| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 缩略词表 | 第10-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| ·猪进行性萎缩性鼻炎概述 | 第14-19页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·致病机理 | 第15页 |
| ·流行病学 | 第15-16页 |
| ·临床症状 | 第16页 |
| ·病理变化 | 第16-17页 |
| ·诊断 | 第17-18页 |
| ·免疫与防控 | 第18-19页 |
| ·PMT毒素的研究进展 | 第19-21页 |
| ·PMT的一般特性 | 第19页 |
| ·PMT致病机理 | 第19页 |
| ·PMT检测 | 第19页 |
| ·PMT生物学活性 | 第19-20页 |
| ·PMT免疫原性片段研究 | 第20-21页 |
| ·猪萎缩性鼻炎疫苗的发展 | 第21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 多杀性巴氏杆菌毒素不同基因片段的克隆 | 第23-38页 |
| ·引言 | 第23-24页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-31页 |
| ·多杀性巴氏杆菌的培养 | 第24页 |
| ·PMT基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-PMT的构建 | 第25-26页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-PMT的鉴定 | 第26-27页 |
| ·PMT蛋白抗原表位分析及PMT片段的选取 | 第27页 |
| ·PMT片段的基因扩增 | 第27-29页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-37页 |
| ·PMT毒素基因的扩增 | 第31页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-PMT的鉴定 | 第31-34页 |
| ·PMT蛋白抗原表位分析及PMT片段的选取 | 第34-35页 |
| ·8 个PMT片段的基因扩增结果 | 第35-36页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 多杀性巴氏杆菌毒素不同重组片段的表达和鉴定 | 第38-54页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第38-39页 |
| ·毒素、血清与抗体 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-42页 |
| ·多杀性巴氏杆菌的培养 | 第39页 |
| ·重组PMT片段的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·重组PMT片段的生物学特性研究 | 第40页 |
| ·重组菌表达条件的优化 | 第40-41页 |
| ·PMT抗血清的制备 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-52页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·重组PMT片段的生物学特性研究 | 第43-44页 |
| ·重组菌表达条件的优化 | 第44-52页 |
| ·PMT抗血清的制备 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 不同重组PMT片段的免疫原性研究 | 第54-73页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第55页 |
| ·毒素、血清与抗体 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·实验动物 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| ·重组PMT片段的制备 | 第55页 |
| ·重组PMT片段浓度的测定 | 第55-56页 |
| ·不同重组PMT片段包涵体疫苗的免疫效果比较 | 第56页 |
| ·不同重组PMT片段全菌灭活疫苗的免疫效果比较 | 第56-57页 |
| ·重组PMT片段全菌灭活疫苗对猪的免疫保护试验 | 第57-59页 |
| ·结果 | 第59-70页 |
| ·不同重组PMT片段浓度的测定 | 第59页 |
| ·不同重组PMT片段包涵体疫苗的免疫效果比较 | 第59-60页 |
| ·不同重组PMT片段全菌灭活疫苗的免疫效果比较 | 第60-61页 |
| ·重组PMT片段全菌灭活疫苗对仔猪的免疫保护试验 | 第61-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第五章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 附录1 pET-32a-c(+)载体 | 第79-80页 |
| 附录2 试验用主要溶液和培养基的配制 | 第80-85页 |
| 1. 琼脂糖凝胶电泳所用相关溶液 | 第80页 |
| 2. SDS-PAGE电泳所用相关溶液 | 第80-82页 |
| 3. Western-blotting所用相关溶液 | 第82页 |
| 4. 部分培养基 | 第82-84页 |
| 5. 其他溶液 | 第84-85页 |
| 附录3 试验用主要仪器设备 | 第85-86页 |
| 作者简历 | 第86页 |