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lncRNA LSAT1在恶性黑色素瘤转移过程中作用的研究

致谢第1-7页
摘要第7-8页
ABSTRACT第8-10页
专业词汇中英文对照第10-14页
引言第14-16页
第一章 文献综述第16-22页
   ·恶性黑色素瘤转移的研究第16-17页
     ·恶性黑色素瘤概述第16页
     ·肿瘤转移概述第16页
     ·恶性黑色素瘤的转移第16-17页
   ·缺氧与恶性黑色素瘤转移及STAT3第17-19页
     ·缺氧对恶性黑色素瘤转移的影响第17页
     ·STAT3第17-18页
     ·STAT3与肿瘤转移及缺氧第18-19页
   ·lncRNAs与肿瘤转移及缺氧第19-22页
     ·lncRNAs第19页
     ·lncRNAs对肿瘤转移的调控第19页
     ·lncRNAs对恶性黑色素瘤转移的调控第19-20页
     ·缺氧对lncRNAs的调控第20页
     ·LSAT1第20-22页
第二章 材料和方法第22-38页
   ·细胞样品第22页
   ·实验试剂和仪器第22-26页
     ·实验试剂和耗材第22-23页
     ·试剂盒第23页
     ·常用溶液和培养基第23页
     ·实验仪器第23页
     ·菌株第23页
     ·质粒第23-25页
     ·引物第25-26页
     ·DNA测序第26页
     ·引物合成第26页
     ·生物信息学分析软件第26页
   ·实验方法第26-37页
     ·细胞培养第26-27页
     ·细胞复苏第27页
     ·细胞传代和扩大培养第27页
     ·细胞冻存第27页
     ·制备DH5α感受态细胞第27-28页
     ·载体转化感受态DH5α第28页
     ·质粒小提第28-29页
     ·DNA产物纯化第29页
     ·琼脂糖凝胶DNA回收第29页
     ·流式细胞仪分选细胞第29-30页
     ·苯酚/氯仿抽提法提取质料DNA第30页
     ·限制性内切酶反应体系和条件第30-31页
     ·琼脂糖凝胶电泳第31页
     ·PCR反应第31-32页
     ·DNA连接反应第32页
     ·免疫印迹技术(Western blot)第32-33页
     ·细胞化学转染第33-34页
     ·细胞侵袭第34页
     ·细胞迁移第34-35页
     ·细胞克隆形成第35页
     ·Trizol法提取细胞总RNA第35页
     ·Real-time PCR第35-36页
     ·基因敲低载体的构建第36-37页
   ·高通量测序和分析第37-38页
第三章 结果与讨论第38-52页
   ·目标lncRNA的筛选第38-41页
     ·候选lncRNA的初步筛选第38-39页
     ·筛除snoRNA前体第39页
     ·候选lncRNAs在不同组织和恶性黑色素瘤细胞A375、A208中的表达水平第39-40页
     ·目标lncRNA的最终确定第40-41页
   ·SAT1基因结构和LSAT1蛋白编码能力分析第41-43页
     ·SAT1基因结构分析第41-42页
     ·LSAT1蛋白编码能力分析第42-43页
   ·过表达lncRNA-LSAT1抑制恶性黑色素转移和克隆形成第43-49页
     ·过表达LSAT1抑制A375细胞迁移第43-44页
     ·过表达LSAT1抑制A375细胞侵袭第44-45页
     ·过表达LSAT1对A375细胞基因表达的调控第45-46页
     ·敲低LSAT1促进A2058细胞迁移第46-47页
     ·敲低LSAT1促进A2058细胞克隆形成第47-48页
     ·敲低LSAT1对A2058细胞基因表达的调控第48-49页
   ·缺氧可能通过STAT3β抑制LSAT1的表达第49-52页
     ·缺氧抑制LSAT1的表达第49页
     ·缺氧可能通过STAT3β抑制LSAT1的表达第49-52页
第四章 结论第52-54页
参考文献第54-58页
附录第58-62页
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果第62页

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