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超声波介导的大肠杆菌转化技术研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-25页
   ·现代发酵工程第11-15页
     ·微生物与发酵第11-12页
     ·现代发酵工程特点第12-13页
     ·现代发酵工程的操作步骤第13页
     ·现代发酵工程的发酵方式第13-14页
     ·现代发酵工艺存在的一些问题第14-15页
   ·大肠杆菌在现代发酵工程中的应用与意义第15-16页
   ·常见的大肠杆菌转化方法第16-22页
     ·电转化法第17-18页
     ·CaCl_2法第18-19页
     ·TSS法第19-20页
     ·甘油-聚乙二醇(Glycerin-PEG)法第20-21页
     ·超声波法第21-22页
   ·超声波介导的DNA转化技术研究现状第22-23页
   ·超声波介导的大肠杆菌转化技术研究的内容与意义第23-24页
   ·技术路线第24-25页
第二章 E. coli BL21(DE3)在TB培养基中生长曲线测定第25-32页
   ·材料第25-26页
     ·菌株第25-26页
     ·培养基第26页
     ·主要仪器第26页
   ·实验方法第26-27页
     ·生长曲线测定第26-27页
     ·利用稀释平板计数法确定不同OD600值下的E. coli BL21(DE3)菌落密度第27页
   ·实验结果与讨论第27-32页
     ·不同培养时间下E. coli BL21(DE3)在TB培养基中的OD600值第27-30页
     ·E. coli BL21(DE3)在TB培养基中的生长曲线第30页
     ·稀释平板计数结果第30-32页
第三章 低频超声波介导大肠杆菌转化方案的探索与建立第32-40页
   ·材料第32-33页
     ·菌株与质粒第32-33页
     ·Marker及试剂盒第33页
     ·主要化学试剂及培养基第33页
     ·主要仪器第33页
   ·实验方法第33-37页
     ·质粒pET-20b(+)的大量制备第33-35页
       ·制作E. coli DH5α 感受态第33-34页
       ·质粒pET-20b(+)转入E. coli DH5α 中第34页
       ·挑取单克隆扩大培养并进行质粒大提第34-35页
     ·超声时长对于大肠杆菌生长影响第35-37页
       ·利用低频超声波将质粒pET-20b(+)转入E. coli BL21(DE3)中第35-36页
       ·采用 0.8%的琼脂糖凝胶电泳验证转化结果第36-37页
   ·实验结果和讨论第37-40页
     ·不同超声时长下E. coli BL21(DE3)存活率第37-38页
     ·低频超声转化介导E. coli BL21(DE3)转化第38-40页
第四章 超声波介导大肠杆菌转化最适条件的探索第40-49页
   ·材料第40-41页
     ·菌株与质粒第40页
     ·Marker及试剂盒第40页
     ·主要化学试剂及培养基第40页
     ·主要仪器第40-41页
   ·实验方法第41-45页
     ·质粒抽提第41-42页
     ·超声波介导大肠杆菌转化最适条件的初步探索第42-45页
       ·最适质粒浓度测定第43页
       ·菌体密度对超声转化效率的影响第43-44页
       ·超声功率对转化效率的影响第44-45页
   ·结果与讨论第45-49页
     ·不同条件下质粒浓度对超声转化影响第45-47页
     ·OD600对超声转化的影响第47-48页
     ·功率对超声转化的影响第48-49页
第五章 结论与展望第49-51页
参考文献第51-58页
致谢第58页

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