| 摘要 | 第1-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-21页 |
| ·木聚糖酶的分类与应用 | 第8-12页 |
| ·木聚糖酶在饲料工业中的应用 | 第9-10页 |
| ·木聚糖酶在造纸产业中的应用 | 第10页 |
| ·木聚糖酶在食品工业中的应用 | 第10-11页 |
| ·木聚糖酶在能源方面及其他方面的应用 | 第11-12页 |
| ·木聚糖酶的分类和蛋白质结构 | 第12-14页 |
| ·木聚糖酶的进化 | 第12页 |
| ·木聚糖酶的蛋白质结构 | 第12-14页 |
| ·木聚糖酶的分子改造方法 | 第14-21页 |
| ·重叠延伸 PCR 法 | 第14-16页 |
| ·DNA 改组技术 | 第16页 |
| ·交错延伸技术 | 第16-17页 |
| ·体外随机引发重组 | 第17页 |
| ·蛋白融合 | 第17-18页 |
| ·引入突变构建二硫桥 | 第18-19页 |
| ·改造信号肽 | 第19页 |
| ·定点突变 | 第19-20页 |
| ·化学修饰 | 第20页 |
| ·其他 | 第20-21页 |
| 2 引言 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·菌株和载体 | 第22页 |
| ·试剂与药品 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23-24页 |
| ·实验流程 | 第24-26页 |
| ·原有 pET20b- XynⅢ模板的改造 | 第24-25页 |
| ·突变体构建与酶学性质分析 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·对 pET20b- XynⅢ的改造 | 第26-27页 |
| ·突变体的构建 | 第27-32页 |
| ·各突变体质粒热击转化大肠杆菌 BL-21 | 第32页 |
| ·突变基因在大肠杆菌中的表达与检测 | 第32页 |
| ·改造后的 pET20b- XynⅢ和重组木聚糖酶的酶学性质分析 | 第32-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·对 pET20b- XynⅢ模板进行改造和突变体基因的 PCR 扩增 | 第33-36页 |
| ·改造 pET20b-XynⅢ模板 | 第33页 |
| ·突变体基因的 PCR 扩增 | 第33-36页 |
| ·含突变位点的重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·突变基因的测序与序列比对 | 第37-38页 |
| ·突变基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第38页 |
| ·改造后的 pET20b-XynⅢ和重组木聚糖酶的酶学性质 | 第38-41页 |
| ·改造后的 pET20b-XynⅢ酶的热稳定性 | 第38-39页 |
| ·改造前、后的 pET20b- XynⅢ酶的最适温度 | 第39页 |
| ·重组酶的最适 pH | 第39-41页 |
| 5 结论与讨论 | 第41-44页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·后续工作 | 第43-44页 |
| ·完成其他突变位点的改造 | 第43页 |
| ·进一步改造木聚糖酶的温度稳定性 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 英文摘要 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 缩略语表 | 第51页 |
