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产毒多杀性巴氏杆菌毒素的不同重组片段的免疫原性比较

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
缩略词表第10-14页
第一章 引言第14-23页
   ·猪进行性萎缩性鼻炎概述第14-19页
     ·病原学第14-15页
     ·致病机理第15页
     ·流行病学第15-16页
     ·临床症状第16页
     ·病理变化第16-17页
     ·诊断第17-18页
     ·免疫与防控第18-19页
   ·PMT毒素的研究进展第19-21页
     ·PMT的一般特性第19页
     ·PMT致病机理第19页
     ·PMT检测第19页
     ·PMT生物学活性第19-20页
     ·PMT免疫原性片段研究第20-21页
   ·猪萎缩性鼻炎疫苗的发展第21页
   ·本研究的目的与意义第21-23页
第二章 多杀性巴氏杆菌毒素不同基因片段的克隆第23-38页
   ·引言第23-24页
   ·材料第24页
     ·菌株、质粒和细胞第24页
     ·主要试剂第24页
   ·方法第24-31页
     ·多杀性巴氏杆菌的培养第24页
     ·PMT基因的扩增第24-25页
     ·重组克隆质粒pMD18-T-PMT的构建第25-26页
     ·重组克隆质粒pMD18-T-PMT的鉴定第26-27页
     ·PMT蛋白抗原表位分析及PMT片段的选取第27页
     ·PMT片段的基因扩增第27-29页
     ·重组表达载体的构建第29-30页
     ·重组表达载体的鉴定第30-31页
   ·结果第31-37页
     ·PMT毒素基因的扩增第31页
     ·重组克隆质粒pMD18-T-PMT的鉴定第31-34页
     ·PMT蛋白抗原表位分析及PMT片段的选取第34-35页
     ·8 个PMT片段的基因扩增结果第35-36页
     ·重组表达载体的鉴定第36-37页
   ·讨论第37页
   ·小结第37-38页
第三章 多杀性巴氏杆菌毒素不同重组片段的表达和鉴定第38-54页
   ·引言第38页
   ·材料第38-39页
     ·菌株、质粒和细胞第38-39页
     ·毒素、血清与抗体第39页
     ·主要试剂第39页
     ·实验动物第39页
   ·方法第39-42页
     ·多杀性巴氏杆菌的培养第39页
     ·重组PMT片段的诱导表达第39-40页
     ·重组PMT片段的生物学特性研究第40页
     ·重组菌表达条件的优化第40-41页
     ·PMT抗血清的制备第41-42页
   ·结果第42-52页
     ·重组菌的诱导表达第42-43页
     ·重组PMT片段的生物学特性研究第43-44页
     ·重组菌表达条件的优化第44-52页
     ·PMT抗血清的制备第52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
第四章 不同重组PMT片段的免疫原性研究第54-73页
   ·引言第54-55页
   ·材料第55页
     ·菌株、质粒和细胞第55页
     ·毒素、血清与抗体第55页
     ·主要试剂第55页
     ·实验动物第55页
   ·方法第55-59页
     ·重组PMT片段的制备第55页
     ·重组PMT片段浓度的测定第55-56页
     ·不同重组PMT片段包涵体疫苗的免疫效果比较第56页
     ·不同重组PMT片段全菌灭活疫苗的免疫效果比较第56-57页
     ·重组PMT片段全菌灭活疫苗对猪的免疫保护试验第57-59页
   ·结果第59-70页
     ·不同重组PMT片段浓度的测定第59页
     ·不同重组PMT片段包涵体疫苗的免疫效果比较第59-60页
     ·不同重组PMT片段全菌灭活疫苗的免疫效果比较第60-61页
     ·重组PMT片段全菌灭活疫苗对仔猪的免疫保护试验第61-70页
   ·讨论第70-71页
   ·小结第71-73页
第五章 结论第73-74页
参考文献第74-78页
致谢第78-79页
附录1 pET-32a-c(+)载体第79-80页
附录2 试验用主要溶液和培养基的配制第80-85页
 1. 琼脂糖凝胶电泳所用相关溶液第80页
 2. SDS-PAGE电泳所用相关溶液第80-82页
 3. Western-blotting所用相关溶液第82页
 4. 部分培养基第82-84页
 5. 其他溶液第84-85页
附录3 试验用主要仪器设备第85-86页
作者简历第86页

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