| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-96页 |
| §1.1 引言 | 第17-20页 |
| §1.2 单相微流控PCR系统 | 第20-45页 |
| §1.2.1 概述 | 第20-21页 |
| §1.2.2 基于硅材料的单相微流控PCR系统 | 第21-25页 |
| §1.2.3 基于玻璃材料的单相微流控PCR系统 | 第25-29页 |
| §1.2.4 基于聚合物材料的单相微流控PCR系统 | 第29-44页 |
| §1.2.5 小结 | 第44-45页 |
| §1.3 多相(液滴)微流控PCR系统 | 第45-75页 |
| §1.3.1 微流控乳液PCR系统 | 第45-60页 |
| §1.3.1.1 概述 | 第45-49页 |
| §1.3.1.2 基于功能微球的乳液PCR系统 | 第49-53页 |
| §1.3.1.3 基于琼脂糖液滴的乳液PCR系统 | 第53-54页 |
| §1.3.1.4 连续流液滴PCR系统 | 第54-60页 |
| §1.3.2 基于平面液滴阵列的微流控PCR系统 | 第60-73页 |
| §1.3.2.1 概述 | 第60-63页 |
| §1.3.2.2 基于平面液滴的快速PCR系统 | 第63-68页 |
| §1.3.2.3 基于敞开式平面液滴阵列的单细胞PCR分析系统 | 第68-69页 |
| §1.3.2.4 基于封闭式平面液滴阵列的PCR系统 | 第69-73页 |
| §1.3.3 小结 | 第73-75页 |
| §1.4 总结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-96页 |
| 第二章 纳升级液滴阵列实时定量RT-PCR系统的研究 | 第96-120页 |
| §2.1 引言 | 第96-98页 |
| §2.2 实验部分 | 第98-108页 |
| §2.2.1 实验材料及试剂 | 第98-99页 |
| §2.2.2 实验溶液配制 | 第99-100页 |
| §2.2.3 实验操作 | 第100-108页 |
| §2.2.3.1 亲水点阵列芯片加工 | 第100-103页 |
| §2.2.3.2 实时定量RT-PCR系统构建 | 第103-104页 |
| §2.2.3.3 RT-PCR反应 | 第104-105页 |
| §2.2.3.4 数据采集处理 | 第105-106页 |
| §2.2.3.5 芯片清洗 | 第106页 |
| §2.2.3.6 实验注意事项 | 第106-108页 |
| §2.3 结果与讨论 | 第108-117页 |
| §2.3.1 设计思想 | 第108页 |
| §2.3.2 纳升液滴阵列实时定量RT-PCR系统的优化 | 第108-113页 |
| §2.3.2.1 亲水点阵列芯片加工 | 第108-109页 |
| §2.3.2.2 ITO热盖温度的选择 | 第109-110页 |
| §2.3.2.3 液滴体积的选择 | 第110-111页 |
| §2.3.2.4 移液器多步加样操作的一致性 | 第111-113页 |
| §2.3.3 纳升级液滴阵列实时定量RT-PCR系统性能 | 第113-114页 |
| §2.3.4 多种细胞中miRNA-122含量的测定 | 第114-117页 |
| §2.4 结论与展望 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-120页 |
| 第三章 基于纳升级液滴阵列的自动化单细胞实时定量RT-PCR系统的研究 | 第120-155页 |
| §3.1 引言 | 第120-123页 |
| §3.2 实验部分 | 第123-134页 |
| §3.2.1 实验材料及试剂 | 第123页 |
| §3.2.2 实验溶液配制 | 第123-124页 |
| §3.2.3 实验操作 | 第124-134页 |
| §3.2.3.1 亲水点阵列芯片加工 | 第124-125页 |
| §3.2.3.2 毛细管探针加工 | 第125页 |
| §3.2.3.3 自动化液滴生成及操控系统的构建 | 第125-128页 |
| §3.2.3.4 实时定量RT-PCR检测系统的构建 | 第128-130页 |
| §3.2.3.5 单细胞miRNA-122 RT-PCR检测 | 第130-131页 |
| §3.2.3.6 点样过程中交叉污染的防护措施 | 第131-132页 |
| §3.2.3.7 数据采集处理 | 第132-133页 |
| §3.2.3.8 芯片清洗 | 第133页 |
| §3.2.3.9 实验注意事项 | 第133-134页 |
| §3.3 结果与讨论 | 第134-151页 |
| §3.3.1 设计思想 | 第134-136页 |
| §3.3.2 液滴生成及操控系统的优化 | 第136-137页 |
| §3.3.3 高密度液滴阵列芯片设计 | 第137-138页 |
| §3.3.4 基于纳升级液滴阵列的实时定量RT-PCR系统性能优化 | 第138-142页 |
| §3.3.4.1 液滴反应器体积的选择 | 第138-139页 |
| §3.3.4.2 不同液滴量取方式对PCR扩增的影响 | 第139-140页 |
| §3.3.4.3 BSA动态钝化剂浓度优化 | 第140-141页 |
| §3.3.4.4 RT-PCR体系优化 | 第141-142页 |
| §3.3.5 系统性能测试 | 第142-145页 |
| §3.3.6 细胞悬液对RT-PCR反应抑制问题 | 第145-148页 |
| §3.3.6.1 PBS的抑制作用 | 第145-147页 |
| §3.3.6.2 其它细胞相关溶液对PCR反应的抑制作用 | 第147-148页 |
| §3.3.7 单细胞miRNA的实时定量RT-PCR检测 | 第148-151页 |
| §3.3.7.1 单细胞包裹概率 | 第148-149页 |
| §3.3.7.2 单个Huh-7细胞中miRNA-122含量的测定 | 第149-151页 |
| §3.4 结论与展望 | 第151-152页 |
| 参考文献 | 第152-155页 |
| 附录 | 第155-156页 |
