| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 缩略词 | 第16-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-39页 |
| ·糖基化的类型 | 第20-23页 |
| ·真核生物与原核生物的N-糖基化 | 第20-21页 |
| ·原核生物N-糖基化与O-糖基化 | 第21-22页 |
| ·真核生物与原核生物N-糖基化的区别 | 第22-23页 |
| ·N-糖基化的寡糖基转移酶(PglB) | 第23-32页 |
| ·PglB的空间结构 | 第23-24页 |
| ·PglB的相对宽松的底物特异性 | 第24-25页 |
| ·PglB的底物蛋白的糖基化位点和糖基化序列的选择 | 第25-27页 |
| ·PglB的糖基化机制 | 第27-28页 |
| ·PglB的蛋白纯化的条件优化 | 第28-29页 |
| ·PglB的底物蛋白的选择 | 第29-30页 |
| ·PglB和N-糖基化系统在疫苗研究中的应用 | 第30-32页 |
| ·多糖参与的细胞表面结构 | 第32-38页 |
| ·细胞表面的多糖 | 第33-34页 |
| ·鞭毛的结构与功能 | 第34-36页 |
| ·E.coli O157：H7的致病因素 | 第36-37页 |
| ·疫苗研究现状 | 第37-38页 |
| ·本课题的研究思路 | 第38-39页 |
| 第二章 敲除waaL对细菌的生理状态的影响 | 第39-62页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39-43页 |
| ·质粒、菌株、实验耗材 | 第39-40页 |
| ·本章论文所用的引物和仪器 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41-43页 |
| ·试验方法 | 第43-54页 |
| ·基因敲除E.coli O157：H7的waaL | 第43-49页 |
| ·细菌的运动性、粘附性、生物膜的变化 | 第49-51页 |
| ·waaL的表达纯化 | 第51-53页 |
| ·重组后细菌的运动性、粘附性、生物膜的变化 | 第53-54页 |
| ·实验结果与讨论 | 第54-60页 |
| ·基因敲除waaL | 第54-56页 |
| ·银染验证基因基因敲除waaL | 第56-57页 |
| ·WaaL的表达纯化 | 第57-58页 |
| ·细菌运动性变化 | 第58-59页 |
| ·细菌的生物膜的变化 | 第59-60页 |
| ·细菌的粘附性的变化 | 第60页 |
| ·总结 | 第60-62页 |
| 第三章 一步法生产N-糖蛋白 | 第62-81页 |
| ·引言 | 第62-63页 |
| ·实验材料 | 第63-67页 |
| ·质粒、菌株、实验耗材 | 第63-64页 |
| ·本章所用的引物 | 第64-67页 |
| ·实验方法 | 第67-73页 |
| ·麦芽糖结合蛋白(malE)的表达纯化 | 第67-68页 |
| ·基因突变改造MBP的糖基化序列 | 第68-69页 |
| ·利用融合PCR改造MBP的糖基化序列 | 第69-73页 |
| ·构建MBP突变体,pglB的重组质粒 | 第73-76页 |
| ·western blot检测MBP的糖基化 | 第74-76页 |
| ·实验结果与讨论 | 第76-79页 |
| ·构建重组菌株 | 第76-77页 |
| ·MBP_(mut)和N-糖蛋白的表达纯化 | 第77-78页 |
| ·N-糖蛋白的western blot测定 | 第78-79页 |
| ·总结 | 第79-81页 |
| 文章总结 | 第81-83页 |
| 文章创新性 | 第83页 |
| 文章的不足 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-95页 |
| 硕士期间发表论文 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第97页 |