| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·类胡萝卜素理化特性 | 第12-14页 |
| ·类胡萝卜素结构特性 | 第12页 |
| ·类胡萝卜素多烯链中独特的电子云分布 | 第12-13页 |
| ·多样的类胡萝卜素氧化裂解反应 | 第13-14页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成 | 第14-18页 |
| ·萜类化合物的生物合成 | 第14页 |
| ·植物细胞质体中的非甲羟戊酸途径 | 第14-15页 |
| ·高等植物类胡萝卜素的生物合成 | 第15-17页 |
| ·含氧类胡萝卜素衍生物的生物合成 | 第17-18页 |
| ·类胡萝卜素生物合成途径的调节控制及其基因工程研究 | 第18-21页 |
| ·类胡萝卜素生物合成途径的调节控制 | 第18-19页 |
| ·类胡萝卜素代谢途径的基因工程研究 | 第19-21页 |
| ·植物类胡萝卜素生物学功能 | 第21-22页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶的生物学功能 | 第22-23页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶在抵抗干旱逆境中的作用 | 第22-23页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶在抵抗强光照射中的作用 | 第23页 |
| ·枸杞 β-胡萝卜素羟化酶基因启动子的研究 | 第23-24页 |
| ·植物的遗传转化方法研究 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的意义、研究内容与技术路线 | 第25-28页 |
| ·本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| ·研究内容 | 第26页 |
| ·技术路线 | 第26-28页 |
| 第二章 枸杞chyb基因的克隆及生物信息学分析 | 第28-44页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·质粒及菌株 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·本研究所用的培养基 | 第29页 |
| ·本研究所用的主要试剂及贮液 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·引物设计与DNA序列测序 | 第30-31页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| ·热击法转化大肠杆菌 | 第31页 |
| ·质粒的小量提取 | 第31-32页 |
| ·质粒大量提取 | 第32页 |
| ·核酸琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·DNA切胶回收与产物纯化 | 第33页 |
| ·枸杞叶片总RNA提取 | 第33页 |
| ·3'-RACE克隆chyb基因 | 第33-34页 |
| ·chyb基因克隆载体构建 | 第34-35页 |
| ·连接产物的验证 | 第35-36页 |
| ·生物信息学分析 | 第36页 |
| ·枸杞chyb基因转录水平分析 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·枸杞叶片总RNA的提取 | 第37页 |
| ·chyb基因的克隆与分析 | 第37-39页 |
| ·枸杞CHYB特性 | 第39-40页 |
| ·枸杞CHYB结构分析 | 第40-41页 |
| ·枸杞CHYB蛋白进化分析 | 第41-42页 |
| ·枸杞chyb基因组织特异型表达分析 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第三章 枸杞chyb基因在大肠杆菌中的表达 | 第44-54页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·载体和菌株 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·本研究所用主要试剂及贮液 | 第45页 |
| ·本研究所用的培养基 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·大肠杆菌表达载体pET-28a-chyb的构建 | 第45-47页 |
| ·pET-28a-chyb与互补质粒pACCAR16ΔcrtX的共转化 | 第47页 |
| ·诱导表达 | 第47页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测 | 第48-49页 |
| ·类胡萝卜素的提取 | 第49页 |
| ·类胡萝卜素的高压液相色谱（HPLC）检测 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·大肠杆菌表达载体pET-28a-chyb的构建 | 第49-50页 |
| ·枸杞chyb基因在大肠杆菌中的表达 | 第50-51页 |
| ·枸杞chyb基因在大肠杆菌中的功能互补分析 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 异源表达枸杞chyb基因提高烟草抵抗非生物逆境的研究 | 第54-76页 |
| ·实验材料 | 第54-57页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·质粒和菌株 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·实验所用培养基 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-66页 |
| ·大肠杆菌表达载体pCAMBIA2300-chyb构建 | 第57-59页 |
| ·烟草叶盘转化方法 | 第59-60页 |
| ·转基因烟草分子检测 | 第60-62页 |
| ·烟草类胡萝卜素的含量测定 | 第62-63页 |
| ·烟草叶片脱落酸（ABA）含量测定 | 第63页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第63-64页 |
| ·SOD含量的测定 | 第64-65页 |
| ·MDA含量的测定 | 第65页 |
| ·Na~+、K~+含量测定 | 第65页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第65-66页 |
| ·逆境处理与生理指标测定 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-73页 |
| ·转基因烟草的外源基因整合与表达分析 | 第66-68页 |
| ·转基因烟草对于渗透胁迫的耐受性 | 第68页 |
| ·转基因烟草中类胡萝卜素与ABA的含量 | 第68-69页 |
| ·枸杞chyb基因在干旱胁迫条件下的作用 | 第69-71页 |
| ·盐胁迫下烟草细胞内Na~+/K~+、脯氨酸、MDA、叶绿素含量的测定 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 第五章 枸杞chyb基因启动子的克隆及其功能分析 | 第76-93页 |
| ·实验材料 | 第76-77页 |
| ·植物材料 | 第76页 |
| ·质粒和菌株 | 第76页 |
| ·主要仪器 | 第76-77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| ·所用培养基 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-84页 |
| ·枸杞chyb启动子的克隆 | 第77-80页 |
| ·高效连接启动子的植物基因工程载体构建方法 | 第80-83页 |
| ·枸杞chybpro与pJWW0230连接 | 第83页 |
| ·载体pJWW0230-chybpro与GFP荧光蛋白基因的连接 | 第83页 |
| ·烟草叶片瞬时表达 | 第83-84页 |
| ·结果与分析 | 第84-90页 |
| ·枸杞基因组提取结果 | 第84页 |
| ·枸杞chybpro的克隆 | 第84-86页 |
| ·枸杞chybpro的生物信息学分析 | 第86-87页 |
| ·高效连接启动子的植物基因工程载体构建及枸杞chybpro的功能鉴定 | 第87-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| ·TAIL-PCR技术的应用前景 | 第90-91页 |
| ·枸杞chybpro启动子功能及应用 | 第91页 |
| ·植物基因工程表达载体pJWW0230的应用 | 第91-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 第六章 结论与展望 | 第93-96页 |
| ·研究总结 | 第93-94页 |
| ·创新点 | 第94页 |
| ·展望 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
