黄地老虎颗粒体病毒ORF55基因的功能研究
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-17页 |
| ·杆状病毒简介 | 第8页 |
| ·增效蛋白简介 | 第8页 |
| ·增效蛋白的发现及分布 | 第8-9页 |
| ·增效蛋白的发现 | 第8页 |
| ·增效蛋白的分布 | 第8-9页 |
| ·增效蛋白的特征 | 第9-12页 |
| ·分子特征 | 第9-12页 |
| ·增效蛋白基因是晚期表达基因 | 第9页 |
| ·增效蛋白的定位 | 第9-10页 |
| ·增效蛋白拥有保守的锌结合位点 | 第10-11页 |
| ·增效蛋白富含酸性氨基酸和可能的糖基化位点 | 第11页 |
| ·增效蛋白氨基酸水平同源性差异较大 | 第11-12页 |
| ·生化特征 | 第12页 |
| ·金属蛋白酶性质 | 第12页 |
| ·其他生化性质 | 第12页 |
| ·增效蛋白的作用机制 | 第12-13页 |
| ·介导学说 | 第13页 |
| ·酶解学说 | 第13页 |
| ·增效蛋白的应用研究 | 第13-15页 |
| ·GV 与NPV 的复配 | 第14页 |
| ·构建含增效蛋白基因的重组病毒 | 第14页 |
| ·增效蛋白应用于植物转基因 | 第14-15页 |
| ·增效蛋白工程菌株的构建 | 第15页 |
| ·增效蛋白的研究展望 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第18-20页 |
| ·菌株与载体 | 第18页 |
| ·酶和其它试剂 | 第18页 |
| ·主要溶液 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·棉铃虫人工饲料 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-25页 |
| ·病毒纯化及AsGV 基因组制备 | 第20-21页 |
| ·病毒纯化 | 第20页 |
| ·病毒DNA 的制备 | 第20-21页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·基因的克隆及序列分析 | 第21-22页 |
| ·目的基因扩增 | 第21-22页 |
| ·基因的克隆与测序 | 第22页 |
| ·序列分析 | 第22页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第22页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第22-23页 |
| ·蛋白诱导 | 第22-23页 |
| ·蛋白提取 | 第23页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第23页 |
| ·抗体的制备 | 第23-24页 |
| ·抗原准备 | 第23-24页 |
| ·动物免疫及抗体效价检测 | 第24页 |
| ·抗体特异性检测 | 第24页 |
| ·目的蛋白的Western blot | 第24-25页 |
| ·目的蛋白的功能鉴定 | 第25页 |
| ·蛋白处理液的制备 | 第25页 |
| ·生物测定 | 第25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-39页 |
| ·AsGV 基因组的制备 | 第25-26页 |
| ·序列分析 | 第26-28页 |
| ·目的基因的扩增 | 第28-29页 |
| ·基因表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·表达载体的构建策略 | 第29-30页 |
| ·表达载体的验证 | 第30-31页 |
| ·N-1020 蛋白的表达及优化 | 第31-32页 |
| ·N-1020 蛋白的表达 | 第31页 |
| ·表达条件的优化 | 第31-32页 |
| ·抗体的制备和检测 | 第32-34页 |
| ·抗原制备和抗体特异性鉴定 | 第32-33页 |
| ·抗体的效价检测 | 第33-34页 |
| ·全蛋白的表达及Western blot 鉴定 | 第34-35页 |
| ·N-2679 蛋白的表达及纯化 | 第35页 |
| ·生物测定结果分析 | 第35-39页 |
| ·全蛋白生物测定结果 | 第35-36页 |
| ·N-1020 蛋白生物测定结果 | 第36-37页 |
| ·N-2679 蛋白生物测定结果 | 第37-39页 |
| 5 结论与讨论 | 第39-41页 |
| ·结论 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·AsGV ORF55 的编码产物的增效作用 | 第39-40页 |
| ·AsGV ORF55 编码产物的作用机制 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 英文摘要 | 第46-47页 |
