |
·植物避盐机理 | 第34-35页 |
·植物耐盐机理 | 第35-39页 |
·盐胁迫的信号转导途径 | 第39-43页 |
·LEA蛋白家族 | 第43-50页 |
·LEA蛋白的结构与分类 | 第44-45页 |
·LEA蛋白的功能 | 第45-47页 |
·拟南芥的LEA蛋白及其表达特性 | 第47-50页 |
·本课题的目的和意义 | 第50-51页 |
2 材料与方法 | 第51-67页 |
·材料 | 第51-53页 |
·植物材料 | 第51页 |
·载体与菌株 | 第51页 |
·其它材料 | 第51页 |
·实验引物 | 第51-53页 |
·实验方法 | 第53-67页 |
·CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第53-54页 |
·植物基因组的纯化 | 第54页 |
·RNA的提取 | 第54-55页 |
·利用TRIZOL法提取RNA | 第54页 |
·RNA中基因组DNA的去除 | 第54-55页 |
·RNA反转录 | 第55页 |
·DNA片段的扩增与载体的构建 | 第55-57页 |
·DNA片段的扩增 | 第55-56页 |
·平末端片段加A反应 | 第56页 |
·连接反应 | 第56页 |
·酶切反应 | 第56-57页 |
·小量碱法提取大肠杆菌中的质粒 | 第57页 |
·大肠杆菌DH5α 感受态的制备及转化 | 第57-58页 |
·大肠杆菌DH5α 感受态的制备 | 第57-58页 |
·大肠杆菌细胞的转化 | 第58页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第58页 |
·根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第58页 |
·农杆菌的转化 | 第58页 |
·转基因拟南芥的GUS表达分析 | 第58-60页 |
·GUS组织化学染色分析 | 第58-59页 |
·GUS活性测定 | 第59-60页 |
·免疫印迹 | 第60-65页 |
·植物蛋白的提取 | 第60页 |
·蛋白质浓度检测 | 第60-61页 |
·试剂配制 | 第61-63页 |
·蛋白质凝胶电泳 | 第63页 |
·半干法蛋白转移 | 第63-64页 |
·免疫反应及化学发光法检测蛋白含量 | 第64-65页 |
·原生质体转化 | 第65页 |
·酶解液的配制 | 第65页 |
·原生质体的制备 | 第65页 |
·醋酸锂法制备并转化酵母感受态细胞 | 第65-67页 |
·LiAc法制备酵母感受态细胞 | 第65-66页 |
·小量法酵母转化 | 第66-67页 |
3 结果与分析 | 第67-90页 |
·AtPP2-B11表达量受盐胁迫诱导 | 第67-68页 |
·AtPP2-B11参与盐胁迫响应 | 第68-72页 |
·AtPP2-B11超表达株系和RNAi株系的获得 | 第68-69页 |
·AtPP2-B11参与幼苗时期的盐胁迫响应 | 第69-70页 |
·AtPP2-B11参与成苗时期的盐胁迫响应 | 第70-72页 |
·超表达AtPP2-B11植株盐胁迫下蛋白表达谱分析 | 第72-76页 |
·iTRAQ数据的分析 | 第72-74页 |
·AtPP2-B11盐胁迫下诱导AnnAt1的表达 | 第74-75页 |
·AtPP2-B11盐胁迫下诱导ABF2、ABF3和ABF4的表达 | 第75-76页 |
·AtPP2-B11降低了盐胁迫下ROS的积累 | 第76-77页 |
·盐胁迫下ROS含量的检测 | 第76页 |
·GSH和DTT对盐胁迫表型的恢复作用 | 第76-77页 |
·AtPP2-B11影响Na~+稳态 | 第77-79页 |
·AtPP2-B11与ASK互作形成SCF复合体 | 第79-80页 |
·AtPP2-B11与AtLEA14的相互作用 | 第80-82页 |
·酵母双杂交筛选AtPP2-B11的互作蛋白 | 第80-81页 |
·AtPP2-B11与AtLEA14共定位 | 第81-82页 |
·At LEA14影响了盐胁迫下At PP2-B11蛋白水平的稳定 | 第82-84页 |
·AtPP2-B11对AtLEA14的调控作用 | 第82-83页 |
·At LEA14对At PP2-B11的保护作用 | 第83-84页 |
·AtLEA14的表达模式 | 第84-86页 |
·AtLEA14的组织及盐诱导表达模式 | 第84-85页 |
·AtLEA14的启动子活性分析 | 第85-86页 |
·AtLEA14调节拟南芥盐胁迫耐受性 | 第86-88页 |
·超表达AtLEA14增强了转基因拟南芥盐胁迫抗性 | 第86-88页 |
·盐胁迫响应基因在WT和AtLEA14超表达株系中的表达 | 第88页 |
·AtLEA14基因在酵母中的功能验证 | 第88-90页 |
4 讨论 | 第90-94页 |
5 结论 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第114页 |