致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
专业词汇中英文对照 | 第10-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-22页 |
·恶性黑色素瘤转移的研究 | 第16-17页 |
·恶性黑色素瘤概述 | 第16页 |
·肿瘤转移概述 | 第16页 |
·恶性黑色素瘤的转移 | 第16-17页 |
·缺氧与恶性黑色素瘤转移及STAT3 | 第17-19页 |
·缺氧对恶性黑色素瘤转移的影响 | 第17页 |
·STAT3 | 第17-18页 |
·STAT3与肿瘤转移及缺氧 | 第18-19页 |
·lncRNAs与肿瘤转移及缺氧 | 第19-22页 |
·lncRNAs | 第19页 |
·lncRNAs对肿瘤转移的调控 | 第19页 |
·lncRNAs对恶性黑色素瘤转移的调控 | 第19-20页 |
·缺氧对lncRNAs的调控 | 第20页 |
·LSAT1 | 第20-22页 |
第二章 材料和方法 | 第22-38页 |
·细胞样品 | 第22页 |
·实验试剂和仪器 | 第22-26页 |
·实验试剂和耗材 | 第22-23页 |
·试剂盒 | 第23页 |
·常用溶液和培养基 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·菌株 | 第23页 |
·质粒 | 第23-25页 |
·引物 | 第25-26页 |
·DNA测序 | 第26页 |
·引物合成 | 第26页 |
·生物信息学分析软件 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-37页 |
·细胞培养 | 第26-27页 |
·细胞复苏 | 第27页 |
·细胞传代和扩大培养 | 第27页 |
·细胞冻存 | 第27页 |
·制备DH5α感受态细胞 | 第27-28页 |
·载体转化感受态DH5α | 第28页 |
·质粒小提 | 第28-29页 |
·DNA产物纯化 | 第29页 |
·琼脂糖凝胶DNA回收 | 第29页 |
·流式细胞仪分选细胞 | 第29-30页 |
·苯酚/氯仿抽提法提取质料DNA | 第30页 |
·限制性内切酶反应体系和条件 | 第30-31页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
·PCR反应 | 第31-32页 |
·DNA连接反应 | 第32页 |
·免疫印迹技术(Western blot) | 第32-33页 |
·细胞化学转染 | 第33-34页 |
·细胞侵袭 | 第34页 |
·细胞迁移 | 第34-35页 |
·细胞克隆形成 | 第35页 |
·Trizol法提取细胞总RNA | 第35页 |
·Real-time PCR | 第35-36页 |
·基因敲低载体的构建 | 第36-37页 |
·高通量测序和分析 | 第37-38页 |
第三章 结果与讨论 | 第38-52页 |
·目标lncRNA的筛选 | 第38-41页 |
·候选lncRNA的初步筛选 | 第38-39页 |
·筛除snoRNA前体 | 第39页 |
·候选lncRNAs在不同组织和恶性黑色素瘤细胞A375、A208中的表达水平 | 第39-40页 |
·目标lncRNA的最终确定 | 第40-41页 |
·SAT1基因结构和LSAT1蛋白编码能力分析 | 第41-43页 |
·SAT1基因结构分析 | 第41-42页 |
·LSAT1蛋白编码能力分析 | 第42-43页 |
·过表达lncRNA-LSAT1抑制恶性黑色素转移和克隆形成 | 第43-49页 |
·过表达LSAT1抑制A375细胞迁移 | 第43-44页 |
·过表达LSAT1抑制A375细胞侵袭 | 第44-45页 |
·过表达LSAT1对A375细胞基因表达的调控 | 第45-46页 |
·敲低LSAT1促进A2058细胞迁移 | 第46-47页 |
·敲低LSAT1促进A2058细胞克隆形成 | 第47-48页 |
·敲低LSAT1对A2058细胞基因表达的调控 | 第48-49页 |
·缺氧可能通过STAT3β抑制LSAT1的表达 | 第49-52页 |
·缺氧抑制LSAT1的表达 | 第49页 |
·缺氧可能通过STAT3β抑制LSAT1的表达 | 第49-52页 |
第四章 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录 | 第58-62页 |
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第62页 |