| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-26页 |
| ·膜蛋白概述 | 第12-13页 |
| ·膜转运蛋白 | 第13-15页 |
| ·被动运输 | 第13-14页 |
| ·主动运输 | 第14-15页 |
| ·MFS家族研究现状 | 第15-19页 |
| ·MFS超家族蛋白分类 | 第15-16页 |
| ·MFS超家族结构生物学研究 | 第16-18页 |
| ·MFS超家族转运机制 | 第18-19页 |
| ·POT家族研究背景 | 第19-26页 |
| ·POTs家族保守motif | 第19-20页 |
| ·人源POTs家族转运蛋白,PepT1和PepT2 | 第20-21页 |
| ·POTs家族结构生物学研究 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌YbgH(EcYbgH)研究背景 | 第22-26页 |
| 第2章 膜蛋白的结构生物学研究 | 第26-42页 |
| ·膜蛋白表达 | 第26-27页 |
| ·去污剂 | 第27-30页 |
| ·去污剂的分类 | 第27-28页 |
| ·去污剂在溶液中的性质 | 第28-29页 |
| ·去污剂在结构生物学中的应用 | 第29-30页 |
| ·晶体生长 | 第30-33页 |
| ·膜蛋白晶体堆积方式 | 第30-31页 |
| ·结晶方法 | 第31-32页 |
| ·提高膜蛋白稳定性 | 第32-33页 |
| ·重原子浸泡 | 第33-35页 |
| ·数据收集以及结构修正 | 第35-39页 |
| ·同步辐射设施发展 | 第35-36页 |
| ·数据收集、处理 | 第36-38页 |
| ·模型搭建以及结构修正策略 | 第38-39页 |
| ·展望 | 第39-42页 |
| 第3章 实验原理与方法 | 第42-50页 |
| ·克隆构建 | 第42-43页 |
| ·双酶切构建 | 第42页 |
| ·不依赖于连接酶的构建 | 第42页 |
| ·点突变构建 | 第42-43页 |
| ·大肠杆菌系统膜蛋白表达 | 第43-44页 |
| ·破菌、蛋白纯化 | 第44-46页 |
| ·硒代晶体制备 | 第46-47页 |
| ·细胞水平的转运试验 | 第47页 |
| ·Western Blot检测膜蛋白表达水平 | 第47-50页 |
| 第4章 大肠杆菌YbgH的克隆、表达和结晶 | 第50-58页 |
| ·EcYbgH基本信息 | 第50页 |
| ·EcYbgH的克隆,表达以及纯化条件摸索 | 第50-52页 |
| ·EcYbgH克隆、表达 | 第50-51页 |
| ·EcYbgH不同去污剂 | 第51-52页 |
| ·EcYbgH晶体筛选和优化 | 第52-58页 |
| ·晶体初步筛选 | 第52-54页 |
| ·晶体优化和重复 | 第54-55页 |
| ·重原子衍生物制备 | 第55-58页 |
| 第5章 数据收集、结构解析以及修正 | 第58-66页 |
| ·晶体数据收集 | 第58页 |
| ·相位解析 | 第58-61页 |
| ·模型搭建以及修正 | 第61-63页 |
| ·EcYbgH晶体结构分析 | 第63-66页 |
| 第6章 EcYbgH基于结构的功能研究 | 第66-76页 |
| ·质子化位点 | 第66-69页 |
| ·膜电位与转运蛋白 | 第66页 |
| ·质子化如何成为驱动力 | 第66-67页 |
| ·EcYbgH质子化位点 | 第67-69页 |
| ·Motif A | 第69-73页 |
| ·Motif A的工作机制 | 第69-71页 |
| ·EcYbgH中的motif A | 第71-73页 |
| ·V形插入螺旋 | 第73-75页 |
| ·motif A调控模型 | 第73-74页 |
| ·HAB的功能 | 第74-75页 |
| ·结论与展望 | 第75-76页 |
| 第7章 CsgG结构与功能研究 | 第76-86页 |
| ·细菌与Curli | 第76-77页 |
| ·大肠杆菌Curli的研究 | 第77-78页 |
| ·CsgG的克隆、表达、纯化以及长晶体 | 第78-79页 |
| ·CsgG结构解析及修正 | 第79-83页 |
| ·CsgG结构分析 | 第83-85页 |
| ·CsgG的功能研究 | 第85-86页 |
| 第8章 参与的其它工作 | 第86-91页 |
| ·EcYajR的结构解析 | 第86-88页 |
| ·EcYajR研究背景 | 第86页 |
| ·EcYaJR结构解析、修正以及分析 | 第86-87页 |
| ·YAM结构域 | 第87-88页 |
| ·EcPgpB的结构解析 | 第88-90页 |
| ·EcPgpB研究背景 | 第88-89页 |
| ·EcPgpB晶体结构解析 | 第89-90页 |
| ·脂多糖合成相关复合物LptD/E | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 附录1 实验仪器和材料 | 第100-102页 |
| 附录2 E.coli MFS超家族转运蛋白motif A预测 | 第102-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第108页 |