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植物纤维素合酶基因片段的克隆、鉴定及序列分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-21页
   ·前言第10页
   ·纤维素的生物合成第10-11页
     ·纤维素的种类第10页
     ·纤维素的生物合成第10-11页
       ·细菌纤维素的合成第11页
       ·植物纤维素的合成第11页
   ·纤维素合酶第11-13页
     ·催化纤维素生物合成的纤维素合酶复合体第11-12页
     ·纤维素合酶的发现及结构特点第12-13页
   ·纤维素合酶基因第13-16页
     ·纤维素合酶基因的鉴定第13-14页
     ·高等植物中 CesA 基因功能分析第14-15页
     ·植物体内 CesA 基因的由来第15页
     ·纤维素合酶超家族第15-16页
   ·采用杨树进行纤维素生物合成研究的重要意义第16-18页
     ·杨树——林木基因组学研究的模式物种第16-17页
     ·良好的纸浆原料第17-18页
     ·重要的生物能源第18页
   ·当前杨树纤维素合酶基因研究水平第18-19页
     ·杨树中 CesA 基因的鉴定第18-19页
     ·杨树中 CesA 基因的表达分析第19页
   ·本论文的研究目的第19-20页
   ·拟采取的实验试验方法和路线第20-21页
第二章 杨树基因组 DNA 的提取及 CesA 基因扩增引物的筛选第21-28页
   ·材料和试剂第21-22页
     ·材料第21页
     ·试剂第21页
     ·试剂的配制第21-22页
     ·主要仪器第22页
   ·实验方法第22-25页
     ·杨树基因组 DNA 提取第22-23页
       ·2×CTAB 法提取 107 杨基因组 DNA第22-23页
       ·简化的 SDS 法提取 107 杨基因组 DNA第23页
     ·0.8%琼脂糖凝胶电泳检测基因组 DNA 质量第23页
     ·引物的设计第23-24页
     ·CesA 基因扩增条件的优化第24-25页
   ·结果分析第25-27页
     ·不同方法提取杨树基因组 DNA 的比较、分析第25页
     ·CesA 基因扩增条件的优化第25-27页
   ·讨论第27-28页
第三章 杨树次生木质部总 RNA 的提取及 RT-PCR 扩增第28-35页
   ·材料、试剂与仪器第28-29页
     ·材料第28页
     ·试剂第28页
     ·主要仪器第28-29页
   ·实验方法与步骤第29-32页
     ·107 杨次生木质部总 RNA 的提取第29页
       ·材料的处理第29页
       ·杨树次生木质部总 RNA 的提取第29页
     ·目的基因的 RT-PCR 扩增第29-31页
     ·目的片段的回收第31-32页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳检测回收效果第32页
   ·结果与分析第32-34页
     ·107 杨次生木质部总 RNA 的提取结果第32页
     ·RT-PCR 扩增结果分析第32-33页
     ·回收片段检测第33-34页
   ·讨论第34-35页
第四章 杨树次生木质部 CesA 基因片段的克隆、鉴定第35-45页
   ·实验材料、试剂与仪器第35-36页
     ·菌株和载体第35页
     ·试剂第35页
     ·主要仪器第35-36页
   ·试验方法第36-39页
     ·目的片段与 pMD20-T 载体的连接第36页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)第36页
     ·重组质粒的转化第36-37页
     ·重组子的菌落 PCR 鉴定第37页
     ·重组质粒的小量提取与纯化第37-38页
     ·重组质粒的 PCR 扩增鉴定第38-39页
     ·重组质粒的双酶切鉴定第39页
     ·重组质粒的测序分析与鉴定第39页
   ·结果与分析第39-44页
     ·重组质粒的蓝白斑鉴定第39-40页
     ·菌落 PCR 鉴定结果第40-41页
     ·质粒提取检测结果第41页
     ·重组质粒的 PCR 扩增鉴定第41-42页
     ·重组质粒双酶切鉴定结果第42-43页
     ·重组质粒的测序鉴定第43-44页
   ·讨论第44-45页
第五章 CesA 基因片段的序列分析鉴定及拟表达蛋白的结构预测第45-56页
   ·序列分析及蛋白结构预测第45-55页
     ·DNA 序列分析第45-47页
     ·氨基酸序列分析第47-48页
     ·遗传进化分析第48-50页
     ·二级结构预测第50-52页
     ·结构域、跨膜区分析第52-53页
     ·三级结构预测第53-55页
   ·结果与讨论第55-56页
     ·克隆片段的序列分析第55页
     ·结构预测第55页
     ·讨论第55-56页
第六章 结果与展望第56-58页
   ·实验结果第56-57页
   ·问题与展望第57-58页
参考文献第58-63页
致谢第63页

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