| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-15页 |
| ·病原学研究 | 第8-9页 |
| ·基因组结构和分子生物学特性 | 第9-11页 |
| ·猪流行性腹泻免疫病理学研究 | 第11页 |
| ·分子流行病学 | 第11-12页 |
| ·诊断 | 第12页 |
| ·PED的疫苗研究 | 第12-14页 |
| ·灭活疫苗 | 第12-13页 |
| ·弱毒疫苗 | 第13页 |
| ·亚单位疫苗 | 第13页 |
| ·乳酸杆菌疫苗 | 第13-14页 |
| 研究目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 猪流行性腹泻病毒的主要结构基因的遗传变异分析 | 第15-32页 |
| 摘要 | 第15-16页 |
| ·材料与方法 | 第16-21页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·主要试剂的配制 | 第17页 |
| ·病料的采集与处理 | 第17-18页 |
| ·引物设计 | 第18页 |
| ·临床样品检测 | 第18-19页 |
| ·病毒基因的克隆及测序 | 第19-20页 |
| ·S基因序列拼接分析 | 第20-21页 |
| ·结果 | 第21-30页 |
| ·临床腹泻样品RT-PCR检测 | 第21页 |
| ·RT-PCR目的片段的扩增 | 第21-22页 |
| ·扩增片段Blast分析结果 | 第22-23页 |
| ·主要结构蛋白氨基酸序列比较 | 第23-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白的原核表达 | 第32-52页 |
| 摘要 | 第32-33页 |
| ·材料和方法 | 第33页 |
| ·菌种、载体和血清 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·基因的扩增与克隆 | 第34页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组M、N、S1蛋白的诱导表达 | 第36-38页 |
| ·重组M、N、S1蛋白最佳诱导温度的确定 | 第38页 |
| ·重组M、N、S1蛋白的抗原性分析 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-49页 |
| ·M、N、S1基因的扩增 | 第38页 |
| ·重组表达载体p GEX-6p-M、p GEX-6p-N、p GEX-6p-S1的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组表达载体基因序列的测定 | 第39页 |
| ·重组M、N、S1蛋白的诱导表达 | 第39-42页 |
| ·重组M、N、S1蛋白诱导温度的优化 | 第42-48页 |
| ·重组M、N、S1蛋白抗原性分析 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 猪流行性腹泻病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立 | 第52-65页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| ·材料和方法 | 第53页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·相关溶液的配制 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-57页 |
| ·重组N蛋白的包涵体纯化与鉴定 | 第53-54页 |
| ·间接ELISA方法的建立及条件优化 | 第54-56页 |
| ·S/P值计算方法 | 第56页 |
| ·临界值判定 | 第56页 |
| ·敏感性试验 | 第56页 |
| ·特异性试验 | 第56页 |
| ·重复性试验 | 第56-57页 |
| ·符合率试验 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-64页 |
| ·重组N蛋白的纯化和鉴定 | 第57页 |
| ·间接ELISA方法的建立和条件优化结果 | 第57-60页 |
| ·临界值的判定 | 第60-62页 |
| ·敏感性试验 | 第62页 |
| ·特异性试验 | 第62-63页 |
| ·重复性试验 | 第63页 |
| ·符合率分析 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
