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莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶cDNA克隆及其油脂调控的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-20页
   ·研究背景第11-13页
     ·微藻生物柴油的优点第11页
     ·微藻生物柴油生产的瓶颈及其策略第11-13页
   ·油脂合成与代谢的基因工程改造第13-15页
     ·提高自由脂肪酸含量的基因工程策略第13-14页
     ·调控三脂酰甘油(TAG)合成的基因工程策略第14页
     ·降低油脂代谢的基因工程策略第14-15页
   ·酰基辅酶A合成酶调控脂肪酸的代谢第15-18页
     ·酰基辅酶A合成酶的酶学特征第15页
     ·酰基辅酶A合成酶的作用机制及其功能第15-16页
     ·酰基辅酶A合成酶调控脂肪酸的研究第16-18页
   ·研究的目的、意义及技术路线第18-20页
第二章 莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶的cDNA克隆及其功能分析第20-42页
   ·实验材料第20-24页
     ·常用培养基第20-21页
     ·藻株和菌株第21-22页
     ·酶及试剂第22-24页
   ·实验方法第24-32页
     ·酰基辅酶A合成酶的cDNA克隆及其生物信息学分析第24-27页
     ·重组表达载体的构建及其酵母的转化第27-30页
     ·crACS1 和crACS2 体外功能分析第30页
     ·crACS1 和crACS2 莱茵衣藻体内功能分析第30-32页
   ·实验结果第32-40页
     ·酰基辅酶A合成酶的cDNA克隆及生物信息学分析第32-37页
     ·重组表达载体的构建及其酵母的转化第37-38页
     ·crACS1 和crACS2 体外功能分析第38-39页
     ·crACS1 和crACS2 在莱茵衣藻体内的功能分析第39-40页
   ·讨论第40-42页
第三章 莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶反义调控脂肪酸的研究第42-61页
   ·实验材料第42-44页
     ·常用培养基第42页
     ·藻株和菌株第42页
     ·酶及试剂第42-44页
   ·实验方法第44-50页
     ·反义RNA片段的扩增第44页
     ·重组表达载体的构建第44-45页
     ·莱茵衣藻的遗传转化第45-46页
     ·转基因藻的分子水平检测第46-48页
     ·莱茵衣藻生长曲线的绘制第48页
     ·目的基因的荧光定量PCR检测第48-49页
     ·脂肪酸的提取及检测第49-50页
   ·实验结果第50-58页
     ·莱茵衣藻反义载体的构建及其遗传转化第50-52页
     ·反义RNA对莱茵衣藻ACS基因转录调控的研究第52-54页
     ·反义RNA对转基因藻脂肪酸含量和组分的影响第54-58页
   ·讨论第58-61页
第四章 总结与展望第61-63页
   ·主要结论第61页
   ·研究展望第61-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-71页
攻读硕士期间的研究成果第71-72页
附录第72-73页

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