摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-16页 |
第一章 前言 | 第16-42页 |
·斑马鱼消化系统形态发生 | 第17-25页 |
·斑马鱼肝脏形态发生 | 第18-21页 |
·斑马鱼肠道形态发生 | 第21-23页 |
·斑马鱼胰腺形态发生 | 第23-25页 |
·COPⅡ复合物相关研究 | 第25-30页 |
·细胞内泡状转运方式 | 第25-27页 |
·COPⅡ复合物组分及其组装 | 第27-28页 |
·货物蛋白的筛选和分类 | 第28页 |
·COPⅡ复合物在发育和疾病中的作用 | 第28-30页 |
·核孔复合物相关研究 | 第30-33页 |
·核孔复合物的结构 | 第30页 |
·核孔复合物在发育和疾病中的作用 | 第30-31页 |
·核孔复合物在基因表达调控中的作用 | 第31-33页 |
·斑马鱼视网膜形态发生 | 第33-35页 |
·斑马鱼视网膜的结构 | 第33页 |
·斑马鱼视网膜的早期发育 | 第33-34页 |
·影响斑马鱼视网膜形成的重要因子 | 第34页 |
·影响斑马鱼视网膜形成的信号通路 | 第34-35页 |
·斑马鱼sec13~(sq198)突变体 | 第35-42页 |
·斑马鱼sec13~(sq198)突变体的筛选 | 第35页 |
·斑马鱼sec13~(sq198)突变体的表型 | 第35页 |
·斑马鱼sec13基因 | 第35-38页 |
·sec13~(sq198)突变体消化器官的早期特化 | 第38-39页 |
·sec13~(sq198)突变体血管和原肾管的早期发育 | 第39-40页 |
·sec13~(sq198)突变体软骨细胞的亚显微结构 | 第40-42页 |
第二章 实验材料和方法 | 第42-64页 |
·斑马鱼品系及饲养 | 第42页 |
·菌株 | 第42页 |
·抗体 | 第42-43页 |
·质粒 | 第43页 |
·Morpholinos | 第43页 |
·常用溶液及培养基 | 第43-45页 |
·DNA相关实验方法 | 第45-50页 |
·斑马鱼胚胎基因组DNA简单提取 | 第45页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第45-46页 |
·PCR产物纯化 | 第46页 |
·克隆 | 第46-48页 |
·细胞凋亡检测 | 第48-49页 |
·BrdU掺入实验 | 第49-50页 |
·RNA相关实验方法 | 第50-54页 |
·总RNA提取 | 第50页 |
·DNaseⅠ处理总RNA | 第50页 |
·DNaseⅠ处理后纯化 | 第50-51页 |
·逆转录(reverse transcription) | 第51页 |
·mRNA的体外合成 | 第51-52页 |
·原位杂交探针的体外合成 | 第52页 |
·整胚原位杂交(Whole mount in situ hybridization) | 第52-53页 |
·总mRNA核积累实验 | 第53-54页 |
·蛋白相关实验方法 | 第54-56页 |
·斑马鱼胚胎总蛋白提取 | 第54页 |
·蛋白印迹杂交 | 第54-55页 |
·蛋白免疫荧光实验 | 第55-56页 |
·显微注射实验(microinjection) | 第56-57页 |
·拉针 | 第56页 |
·切针 | 第56页 |
·装针 | 第56页 |
·显微注射 | 第56-57页 |
·阿尔新蓝染色(Alcian blue staining) | 第57页 |
·苏木精和伊红染色(hematoxylin and eosin staining) | 第57页 |
·透射电子显微镜技术(transmission electron microscopy) | 第57-59页 |
·包埋剂的配制 | 第57-58页 |
·样品前期处理及包埋 | 第58页 |
·定位及超薄切片 | 第58页 |
·染色 | 第58-59页 |
·观察及图片采集 | 第59页 |
·本课题中所用到的引物和吗啉代寡聚核苷酸的序列 | 第59-64页 |
第三章 斑马鱼sec13~(sq198)突变体的发育生物学描述 | 第64-66页 |
·sec13~(sq198)突变体消化系统器官后期生长 | 第64页 |
·sec13~(sq198)突变体下腭软骨的发育 | 第64-66页 |
第四章 斑马鱼sec13~(sq198)突变体的细胞生物学描述 | 第66-76页 |
·sec13~(sq198)突变体消化系统器官 | 第66-73页 |
·sec13~(sq198)突变体消化系统器官的亚显微结构 | 第66-68页 |
·sec13~(sq198)突变体消化系统器官的细胞分泌活动 | 第68-69页 |
·sec13~(sq198)突变体消化系统器官的细胞周期 | 第69-72页 |
·sec13~(sq198)突变体消化系统器官的细胞命运 | 第72-73页 |
·sec13~(sq198)突变体软骨细胞的分泌活动 | 第73-76页 |
第五章 斑马鱼突变体的分子生物学描述 | 第76-82页 |
·sec13~(sq198)突变体蛋白水平的改变 | 第76页 |
·sec13~(sq198)突变导致的分子生物学改变 | 第76-82页 |
·sec13和sec31a相关的改变 | 第76-78页 |
·p53信号通路相关的改变 | 第78-79页 |
·未折叠蛋白反应信号通路相关的改变 | 第79-82页 |
第六章 Sec31a的敲除模拟了sec13~(sq198)突变体的表型 | 第82-92页 |
·sec31a吗啉代反义寡聚核苷酸 | 第82-83页 |
·sec31a ATG morpholino的靶向位置 | 第82页 |
·sec31a ATG morpholino的敲除验证 | 第82-83页 |
·Sec31a敲除后斑马鱼胚胎的表型 | 第83-88页 |
·消化系统器官的表型 | 第83-86页 |
·非消化系统器官的表型 | 第86-88页 |
·sec31b的早期表达 | 第88-92页 |
第七章 Sec13与斑马鱼视网膜发育 | 第92-100页 |
·sec13~(sq198)突变体发育小眼睛表型 | 第92-94页 |
·sec13~(sq198)突变体小眼睛表型的明视场观察 | 第92页 |
·sec13~(sq198)突变体小眼睛表型的组化观察 | 第92-93页 |
·sec13~(sq198)突变体小眼睛表型的电镜观察 | 第93-94页 |
·sec13~(sq198)突变体视网膜有正常的细胞分化 | 第94-95页 |
·sec13~(sq198)突变体视网膜有异常的细胞周期进程 | 第95-98页 |
·sec13~(sq198)突变体视网膜有异常的细胞凋亡活动 | 第98-100页 |
第八章 蛋白分泌与斑马鱼视网膜发育 | 第100-110页 |
·Sec31a敲除后的斑马鱼表型 | 第100-101页 |
·Sec31a敲除后不影响斑马鱼视网膜细胞的正常分化 | 第101-102页 |
·Sec31a敲除后斑马鱼视网膜没有异常的细胞凋亡 | 第102页 |
·Sec31a和Sec31b共敲除后的斑马鱼表型 | 第102-106页 |
·COPⅡ功能的Brefeldin A抑制 | 第106-108页 |
·Brefeldin A处理的斑马鱼胚胎表型 | 第106-107页 |
·Brefeldin A处理的斑马鱼视网膜结构 | 第107-108页 |
·Brefeldin A处理的斑马鱼视网膜出现了大量的细胞凋亡 | 第108-110页 |
第九章 核孔复合物与斑马鱼视网膜发育 | 第110-118页 |
·sec13~(sq198)突变体视网膜细胞的核孔形成发生了异常 | 第110-111页 |
·免疫荧光观察核孔形成 | 第110-111页 |
·透射电子显微镜观察核孔 | 第111页 |
·sec13~(sq198)突变体视网膜细胞的mRNA在核中异常积累 | 第111-113页 |
·sec13~(sq198)突变体视网膜缺陷的nup107~(tsu068Gt)模拟 | 第113-115页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体的表型 | 第113页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体视网膜的结构 | 第113-115页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体视网膜有强烈的细胞凋亡活动 | 第115-118页 |
第十章 结论和讨论 | 第118-124页 |
·结论 | 第118-120页 |
·讨论 | 第120-124页 |
参考文献 | 第124-142页 |
作者简介 | 第142-144页 |
致谢 | 第144-145页 |