| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-32页 |
| ·病毒与宿主细胞相互作用 | 第14页 |
| ·细小病毒科简介 | 第14-23页 |
| ·水貂肠炎病毒概述 | 第16页 |
| ·水貂肠炎病毒病原学 | 第16页 |
| ·水貂肠炎病毒分子生物学特性 | 第16-18页 |
| ·水貂肠炎病毒复制机制 | 第18-19页 |
| ·水貂肠炎病毒编码蛋白 | 第19-21页 |
| ·水貂肠炎病毒宿主特异性受体 | 第21-22页 |
| ·水貂肠炎病的防治 | 第22-23页 |
| ·动物microRNA(miRNA)简介 | 第23-30页 |
| ·动物miRNA基因组特点 | 第23-24页 |
| ·动物miRNA的发生机制 | 第24-26页 |
| ·动物miRNA的作用机制 | 第26-27页 |
| ·动物miRNA的功能 | 第27页 |
| ·动物miRNA的研究方法 | 第27-30页 |
| ·动物miRNA与病毒相互作用 | 第30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 材料和方法 | 第32-53页 |
| ·材料 | 第32-38页 |
| ·病毒及细胞 | 第32页 |
| ·质粒和菌株 | 第32页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第32-34页 |
| ·主要试剂配制 | 第34-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-53页 |
| ·F81细胞培养 | 第38-39页 |
| ·MEV培养 | 第39页 |
| ·F81细胞总DNA提取 | 第39页 |
| ·F81细胞总RNA提取 | 第39页 |
| ·F81细胞小RNA库的构建 | 第39-40页 |
| ·基因克隆及载体构建 | 第40-47页 |
| ·转染 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
| ·Western blot | 第49-51页 |
| ·相对双荧光素酶活性测定 | 第51页 |
| ·MEV间接免疫荧光 | 第51页 |
| ·流式细胞术检测 | 第51-52页 |
| ·Ago2蛋白免疫共沉淀 | 第52页 |
| ·MEV病毒滴度(TCID_(50))测定 | 第52页 |
| ·数据统计学分析 | 第52-53页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第53-90页 |
| ·F81细胞感染MEV前后miRNA表达谱分析 | 第53-63页 |
| ·与已知miRNA同源的F81细胞miRNA的分析 | 第55-58页 |
| ·F81细胞新miRNA的预测分析 | 第58页 |
| ·F81细胞miRNA靶标预测 | 第58-60页 |
| ·F81细胞感染MEV前后miRNA表达差异分析 | 第60-62页 |
| ·未发现MEV编码的miRNA | 第62页 |
| ·小结与讨论 | 第62-63页 |
| ·MiR-181b通过下调NS1蛋白表达抑制MEV增殖 | 第63-80页 |
| ·靶向MEV mRNA的miRNA筛选 | 第63-65页 |
| ·MiR-181b mimics和miR-181b inhibitors的功能验证 | 第65-66页 |
| ·F81细胞的miR-181b抑制MEV增殖 | 第66-68页 |
| ·MiR-181b直接靶向MEVNS1 mRNA的编码区 | 第68-70页 |
| ·MiR-181b通过靶向NS1 mRNA编码区导致NS1蛋白的翻译抑制 | 第70-72页 |
| ·MiR-181b通过靶向NS1抑制病毒复制 | 第72-74页 |
| ·MiR-181b能够在RISC中与MEVNS1 mRNA相互结合 | 第74-75页 |
| ·MiR-181c和miR-181d对MEV增殖的影响 | 第75-77页 |
| ·MEV感染导致F81细胞miR-181b表达量下调 | 第77页 |
| ·小结与讨论 | 第77-80页 |
| ·MiR-320a和miR-140通过下调MEV受体TfR表达控制MEV感染 | 第80-90页 |
| ·MiR-320a和miR-140抑制MEV受体TfR的表达 | 第80-82页 |
| ·MEV感染导致miR-320a和miR-140上调,同时导致TfR下调 | 第82-83页 |
| ·MiR-320a和miR-140靶向TfR mRNA 3'UTR并且在RISC中结合TfR mRNA | 第83-85页 |
| ·MiR-320a和miR-140通过阻止病毒进入宿主细胞而控制MEV感染 | 第85-86页 |
| ·MiR-320a和miR-140对TfR表达及MEV感染产生协同抑制效应 | 第86-88页 |
| ·小结与讨论 | 第88-90页 |
| 第四章 结论与展望 | 第90-91页 |
| ·结论 | 第90页 |
| ·展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 附录 | 第107-126页 |
| 作者简历 | 第126-127页 |
