| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-72页 |
| ·微管动力学与微管正端结合蛋白 | 第12-24页 |
| ·微管骨架动力学概述 | 第12-16页 |
| ·EB蛋白家族 | 第16-19页 |
| ·APC(Adenomatous Polyposis Coli-Protein) | 第19-22页 |
| ·有丝分裂着丝粒相关驱动蛋白MCAK | 第22-23页 |
| ·Clasp1/2与CLIP-170 | 第23页 |
| ·小结 | 第23-24页 |
| ·蛋白质的翻译后修饰 | 第24-36页 |
| ·磷酸化修饰 | 第24-28页 |
| ·蛋白质的乙酰化修饰 | 第28-36页 |
| ·细胞周期与有丝分裂 | 第36-52页 |
| ·细胞周期 | 第36-39页 |
| ·细胞周期检验点 | 第39页 |
| ·动点-微管连接 | 第39-43页 |
| ·纺锤体定位与定向 | 第43-47页 |
| ·非整倍体与染色体不稳定性 | 第47-50页 |
| ·以细胞周期为靶点的抗肿瘤治疗 | 第50-52页 |
| ·超高分辨率显微术及其应用 | 第52-72页 |
| ·超高分辨率显微术的诞生 | 第52-57页 |
| ·光敏定位显微术 | 第57-65页 |
| ·随机光学重建显微术 | 第65-67页 |
| ·淬灭/闪烁辅助的超高分辨率显微术 | 第67页 |
| ·结构照明显微术与非线性信号 | 第67-70页 |
| ·超高分辨率显微术的应用举例 | 第70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 第2章 EB1的乙酰化修饰及其对有丝分裂的调控作用 | 第72-121页 |
| ·引言 | 第72-73页 |
| ·材料与方法 | 第73-80页 |
| ·细胞培养 | 第73页 |
| ·质粒构建 | 第73-74页 |
| ·siRNA转染 | 第74页 |
| ·抑制剂 | 第74页 |
| ·抗体 | 第74-75页 |
| ·重组蛋白 | 第75页 |
| ·Western Blot免疫印迹实验 | 第75-76页 |
| ·Pull-Down实验 | 第76页 |
| ·体外乙酰化实验 | 第76页 |
| ·序列比对 | 第76页 |
| ·蛋白结构分析及展示 | 第76页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET)光谱学 | 第76-77页 |
| ·核磁共振实验 | 第77页 |
| ·免疫荧光显微术 | 第77-78页 |
| ·活细胞成像 | 第78页 |
| ·动点位置分析 | 第78页 |
| ·体外微管沉淀实验 | 第78-80页 |
| ·结果 | 第80-120页 |
| ·EB1为PCAF的乙酰化底物 | 第80-83页 |
| ·EB1K220为EB1与其他+TIPs结合所必需 | 第83-86页 |
| ·K220对EB1 C端疏水小窝的稳定性具有重要意义 | 第86-93页 |
| ·EB1 K220位在有丝分裂期发生乙酰化修饰 | 第93-98页 |
| ·持续的K220乙酰化激活Mad2依赖的有丝分裂检验点 | 第98-101页 |
| ·EB1 K220乙酰化及其功能小结 | 第101-103页 |
| ·EB1 K66位乙酰化修饰 | 第103-105页 |
| ·K66与K220乙酰化的时空动态性差异 | 第105-107页 |
| ·K66乙酰化不影响有丝分裂进程 | 第107-109页 |
| ·3D活细胞实验检测K66乙酰化对纺锤体定位的影响 | 第109-111页 |
| ·EB1 K66位乙酰化对细胞定向的影响 | 第111-113页 |
| ·EB1 K66乙酰化影响其微管正端示踪性能 | 第113页 |
| ·EB1的微管结合强度受到66位乙酰化影响 | 第113-117页 |
| ·EB1 K66位乙酰化影响星体微管稳定性 | 第117-120页 |
| ·总结 | 第120-121页 |
| 第3章 超高分辨率成像揭示EB1在微管正端的精细定位 | 第121-146页 |
| ·引言 | 第121-122页 |
| ·材料与方法 | 第122-125页 |
| ·质粒构建与小分子化合物 | 第122页 |
| ·突变体构建 | 第122页 |
| ·蛋白表达纯化以及非变性凝胶电泳 | 第122-123页 |
| ·细胞培养 | 第123页 |
| ·免疫荧光成像 | 第123页 |
| ·免疫印迹 | 第123页 |
| ·蛋白质结构模拟 | 第123页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET)光谱 | 第123页 |
| ·宽场荧光成像 | 第123-124页 |
| ·超高分辨率显微成像(PALM) | 第124页 |
| ·数据统计 | 第124页 |
| ·序列比对 | 第124-125页 |
| ·结果 | 第125-143页 |
| ·可激发型荧光互补系统(PACF)的构建 | 第125页 |
| ·固定细胞中EB1-PACF的超高分辨率成像 | 第125-126页 |
| ·活细胞中EB1-PACF的超高分辨率成像 | 第126-134页 |
| ·超高分辨率成像显示迁移细胞中的EB1-PACF具有不同的定位类型 | 第134-137页 |
| ·EB1柔性linker区域中K/R对其微管正端示踪性至关重要 | 第137-143页 |
| ·总结与展望 | 第143-146页 |
| 参考文献 | 第146-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第159-161页 |
