| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-18页 |
| ·冬虫夏草 | 第11页 |
| ·虫草素 | 第11-14页 |
| ·虫草素的药理作用 | 第11-12页 |
| ·虫草素的临床应用 | 第12页 |
| ·虫草素药源问题研究 | 第12-13页 |
| ·虫草素液体发酵生产的研究 | 第13-14页 |
| ·虫草素微生物发酵生产的研究 | 第14页 |
| ·蝙蝠蛾拟青霉菌（Paecilomyces hepiali） | 第14-15页 |
| ·代谢通路关键酶研究方法概述 | 第15-16页 |
| ·转录组测序预测关键酶基因 | 第15-16页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT) | 第16页 |
| ·论文主要研究目标，内容及研究意义 | 第16-18页 |
| ·论文研究目标 | 第16页 |
| ·论文研究内容 | 第16-17页 |
| ·论文拟突破的难题 | 第17页 |
| ·论文的研究意义 | 第17-18页 |
| 第二章 虫草素合成相关酶基因的筛选 | 第18-34页 |
| 前言 | 第18页 |
| ·实验材料与主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·本章技术路线 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·蝙蝠蛾拟青霉菌培养条件 | 第19-20页 |
| ·样本选取 | 第20-21页 |
| ·转录本的重新预测与蛋白预测 | 第21-22页 |
| ·虫草素代谢关键酶基因的确定 | 第22-23页 |
| ·根据化合物关系预测虫草素合成途径 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-32页 |
| ·基因预测 | 第23-24页 |
| ·基因和蛋白序列数据比对 | 第24-27页 |
| ·蛋白结构域分析 | 第27-28页 |
| ·基因表达分析 | 第28-29页 |
| ·与虫草素相关的Pathway分析 | 第29-30页 |
| ·虫草素相关化合物的关系网络分析 | 第30-31页 |
| ·虫草素代谢关键酶基因分析 | 第31-32页 |
| ·根据化合物关系预测虫草素合成途径 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 关键酶基因的克隆与表达研究 | 第34-48页 |
| 前言 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·In-fusion技术 | 第35页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第35-36页 |
| ·关键酶基因片段的获得 | 第36-38页 |
| ·重组质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第40-41页 |
| ·农杆菌EHA105和LBA4404转化效率的比较 | 第41页 |
| ·蝙蝠蛾拟青霉菌对潮霉素B的抗性浓度筛选 | 第41-42页 |
| ·重组质粒转入农杆菌 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的蝙蝠蛾拟青霉菌的转化 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·蝙蝠蛾拟青霉菌RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·关键酶基因的获得 | 第44页 |
| ·重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·两种根癌农杆菌对于蝙蝠蛾拟青霉菌转化效率的比较实验 | 第45页 |
| ·蝙蝠蛾拟青霉菌对潮霉素B的抗性浓度筛选 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的蝙蝠蛾拟青霉菌的转化 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 关键酶基因表达水平及虫草素含量的测定 | 第48-57页 |
| 前言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| ·突变菌株差异基因表达检测 | 第49-50页 |
| ·荧光定量PCR | 第49页 |
| ·RT-PCR检测差异基因的m RNA表达 | 第49-50页 |
| ·转基因菌株中虫草素含量的测定 | 第50-52页 |
| ·UPLC ESI MS/MS简述 | 第50-51页 |
| ·虫草素含量的测定 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·突变菌株差异基因表达检测部分 | 第52-54页 |
| ·虫草素含量测定部分 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 第五章 论文总结 | 第57-60页 |
| ·结论 | 第57-58页 |
| ·论文的创新之处 | 第58-59页 |
| ·今后的工作展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 1 表目录 | 第67-68页 |
| 附录 2 图目录 | 第68-69页 |
| 附录 3 AMI基因序列 | 第69-70页 |
| 附录 4 IMP基因序列 | 第70-71页 |
| 附录 5 GMP基因序列 | 第71页 |
| 附录 6 拟定代谢图中所涉及到的反应 | 第71-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
