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茶尺蠖普通气味结合蛋白GOBPs基因鉴定和功能研究

致谢第1-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-19页
1 绪论第19-30页
   ·茶尺蠖概述第19-20页
   ·植物挥发性气味与昆虫的关系第20-23页
     ·植物挥发性物质第20-21页
     ·植物挥发性物质对植食性昆虫的影响第21-22页
     ·植物挥发性物质在害虫防治中的应用第22-23页
   ·昆虫的嗅觉系统及其相关蛋白质第23-28页
     ·茶尺蠖触角感受器及嗅觉相关蛋白第23-24页
     ·气味结合蛋白研究进展第24-28页
   ·新烟碱类杀虫剂研究进展第28页
   ·研究的内容及意义第28-30页
     ·研究的背景及意义第28-29页
     ·研究内容第29-30页
2 茶尺蠖普通气味结合蛋白EoblGOBP1和EoblGOBP2基因的克隆与序列分析第30-41页
   ·材料与方法第30-33页
     ·材料、试剂与仪器第30页
     ·茶尺蠖触角总RNA的提取及cDNA第一链的合成第30-31页
     ·PCR引物的设计与合成第31-32页
     ·基因的扩增、克隆及测序第32-33页
     ·基因序列分析第33页
   ·结果分析第33-39页
     ·茶尺蠖EoblGOBP1和EoblGOBP2的基因扩增第33-34页
     ·基因的序列分析第34-39页
   ·本章小结第39-41页
3 茶尺蠖EoblGOBP1和EoblGOBP2基因RNA转录水平表达谱分析第41-48页
   ·材料与方法第41-43页
     ·材料、试剂与仪器第41-42页
     ·总RNA的提取、cDNA第一链的合成第42页
     ·引物的设计与标准品质粒的制备第42页
     ·标准曲线的制备第42-43页
     ·Real-time PCR反应第43页
   ·结果分析第43-46页
     ·茶尺蠖总RNA质量鉴定第43页
     ·标准曲线的制备第43-45页
     ·EoblGOBP1和EoblGOBP1基因在茶尺蠖各组织中的表达量分析第45-46页
   ·本章小结第46-48页
4 茶尺蠖普通气味结合蛋白EoblGOBP2的原核表达、蛋白纯化与抗体的制备第48-57页
   ·材料与方法第48-52页
     ·材料、试剂与仪器第48-49页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2基因原核表达载体的构建第49页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2重组蛋白的诱导第49-50页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2重组蛋白表达形式的鉴定第50页
     ·EoblGOBP2重组蛋白的分离纯化与复性第50-51页
     ·EoblGOBP2蛋白多克隆抗体的制备第51-52页
     ·抗体效价的测定第52页
   ·结果分析第52-56页
     ·原核表达载体的鉴定第52页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2蛋白的诱导及表达形式分析第52-54页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2重组蛋白的纯化第54页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2重组蛋白的复性第54-55页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2重组蛋白效价的检测第55-56页
   ·本章小结第56-57页
5 茶尺蠖EoblGOBP2结合特性的研究与触角电位反应第57-65页
   ·材料和方法第57-60页
     ·材料、试剂与仪器第57页
     ·试剂的配制第57页
     ·茶尺蠖Eobl GOBP2与1-NPN的荧光光谱第57-58页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2的配基结合实验第58-59页
     ·茶尺蠖触角电位测定第59-60页
   ·结果分析第60-63页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2与 1-NPN的荧光光谱分析第60页
     ·茶尺蠖EoblGOBP2蛋白的气味分子结合特性分析第60-62页
     ·茶尺蠖触角对候选配基的EAG反应分析第62-63页
   ·本章小结第63-65页
6 吡虫啉与茶尺蠖EoblGOBP2蛋白的结合机理研究及其对EoblGOBP2蛋白功能的影响第65-75页
   ·材料与方法第65-66页
     ·材料、试剂与仪器第65页
     ·实验方法第65-66页
   ·结果分析第66-74页
     ·EoblGOBP2蛋白与吡虫啉的荧光光谱分析第66-67页
     ·猝灭机理分析第67-69页
     ·作用力分析第69页
     ·结合距离分析第69-70页
     ·同步荧光光谱分析第70页
     ·圆二色(CD)光谱分析第70-72页
     ·分子对接第72-73页
     ·吡虫啉影响EoblGOBP2功能分析第73-74页
   ·本章小结第74-75页
7 茶尺蠖触角的扫描电镜与EoblGOBP2的触角免疫电镜定位第75-83页
   ·材料与方法第75-77页
     ·材料、试剂与仪器第75页
     ·茶尺蠖触角的扫描电镜第75页
     ·EoblGOBP2的触角免疫电镜定位第75-77页
   ·结果分析第77-82页
     ·茶尺蠖触角扫描电镜第77页
     ·EoblGOBP2的触角免疫电镜定位第77-82页
   ·本章小结第82-83页
8 总结与展望第83-86页
   ·全文总结第83-85页
   ·课题展望第85-86页
参考文献第86-95页
作者简介第95页

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