摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
·前言 | 第10页 |
·纤维素的生物合成 | 第10-11页 |
·纤维素的种类 | 第10页 |
·纤维素的生物合成 | 第10-11页 |
·细菌纤维素的合成 | 第11页 |
·植物纤维素的合成 | 第11页 |
·纤维素合酶 | 第11-13页 |
·催化纤维素生物合成的纤维素合酶复合体 | 第11-12页 |
·纤维素合酶的发现及结构特点 | 第12-13页 |
·纤维素合酶基因 | 第13-16页 |
·纤维素合酶基因的鉴定 | 第13-14页 |
·高等植物中 CesA 基因功能分析 | 第14-15页 |
·植物体内 CesA 基因的由来 | 第15页 |
·纤维素合酶超家族 | 第15-16页 |
·采用杨树进行纤维素生物合成研究的重要意义 | 第16-18页 |
·杨树——林木基因组学研究的模式物种 | 第16-17页 |
·良好的纸浆原料 | 第17-18页 |
·重要的生物能源 | 第18页 |
·当前杨树纤维素合酶基因研究水平 | 第18-19页 |
·杨树中 CesA 基因的鉴定 | 第18-19页 |
·杨树中 CesA 基因的表达分析 | 第19页 |
·本论文的研究目的 | 第19-20页 |
·拟采取的实验试验方法和路线 | 第20-21页 |
第二章 杨树基因组 DNA 的提取及 CesA 基因扩增引物的筛选 | 第21-28页 |
·材料和试剂 | 第21-22页 |
·材料 | 第21页 |
·试剂 | 第21页 |
·试剂的配制 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-25页 |
·杨树基因组 DNA 提取 | 第22-23页 |
·2×CTAB 法提取 107 杨基因组 DNA | 第22-23页 |
·简化的 SDS 法提取 107 杨基因组 DNA | 第23页 |
·0.8%琼脂糖凝胶电泳检测基因组 DNA 质量 | 第23页 |
·引物的设计 | 第23-24页 |
·CesA 基因扩增条件的优化 | 第24-25页 |
·结果分析 | 第25-27页 |
·不同方法提取杨树基因组 DNA 的比较、分析 | 第25页 |
·CesA 基因扩增条件的优化 | 第25-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第三章 杨树次生木质部总 RNA 的提取及 RT-PCR 扩增 | 第28-35页 |
·材料、试剂与仪器 | 第28-29页 |
·材料 | 第28页 |
·试剂 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28-29页 |
·实验方法与步骤 | 第29-32页 |
·107 杨次生木质部总 RNA 的提取 | 第29页 |
·材料的处理 | 第29页 |
·杨树次生木质部总 RNA 的提取 | 第29页 |
·目的基因的 RT-PCR 扩增 | 第29-31页 |
·目的片段的回收 | 第31-32页 |
·1%琼脂糖凝胶电泳检测回收效果 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-34页 |
·107 杨次生木质部总 RNA 的提取结果 | 第32页 |
·RT-PCR 扩增结果分析 | 第32-33页 |
·回收片段检测 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第四章 杨树次生木质部 CesA 基因片段的克隆、鉴定 | 第35-45页 |
·实验材料、试剂与仪器 | 第35-36页 |
·菌株和载体 | 第35页 |
·试剂 | 第35页 |
·主要仪器 | 第35-36页 |
·试验方法 | 第36-39页 |
·目的片段与 pMD20-T 载体的连接 | 第36页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第36页 |
·重组质粒的转化 | 第36-37页 |
·重组子的菌落 PCR 鉴定 | 第37页 |
·重组质粒的小量提取与纯化 | 第37-38页 |
·重组质粒的 PCR 扩增鉴定 | 第38-39页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第39页 |
·重组质粒的测序分析与鉴定 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-44页 |
·重组质粒的蓝白斑鉴定 | 第39-40页 |
·菌落 PCR 鉴定结果 | 第40-41页 |
·质粒提取检测结果 | 第41页 |
·重组质粒的 PCR 扩增鉴定 | 第41-42页 |
·重组质粒双酶切鉴定结果 | 第42-43页 |
·重组质粒的测序鉴定 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
第五章 CesA 基因片段的序列分析鉴定及拟表达蛋白的结构预测 | 第45-56页 |
·序列分析及蛋白结构预测 | 第45-55页 |
·DNA 序列分析 | 第45-47页 |
·氨基酸序列分析 | 第47-48页 |
·遗传进化分析 | 第48-50页 |
·二级结构预测 | 第50-52页 |
·结构域、跨膜区分析 | 第52-53页 |
·三级结构预测 | 第53-55页 |
·结果与讨论 | 第55-56页 |
·克隆片段的序列分析 | 第55页 |
·结构预测 | 第55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
第六章 结果与展望 | 第56-58页 |
·实验结果 | 第56-57页 |
·问题与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |