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拟南芥抗病突变体cpr30的蛋白质组学研究及抗病机制初探

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
缩略语表第10-12页
第一章 引言第12-31页
   ·植物抗病机制研究进展第12-19页
     ·植物对病原菌的防御反应概述第12-13页
     ·植物抗病通路的关键基因第13-17页
     ·植物抗病途径中的信号分子第17-19页
   ·植物F-BOX蛋白的研究进展第19-24页
     ·F-BOX蛋白的结构第19-20页
     ·F-BOX蛋白的作用方式第20-22页
     ·F-BOX蛋白在植物中的功能第22-24页
   ·植物蛋白质组学研究进展第24-28页
     ·蛋白质组学概述第24-25页
     ·蛋白质组学研究方法第25-26页
     ·蛋白质组学在植物抗病机制研究中的应用第26-28页
   ·拟南芥CPR30基因的研究现状第28-30页
     ·突变体cpr30的表型概述第28-29页
     ·CPR30的基因结构及定位第29页
     ·CPR30的作用机制概述第29-30页
   ·本研究的目的和意义第30-31页
第二章 材料与方法第31-43页
   ·实验材料第31页
     ·植物材料第31页
     ·引物第31页
     ·菌株及载体第31页
   ·主要试剂第31-32页
   ·主要培养基与溶液配制第32-34页
     ·主要培养基配制第32-33页
     ·主要溶液配制第33-34页
   ·主要仪器第34页
   ·实验方法第34-43页
     ·拟南芥培养方法第34页
     ·双向电泳第34-35页
     ·质谱鉴定第35-36页
     ·拟南芥RNA提取第36-37页
     ·反转录第37页
     ·Real-time PCR第37-38页
     ·Western blot第38页
     ·基因扩增第38页
     ·扩增基因片段的电泳检测及回收第38-39页
     ·基因片段与载体连接第39页
     ·将连接产物转化大肠杆菌DH5α第39页
     ·质粒提取第39-40页
     ·酵母双杂交载体构建第40页
     ·酵母双杂交第40-41页
     ·酵母菌落的X-gal染色第41页
     ·拟南芥基因组DNA的提取第41页
     ·T-DNA插入突变体的PCR鉴定第41页
     ·双突变体构建第41-42页
     ·台盼蓝染色第42页
     ·接病处理第42-43页
第三章 实验结果与分析第43-67页
   ·拟南芥抗病突变体cpr30的蛋白质组学研究第43-52页
     ·双向电泳图谱分析第43-46页
     ·蛋白差异点的鉴定第46-48页
     ·差异蛋白质谱的分类及功能分析第48-50页
     ·部分差异蛋白的转录水平分析第50-51页
     ·双向电泳结果的Western blot验证第51-52页
   ·双突变体pad4 cpr30的蛋白质组学研究第52-58页
     ·pad4 cpr30双突变体的双向电泳图谱分析第52-54页
     ·pad4 cpr30双突变体中差异蛋白的质谱鉴定第54-57页
     ·pad4 cpr30双突变体中部分差异蛋白的转录水平分析第57-58页
     ·双向电泳结果的Western blot验证第58页
   ·CPR30的互作蛋白研究第58-67页
     ·CPR30互作蛋白筛选第58-60页
     ·双突变体构建第60-63页
     ·双突变体表型观察第63-64页
     ·台盼蓝染色结果及分析第64-65页
     ·sgt1a cpr30和sgt1b cpr30双突变体接病结果及分析第65-67页
第四章 讨论与展望第67-74页
   ·拟南芥抗病突变体cpr30的蛋白质组学研究第67-71页
     ·cpr30中差异蛋白的功能分类第67-70页
     ·cpr30中的抗病途径相关蛋白第70-71页
     ·未折叠蛋白反应参与了CPR30调控的防御反应第71页
   ·双突变体pad4 cpr30的蛋白质组学研究第71-72页
   ·SGT1a,SGT1b参与CPR30介导的抗病途径第72-73页
   ·展望第73-74页
第五章 结论第74-75页
   ·cpr30突变体的蛋白质组学研究结果第74页
   ·pad4 cpr30双突变体的蛋白质组学研究结果第74页
   ·CPR30互作蛋白的筛选第74页
   ·SGT1a,SGT1b参与CPR30介导的抗病途径第74-75页
参考文献第75-86页
致谢第86-87页
附录第87-90页
 附表1 突变体鉴定引物第87-88页
 附表2 Real-time PCR引物第88-89页
 附表3 酵母双杂交各基因扩增引物第89-90页
作者简介第90页

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