| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-16页 |
| 1.SARS的病原体——SARS冠状病毒(SARS-CoV) | 第9-10页 |
| 2.SARS-CoV N蛋白 | 第10-11页 |
| 3.SARS-CoV的致病机理 | 第11-12页 |
| 4.细胞色素P450概述 | 第12-13页 |
| 5.CYP4F3的结构和功能 | 第13-14页 |
| 6.课题研究的目的、方法及意义 | 第14-16页 |
| 材料与方法 | 第16-27页 |
| 1.菌株、细胞株及质粒 | 第16页 |
| 2.工具酶及缓冲液 | 第16页 |
| 3.培养基 | 第16-17页 |
| 4.试剂及试剂盒 | 第17页 |
| 5.主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 6.载体构建、引物合成及测序 | 第18-20页 |
| 7.酵母GS115宿主菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| 8.电击转化酵母GS115感受态细胞 | 第20页 |
| 9.MD和MM平板筛选 | 第20页 |
| 10.原位双层膜筛选 | 第20-21页 |
| 11.高效分泌表达菌株筛选 | 第21页 |
| 12.转染质粒的制备 | 第21页 |
| 13.细胞培养与转染 | 第21-22页 |
| 14.谷胱甘肽S转移酶(glutathion S-transferase,GST)融合蛋白珠子的制备 | 第22-23页 |
| 15.免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)与免疫印迹(Immunoblot,IB) | 第23-24页 |
| 16.体外结合实验 | 第24页 |
| 17.BIACORE检测动力学常数 | 第24-25页 |
| 18.高压液相色谱 | 第25页 |
| 19.白三烯B_4检测 | 第25-26页 |
| 20 其它 | 第26-27页 |
| 结果 | 第27-42页 |
| 1.细胞色素P450(CYP4F3)在毕赤酵母中的表达 | 第27-29页 |
| 2.细胞色素P450(CYP4F3)在哺乳动物细胞中的表达及纯化 | 第29-30页 |
| 3.SARS-CoV N蛋白与细胞色素P450(CYP4F3)之间存在相互作用 | 第30-36页 |
| 4.体外高盐状态下SARS-CoV N蛋白抑制细胞色素P450(CYP4F3)的降解 | 第36-39页 |
| 5.SARS-CoV N蛋白抑制细胞色素P450(CYP4F3)的羟化酶活性 | 第39-40页 |
| 6.SARS病人血清中LTB_4水平显著升高 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42-47页 |
| 1.SARS-CoV N蛋白与细胞色素P450(CYP4F3)的相互作用 | 第42页 |
| 2.SARS-CoV N蛋白抑制CYP4F3的羟化酶活性 | 第42-44页 |
| 3.细胞色素P450(CYP450)的基因多态性 | 第44-45页 |
| 4.后续还应进行的工作 | 第45-47页 |
| 总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录一 | 第54-56页 |
| 附录二 | 第56-63页 |
| 缩略词表 | 第63-64页 |
| 硕士期间发表的论文综述(第一署名) | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
