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大曲华根霉(Rhizopus chinensis)固态发酵表达酯合成脂肪酶的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 绪论第12-28页
   ·固态发酵概述第12页
   ·固态发酵产酶的研究进展第12-18页
     ·固态发酵在发酵水平上的研究进展第12-16页
     ·固态发酵在蛋白质水平上的研究进展第16-18页
   ·根霉脂肪酶的固态发酵和分离纯化第18-23页
     ·根霉脂肪酶概述第18-19页
     ·根霉脂肪酶的固态发酵第19-21页
     ·根霉脂肪酶纯化第21-23页
   ·固体发酵环境条件对丝状真菌产特殊蛋白质的影响第23-24页
   ·本论文的立题意义和主要研究内容第24-28页
     ·本论文的研究目的和立题意义第24-25页
     ·本论文的研究思路与主要研究内容第25-28页
第二章 华根霉固态发酵产全细胞合成活性脂肪酶的培养条件研究第28-40页
   ·前言第28页
   ·材料与方法第28-30页
     ·菌种第28-29页
     ·主要试剂第29页
     ·主要仪器第29页
     ·研究方法第29-30页
   ·结果与讨论第30-39页
     ·培养基组分以及培养条件对华根霉菌体结合酯合成脂肪酶发酵的影响第30-38页
     ·固态发酵产菌体结合酯合成脂肪酶进程第38-39页
   ·小结第39-40页
第三章 华根霉固态发酵酯合成脂肪酶的分离纯化和物理特性第40-58页
   ·前言第40-41页
   ·材料与方法第41-45页
     ·菌种第41页
     ·培养基第41页
     ·主要试剂第41页
     ·主要仪器第41-42页
     ·溶液配制第42页
     ·研究方法第42-45页
     ·脂肪酶的SDS-PAGE分析第45页
     ·N-末端氨基酸序列的测定第45页
     ·肽质量指纹谱分析第45页
   ·结果与讨论第45-57页
     ·华根霉脂肪酶活力分布第45-46页
     ·Triton X-100浓度对膜结合脂肪酶提取效果的影响第46-47页
     ·华根霉固态发酵产酯合成脂肪酶的纯化第47-51页
     ·华根霉液态发酵产酯合成脂肪酶的纯化第51-55页
     ·脂肪酶N端氨基酸序列分析第55-56页
     ·肽质量指纹谱分析第56-57页
   ·小结第57-58页
第四章 华根霉固态发酵特征性酯合成脂肪酶的生化性质第58-76页
   ·前言第58-59页
   ·材料与方法第59-63页
     ·菌种第59页
     ·培养基第59页
     ·主要试剂第59页
     ·主要仪器第59-60页
     ·溶液的配制第60页
     ·研究方法第60-61页
     ·脂肪酶水解活性的研究第61-62页
     ·脂肪酶合成活性的研究第62页
     ·兔抗菌体蛋白血清的制备第62页
     ·ELISA法检测免疫血清的效价第62-63页
     ·抗体的纯化第63页
     ·免疫印迹分析第63页
   ·结果与讨论第63-74页
     ·纯化的脂肪酶的水解酶学性质第63-68页
     ·纯化的脂肪酶的合成酶学性质第68-71页
     ·脂肪酶SSL1、SML1比较第71-72页
     ·兔抗菌体蛋白血清效价的测定及抗体的纯化第72-73页
     ·SSL1特征性的验证第73-74页
   ·小结第74-76页
第五章 华根霉固态发酵非特征性酯合成脂肪酶的生化性质第76-90页
   ·前言第76-77页
   ·材料与方法第77-79页
     ·菌种第77页
     ·培养基第77页
     ·主要试剂第77页
     ·主要仪器第77-78页
     ·研究方法第78页
     ·脂肪酶水解活性的研究第78-79页
     ·脂肪酶合成活性的研究第79页
   ·结果与讨论第79-88页
     ·SSL2水解酶学性质第79-84页
     ·SSL2合成酶学性质第84-87页
     ·脂肪酶SSL2、SML2比较第87-88页
   ·小结第88-90页
第六章 诱导华根霉固体发酵特征性酯合成脂肪酶表达的关键因素的研究第90-105页
   ·前言第90-91页
   ·材料与方法第91-94页
     ·菌种第91页
     ·主要试剂第91页
     ·主要仪器第91页
     ·溶液配制第91-92页
     ·培养基和培养方法第92-93页
     ·菌体收集与菌体结合脂肪酶的制备第93页
     ·检测方法第93页
     ·蛋白含量标准曲线的绘制第93-94页
   ·结果与讨论第94-104页
     ·间接Elisa法测定SSL1含量标准曲线的建立第94-95页
     ·液体发酵中模拟固态发酵条件对诱导SSL1的影响第95-99页
     ·平板培养中模拟固体发酵条件对诱导SSL1的影响第99-104页
   ·小结第104-105页
主要结论第105-107页
论文创新点第107-108页
参考文献第108-120页
致谢第120-122页
附录:作者在学期间发表的论文第122页

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