| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| ·枸杞 | 第11页 |
| ·类胡萝卜素 | 第11-26页 |
| ·类胡萝卜素的生物功能 | 第12-14页 |
| ·植物中类胡萝卜素的生物合成途径 | 第14-17页 |
| ·类胡萝卜生物合成途径的主要基因及其酶 | 第17-21页 |
| ·植物中类胡萝卜素生物合成的调控 | 第21-24页 |
| ·类胡萝卜素基因工程对人类健康和农业的益处 | 第24-26页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的意义和研究内容 | 第27-29页 |
| ·研究的目的意义 | 第27页 |
| ·研究内容 | 第27-29页 |
| 第二章 枸杞类胡萝卜素生物合成途径关键基因的克隆及生物信息学分析 | 第29-71页 |
| ·实验材料 | 第29-33页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·质粒、菌株及引物 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·实验所用培养基 | 第32页 |
| ·实验所用主要溶液 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-40页 |
| ·引物设计及基因测序 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
| ·DNA片断回收及纯化 | 第34页 |
| ·枸杞叶片总RNA提取 | 第34-35页 |
| ·3'RACE实验 | 第35-36页 |
| ·枸杞类胡萝卜素代谢途径基因的克隆 | 第36页 |
| ·携带目的基因的克隆载体构建 | 第36-37页 |
| ·质粒的PCR验证 | 第37页 |
| ·生物信息学分析 | 第37-38页 |
| ·枸杞中各基因转录水平分析 | 第38-39页 |
| ·枸杞中类胡萝卜素提取及含量测定 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-67页 |
| ·枸杞总RNA提取 | 第40页 |
| ·基因克隆 | 第40-48页 |
| ·基因的生物信息学分析 | 第48-66页 |
| ·基因的组织特异性表达及枸杞各组织中类胡萝卜素组成和含量 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·小结 | 第69-71页 |
| 第三章 枸杞类胡萝卜生物合成基因在大肠杆菌中的表达 | 第71-90页 |
| ·实验材料 | 第71-73页 |
| ·质粒、菌株及引物 | 第71-72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·实验所用培养基 | 第72页 |
| ·实验所用主要溶液 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-76页 |
| ·重组质粒的构建 | 第73-74页 |
| ·类胡萝卜素生物合成基因的功能鉴定 | 第74-76页 |
| ·结果 | 第76-87页 |
| ·类胡萝卜生物合成基因大肠杆菌表达载体的构建 | 第76-80页 |
| ·类胡萝卜生物合成基因在大肠杆菌中的表达及功能验证 | 第80-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 第四章 枸杞类胡萝卜素生物合成基因在烟草中的表达 | 第90-115页 |
| ·实验材料 | 第90-93页 |
| ·实验植物材料 | 第90页 |
| ·质粒、菌株及引物 | 第90-91页 |
| ·主要仪器 | 第91页 |
| ·主要试剂 | 第91-92页 |
| ·实验所用培养基 | 第92-93页 |
| ·实验方法 | 第93-97页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第93页 |
| ·工程菌的制备 | 第93-94页 |
| ·农杆菌介导的烟草叶盘转化 | 第94-95页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第95-97页 |
| ·转基因烟草的类胡萝卜素含量测定 | 第97页 |
| ·结果 | 第97-113页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第97-103页 |
| ·植物表达载体电击转化农杆菌 | 第103页 |
| ·农杆菌转化烟草及转基因植株的获得 | 第103-104页 |
| ·转基因烟草的分子检测和类胡萝卜素分析 | 第104-113页 |
| ·讨论 | 第113-114页 |
| ·小结 | 第114-115页 |
| 第五章 LcPSY基因的抗逆性研究 | 第115-128页 |
| ·实验材料 | 第115-116页 |
| ·实验植物材料及生长条件 | 第115页 |
| ·引物 | 第115页 |
| ·主要仪器 | 第115-116页 |
| ·实验方法 | 第116-120页 |
| ·枸杞逆境处理 | 第116页 |
| ·烟草盐处理 | 第116页 |
| ·逆境处理下的枸杞实时定量PCR（Quantitative real-time PCR） | 第116-119页 |
| ·转基因植物生理指标测定 | 第119-120页 |
| ·数据处理 | 第120页 |
| ·结果 | 第120-125页 |
| ·LcPSY基因在不同逆境处理下的表达模式 | 第120-121页 |
| ·LcPSY调节烟草盐胁迫耐性及其机理 | 第121-125页 |
| ·讨论 | 第125-127页 |
| ·小结 | 第127-128页 |
| 第六章 结论与展望 | 第128-131页 |
| ·研究总结 | 第128-129页 |
| ·创新点 | 第129-130页 |
| ·展望 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-144页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
