摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-25页 |
·现代发酵工程 | 第11-15页 |
·微生物与发酵 | 第11-12页 |
·现代发酵工程特点 | 第12-13页 |
·现代发酵工程的操作步骤 | 第13页 |
·现代发酵工程的发酵方式 | 第13-14页 |
·现代发酵工艺存在的一些问题 | 第14-15页 |
·大肠杆菌在现代发酵工程中的应用与意义 | 第15-16页 |
·常见的大肠杆菌转化方法 | 第16-22页 |
·电转化法 | 第17-18页 |
·CaCl_2法 | 第18-19页 |
·TSS法 | 第19-20页 |
·甘油-聚乙二醇(Glycerin-PEG)法 | 第20-21页 |
·超声波法 | 第21-22页 |
·超声波介导的DNA转化技术研究现状 | 第22-23页 |
·超声波介导的大肠杆菌转化技术研究的内容与意义 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第24-25页 |
第二章 E. coli BL21(DE3)在TB培养基中生长曲线测定 | 第25-32页 |
·材料 | 第25-26页 |
·菌株 | 第25-26页 |
·培养基 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-27页 |
·生长曲线测定 | 第26-27页 |
·利用稀释平板计数法确定不同OD600值下的E. coli BL21(DE3)菌落密度 | 第27页 |
·实验结果与讨论 | 第27-32页 |
·不同培养时间下E. coli BL21(DE3)在TB培养基中的OD600值 | 第27-30页 |
·E. coli BL21(DE3)在TB培养基中的生长曲线 | 第30页 |
·稀释平板计数结果 | 第30-32页 |
第三章 低频超声波介导大肠杆菌转化方案的探索与建立 | 第32-40页 |
·材料 | 第32-33页 |
·菌株与质粒 | 第32-33页 |
·Marker及试剂盒 | 第33页 |
·主要化学试剂及培养基 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-37页 |
·质粒pET-20b(+)的大量制备 | 第33-35页 |
·制作E. coli DH5α 感受态 | 第33-34页 |
·质粒pET-20b(+)转入E. coli DH5α 中 | 第34页 |
·挑取单克隆扩大培养并进行质粒大提 | 第34-35页 |
·超声时长对于大肠杆菌生长影响 | 第35-37页 |
·利用低频超声波将质粒pET-20b(+)转入E. coli BL21(DE3)中 | 第35-36页 |
·采用 0.8%的琼脂糖凝胶电泳验证转化结果 | 第36-37页 |
·实验结果和讨论 | 第37-40页 |
·不同超声时长下E. coli BL21(DE3)存活率 | 第37-38页 |
·低频超声转化介导E. coli BL21(DE3)转化 | 第38-40页 |
第四章 超声波介导大肠杆菌转化最适条件的探索 | 第40-49页 |
·材料 | 第40-41页 |
·菌株与质粒 | 第40页 |
·Marker及试剂盒 | 第40页 |
·主要化学试剂及培养基 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-45页 |
·质粒抽提 | 第41-42页 |
·超声波介导大肠杆菌转化最适条件的初步探索 | 第42-45页 |
·最适质粒浓度测定 | 第43页 |
·菌体密度对超声转化效率的影响 | 第43-44页 |
·超声功率对转化效率的影响 | 第44-45页 |
·结果与讨论 | 第45-49页 |
·不同条件下质粒浓度对超声转化影响 | 第45-47页 |
·OD600对超声转化的影响 | 第47-48页 |
·功率对超声转化的影响 | 第48-49页 |
第五章 结论与展望 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58页 |