| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 眼镜蛇神经毒素 | 第10-13页 |
| ·眼镜蛇神经毒素的种类 | 第10页 |
| ·眼镜蛇神经毒素的结构 | 第10-11页 |
| ·眼镜蛇神经毒素的作用 | 第11-12页 |
| ·眼镜蛇神经毒素分离纯化概述 | 第12-13页 |
| 2 眼镜蛇蛇毒蛋白 | 第13页 |
| ·眼镜蛇毒蛋白的发现 | 第13页 |
| ·眼镜蛇毒蛋白的结构 | 第13页 |
| ·眼镜蛇毒蛋白的功能 | 第13页 |
| 3 凝脂酶A_2 | 第13-15页 |
| ·蛇毒凝脂酶A_2的作用原理和结构 | 第14页 |
| ·蛇毒凝脂酶A_2的作用 | 第14-15页 |
| 4 广西眼镜蛇概述 | 第15页 |
| 5 昆虫杆状病毒表达载体研究进展 | 第15-19页 |
| ·昆虫杆状病毒转移载体和原理 | 第16-19页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统的优越性 | 第19页 |
| 6 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 广西眼镜蛇CT和PLA_2基因的克隆和序列分析 | 第20-42页 |
| 1 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-39页 |
| ·广西眼镜蛇血液的DNA提取 | 第33页 |
| ·广西眼镜蛇毒腺RNA提取 | 第33页 |
| ·广西眼镜蛇毒腺cDNA的内参基因(GAPDH)PCR检测 | 第33页 |
| ·CT目的基因成熟肽序列的获得 | 第33-34页 |
| ·PLA_2目的基因成熟肽序列的获得 | 第34-35页 |
| ·两种基因四种pMD质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| ·测序结果 | 第36-38页 |
| ·同源性分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论与小结 | 第39-42页 |
| ·神经毒素基因来源的选择 | 第39页 |
| ·成熟肽序列克隆方法的比较 | 第39-40页 |
| ·神经毒素的保守性 | 第40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第三章 CT和PLA_2昆虫表达载体的构建和体外表达 | 第42-68页 |
| 1 材料与方法 | 第42-57页 |
| ·材料 | 第42-46页 |
| ·实验方法 | 第46-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-64页 |
| ·单基因真核穿梭载体构建 | 第57页 |
| ·双基因共表达真核穿梭载体构建 | 第57-58页 |
| ·重组Bacmid的筛选与鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组BacMid质粒提取 | 第59页 |
| ·质粒浓度测定 | 第59-60页 |
| ·Sf9细胞的培养 | 第60页 |
| ·细胞病变情况观察 | 第60-61页 |
| ·重组杆状病毒的DNA鉴定 | 第61-62页 |
| ·目的蛋白表达的位置检测 | 第62-64页 |
| 3 讨论与小结 | 第64-68页 |
| ·转座过程中筛选效率 | 第64页 |
| ·昆虫Sf9细胞培养 | 第64页 |
| ·Sf9细胞的转染效率分析 | 第64-65页 |
| ·眼镜蛇CT蛋白的分子大小分析 | 第65页 |
| ·目的蛋白的表达量分析 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-68页 |
| 第四章 CT和PLA_2蛋白的纯化和镇痛活性的检测 | 第68-78页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| ·材料 | 第68-70页 |
| ·实验方法 | 第70-73页 |
| 2 结果和分析 | 第73-76页 |
| ·纯化蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第73-74页 |
| ·蛋白定量 | 第74-75页 |
| ·各组的扭体次数 | 第75-76页 |
| 3 讨论和小结 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第76页 |
| ·小结 | 第76-78页 |
| 第五章 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第86页 |
