葡萄穗霉基因在黑曲霉中的表达及酶学性质
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| ·葡萄穗霉 | 第9页 |
| ·木聚糖及木聚糖酶 | 第9-14页 |
| ·木聚糖及其结构 | 第9页 |
| ·木聚糖的性质与抗营养作用 | 第9-10页 |
| ·木聚糖酶的性质及其分类 | 第10-11页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第11-13页 |
| ·木聚糖酶的研究进展 | 第13-14页 |
| ·纤维素及内切葡聚糖酶 | 第14-16页 |
| ·本研究的目的、意义和技术路线 | 第16-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·菌株与载体 | 第19页 |
| ·酶与试剂 | 第19-21页 |
| ·仪器 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·常用储存液和缓冲液的配制 | 第22-24页 |
| ·穿梭载体pGm图谱 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·葡萄穗霉全基因组DNA上目的基因的挖掘 | 第24-25页 |
| ·基因的克隆与表达 | 第25-28页 |
| ·黑曲霉G1原生质体的制备及真菌转化 | 第28-29页 |
| ·重组酶的表达 | 第29-30页 |
| ·木聚糖酶酶学性质研究 | 第30-33页 |
| ·葡聚糖酶酶学性质研究 | 第33-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-49页 |
| ·基因挖掘 | 第35-37页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·黑曲霉的转化 | 第39-41页 |
| ·黑曲霉原生质体的制备 | 第39-40页 |
| ·转化子的培养 | 第40-41页 |
| ·重组黑曲霉菌株的PCR快速鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第42-43页 |
| ·重组木聚糖酶活性及酶学性质测定 | 第43-46页 |
| ·木糖标准曲线 | 第43-44页 |
| ·蛋白浓度测定标准曲线绘制 | 第44页 |
| ·木聚糖酶粗酶液比酶活测定 | 第44页 |
| ·木聚糖酶粗酶液的最适反应pH和pH稳定性 | 第44-45页 |
| ·木聚糖酶粗酶液的最适反应温度和温度稳定性 | 第45-46页 |
| ·重组GH61酶活性及酶学性质测定 | 第46-47页 |
| ·葡萄糖标准曲线的制定 | 第46-47页 |
| ·GH61酶活测定 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 5 展望 | 第50-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-57页 |
| 7 论文发表情况 | 第57-58页 |
| 8 致谢 | 第58页 |
