| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-15页 |
| 主要缩略词和符号表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-28页 |
| 1 有机磷农药的研究背景 | 第16-23页 |
| ·有机磷的危害 | 第16页 |
| ·有机磷简介 | 第16页 |
| ·有机磷毒性机理 | 第16页 |
| ·有机磷(OPs)的降解 | 第16-18页 |
| ·微生物对有机磷的修复 | 第16-17页 |
| ·筛选的有机磷降解微生物 | 第17-18页 |
| ·有机磷水解酶的分类 | 第18-21页 |
| ·有机磷水解酶(OPH)和有机磷降解酶(OPDA) | 第18-19页 |
| ·甲基对硫磷水解酶(MPH) | 第19-21页 |
| ·有机磷酸脱水酶(OPAA) | 第21页 |
| ·有机磷水解酶基因 | 第21-22页 |
| ·有机磷水解酶基因的组成 | 第22-23页 |
| 2 基因克隆的技术 | 第23-25页 |
| ·PCR技术 | 第23页 |
| ·基因组文库技术 | 第23-24页 |
| ·蛋白质技术 | 第24-25页 |
| 3 红球菌的研究进展 | 第25-28页 |
| ·红球菌的特性 | 第25-26页 |
| ·红球菌质粒载体的研究进展 | 第26页 |
| ·红球菌转化研究 | 第26-28页 |
| 第二章 引言 | 第28-30页 |
| 第三章 毒死蜱高效降解菌的分离与鉴定 | 第30-48页 |
| 1 材料和方法 | 第31-34页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·污泥样品的采集 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·化学试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器与设备 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·毒死蜱降解菌的分离 | 第32页 |
| ·降解菌的革兰氏染色 | 第32页 |
| ·降解菌株生理生化特性的研究 | 第32页 |
| ·温度和pH对菌株降解毒死蜱的影响 | 第32-33页 |
| ·毒死蜱的回收与检测 | 第33页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·16S rDNA基因的扩增 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-44页 |
| ·毒死蜱降解菌的分离纯化 | 第35页 |
| ·降解菌株革兰氏染色结果 | 第35-36页 |
| ·降解菌的生理生化特性 | 第36页 |
| ·毒死蜱和TCP衍生物浓度标准曲线的绘制 | 第36-37页 |
| ·菌株X1和G1在不同条件下对毒死蜱的降解 | 第37-41页 |
| ·提取的细菌基因组DNA及16S rDNA的扩增 | 第41-42页 |
| ·降解菌的16S rDNA进化树 | 第42-44页 |
| 3 讨论 | 第44-48页 |
| 第四章 台湾嗜铜菌X1毒死蜱降解酶基因的克隆 | 第48-62页 |
| 1 材料与方法 | 第48-54页 |
| ·材料 | 第48-50页 |
| ·质粒和菌株 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48-49页 |
| ·化学试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器与设备 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·菌株X1基因组DNA的提取 | 第50页 |
| ·基因组的随机酶切 | 第50页 |
| ·DNA片段回收 | 第50-51页 |
| ·DNA回收片段与载体连接转化 | 第51页 |
| ·挑取阳性克隆 | 第51页 |
| ·oph基因的克隆 | 第51-52页 |
| ·oph基因表达质粒的构建 | 第52-53页 |
| ·基因的诱导表达 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-60页 |
| ·基因组文库的构建 | 第54-56页 |
| ·提取的基因组DNA | 第54页 |
| ·基因组DNA随机酶切片段的回收 | 第54-55页 |
| ·基因组文库的构建 | 第55-56页 |
| ·oph基因在大肠杆菌中表达 | 第56-60页 |
| ·oph基因的克隆 | 第56-57页 |
| ·重组表达质粒的提取 | 第57页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第57-58页 |
| ·毒死蜱水解酶基因表达活性的检测 | 第58-59页 |
| ·表达的蛋白酶活性的检测 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 嗜酸寡养单胞菌G1毒死蜱降解酶基因的克隆 | 第62-75页 |
| 1 材料与方法 | 第62-68页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·质粒和菌株 | 第62页 |
| ·培养基 | 第62-63页 |
| ·化学试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器与设备 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-68页 |
| ·毒死蜱水解酶基因的克隆 | 第63-65页 |
| ·毒死蜱降解酶基因的原核表达 | 第65-67页 |
| ·mpd基因的诱导表达 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-73页 |
| ·基因组文库的构建 | 第68-70页 |
| ·提取菌株G1的基因组DNA | 第68页 |
| ·基因组DNA随机酶切片段的回收 | 第68-69页 |
| ·基因组文库的构建 | 第69-70页 |
| ·mpd基因在大肠杆菌中表达 | 第70-73页 |
| ·mpd基因的克隆 | 第70-71页 |
| ·mpd基因基因重组质粒的提取 | 第71页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE检测毒死蜱水解酶基因表达 | 第72页 |
| ·表达的蛋白酶活性的检测 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| 第六章 降解毒死蜱的玫瑰红红球菌基因工程菌的构建 | 第75-89页 |
| 1. 材料与方法 | 第75-81页 |
| ·材料 | 第75-77页 |
| ·质粒和菌株 | 第76页 |
| ·培养基 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76页 |
| ·仪器设备 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-81页 |
| ·穿梭载体的构建 | 第77-78页 |
| ·玫瑰红红球菌表达载体的构建 | 第78-80页 |
| ·玫瑰红红球菌感受态细胞的制备 | 第80页 |
| ·优化玫瑰红红球菌的电转化条件 | 第80-81页 |
| ·重组红球菌对毒死蜱降解 | 第81页 |
| ·mpd基因在玫瑰红红球菌中表达活性的检测 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-88页 |
| ·质粒pBSTG的构建 | 第81-83页 |
| ·玫瑰红红球菌生长曲线的绘制 | 第83-84页 |
| ·玫瑰红红球菌电转化参数的优化 | 第84-85页 |
| ·质粒转化玫瑰红红球菌 | 第85-86页 |
| ·重组玫瑰红红球菌对毒死蜱的降解 | 第86-87页 |
| ·抗生素浓度对重组玫瑰红红球菌毒死蜱催化活性的影响 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-89页 |
| 第七章 总结与讨论 | 第89-91页 |
| 第八章 创新点 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 个人简介 | 第109页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第109页 |