| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1. 文献综述 | 第9-18页 |
| ·抗虫基因种类 | 第9-14页 |
| ·微生物来源的抗虫基因 | 第9-11页 |
| ·Bt 基因 | 第9-10页 |
| ·增效蛋白 | 第10-11页 |
| ·动物来源的抗虫基因 | 第11页 |
| ·植物来源的抗虫基因 | 第11-14页 |
| ·蛋白酶抑制剂类抗虫基因 | 第11-12页 |
| ·淀粉酶抑制剂 | 第12页 |
| ·植物凝集素 | 第12-14页 |
| ·核糖体失活蛋白 | 第14页 |
| ·蓖麻毒素（Ricin Toxin RT）的研究概况 | 第14-18页 |
| ·蓖麻毒素的研究历史 | 第14-15页 |
| ·蓖麻毒素的结构 | 第15-16页 |
| ·蓖麻毒素的毒性和作用机制 | 第16页 |
| ·蓖麻毒素与生物杀虫剂 | 第16-18页 |
| 2. 引言 | 第18-19页 |
| 3. 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-31页 |
| ·蓖麻总基因组的提取 | 第20页 |
| ·RT 和RTB 的分子克隆 | 第20-24页 |
| ·基因特异引物序列的设计 | 第20页 |
| ·目的基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·切胶回收目的基因片段 | 第21-22页 |
| ·回收的目的基因片段与PMD-19 T Vector 的连接 | 第22页 |
| ·连接产物对大肠杆菌的转化 | 第22页 |
| ·碱裂解法提取重组质粒 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的单双酶切验证 | 第23-24页 |
| ·RT 和RTB 的原核表达及蛋白纯化 | 第24-27页 |
| ·PET-28a 质粒的获得 | 第24页 |
| ·PET-28a 质粒双酶切 | 第24页 |
| ·RT-19T 和RTB-19T 的双酶切 | 第24-25页 |
| ·目的基因插入PET-28a 质粒中 | 第25页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE 检测表达产物 | 第25-26页 |
| ·目的基因的Western Blot | 第26-27页 |
| ·目的基因的纯化 | 第27页 |
| ·植物表达载体P-En 的构建 | 第27-31页 |
| ·En 基因引物的设计 | 第27-28页 |
| ·En 基因的PCR | 第28页 |
| ·回收目的基因En 片段 | 第28页 |
| ·回收的En 片段与pGEM-T 的连接 | 第28页 |
| ·连接产物对大肠杆菌的转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的PCR 验证 | 第29页 |
| ·重组质粒的双酶切验证 | 第29页 |
| ·植物表达载体P-En 的构建 | 第29-31页 |
| 4. 结果与分析 | 第31-39页 |
| ·RT 和RTB 基因的扩增 | 第31页 |
| ·RT 和RTB 基因克隆载体的构建 | 第31-32页 |
| ·RT 和RTB 基因原核表达载体的构建 | 第32页 |
| ·目的蛋白的诱导表达结果及分析 | 第32-33页 |
| ·RT 基因的原核表达 | 第32-33页 |
| ·RTB 的原核表达 | 第33页 |
| ·目的蛋白的Western Blot | 第33-35页 |
| ·RT 蛋白的Western Blot | 第33页 |
| ·RTB 的Western Blot | 第33-35页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·RT 蛋白的纯化 | 第35页 |
| ·RTB 蛋白的纯化 | 第35页 |
| ·RTB 的复性、浓缩 | 第35-36页 |
| ·植物表达载体P-En 的构建 | 第36-39页 |
| ·En 的扩增 | 第36-37页 |
| ·En 克隆载体的构建 | 第37页 |
| ·En 基因植物表达载体的构建 | 第37-39页 |
| 5. 结论和讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 英文摘要 | 第47-48页 |