首页--生物科学论文--植物学论文--植物细胞遗传学论文--植物基因工程论文

甘蔗铜/锌超氧化物歧化酶基因的克隆和功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 前言第12-20页
   ·研究背景第12页
   ·活性氧第12-14页
     ·活性氧的产生途径第12-13页
     ·活性氧的作用第13-14页
   ·活性氧的清除途径第14-17页
     ·非酶促清除系统第14页
     ·酶促清除系统第14-17页
   ·SOD基因研究进展第17-18页
   ·本研究的目的第18-19页
   ·技术路线第19-20页
2 Cu/Zn-SOD基因的克隆及序列分析第20-32页
   ·材料第20页
     ·植物材料第20页
     ·菌种及载体第20页
     ·试剂第20页
     ·培养基第20页
     ·仪器设备第20页
   ·实验方法第20-25页
     ·甘蔗叶片总RNA的提取第20-21页
     ·总RNA质量的检测第21页
     ·cDNA第一链的合成第21-22页
     ·引物设计和PCR扩增第22页
     ·目的片段的回收纯化第22-23页
     ·DH5α感受态细胞的制作第23-24页
     ·目的片段的连接,转化及阳性克隆鉴定第24页
     ·生物信息学分析第24-25页
   ·结果分析第25-31页
     ·总RNA质量及cDNA的检测第25-26页
     ·Cu/Zn-SOD目的基因的扩增第26-27页
     ·Cu/Zn-SOD基因生物信息学分析第27-31页
   ·小结第31-32页
3 Cu/Zn-SOD的基因表达量的分析第32-37页
   ·材料第32页
     ·植物材料及处理第32页
     ·实验试剂第32页
     ·仪器设备第32页
   ·实验方法第32-33页
     ·RNA的提取及检测第32页
     ·cDNA的合成第32-33页
     ·荧光定量PCR引物的设计第33页
     ·荧光定量PCR第33页
   ·结果分析第33-36页
     ·RNA和cDNA质量的检测第33-34页
     ·Cu/Zn-SOD的组织表达差异第34页
     ·Cu/Zn-SOD在逆境胁迫下的表达模式第34-36页
   ·小结第36-37页
4 Cu/Zn-SOD在大肠杆菌的表达第37-47页
   ·实验材料第37页
     ·菌种及载体第37页
     ·试剂第37页
     ·仪器设备第37页
   ·实验方法第37-42页
     ·引物的设计第37页
     ·PCR扩增及目的片段的回收第37-38页
     ·pET30a质粒的提取第38-39页
     ·双酶切第39页
     ·目的片段与载体的连接及转化DH5α和阳性克隆的筛选第39-40页
     ·重组质粒的提取及验证第40页
     ·BL21感受态细胞的制作第40页
     ·重组质粒转化感受态细胞BL21及阳性克隆的筛选第40页
     ·IPTG诱导目的蛋白的表达第40-41页
     ·SDS-PAGE电泳第41-42页
   ·结果分析第42-46页
     ·原核表达载体的构建及验证第42-45页
     ·SDS-PAGE分析第45-46页
   ·小结第46-47页
5 Cu/Zn-SOD基因转化烟草的研究第47-59页
   ·材料第47-48页
     ·植物材料第47页
     ·菌种及载体第47页
     ·试剂第47页
     ·培养基第47-48页
   ·方法第48-52页
     ·植物表达载体引物的设计第48页
     ·Cu/Zn-SOD基因ORF的扩增及回收第48页
     ·pBI121质粒的提取第48页
     ·双酶切及目的片段的回收第48-49页
     ·目的片段与载体的连接及转化DH5α和阳性克隆的筛选第49页
     ·重组质粒的提取及酶切验证第49页
     ·EHA105感受的制作第49页
     ·重组质粒转化EHA105感受态细胞及阳性克隆的筛选第49-50页
     ·烟草无菌苗的获得及农杆菌介导叶盘法转化烟草第50-51页
     ·转基因烟草DNA的提取第51页
     ·转基因烟草的PCR检测第51页
     ·转基因烟草表型的观察第51-52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·真核表达载体的构建及验证第52-54页
     ·转基因烟草的获得第54-55页
     ·转基因烟草的检测第55-57页
     ·转基因烟草表型的观察第57-58页
   ·小结第58-59页
6 全文讨论及结论第59-64页
   ·全文讨论第59-62页
     ·Cu/Zn-SOD基因的克隆和序列分析第59页
     ·Cu/Zn-SOD基因的表达分析第59-61页
     ·Cu/Zn-SOD基因的原核表达第61页
     ·Cu/Zn-SOD基因转化烟草第61-62页
   ·全文结论第62-64页
7 展望第64-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-72页
附录第72-74页

论文共74页,点击 下载论文
上一篇:广西眼镜蛇CT和PLA2基因的真核表达和镇痛活性检测
下一篇:右旋糖酐酶的纯化与表征