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酶膜生物反应器制备核苷酸的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 文献综述第15-42页
   ·酶膜生物反应器研究现状与进展第15-28页
     ·酶膜生物反应器的发展第15页
     ·酶膜生物反应器的特点第15-16页
     ·酶膜生物反应器中膜的选择第16页
     ·酶膜生物反应器的分类第16-17页
     ·酶膜生物反应器中酶的固定化方法第17-22页
     ·固定化酶的性质第22页
     ·固定化酶膜的性质第22-24页
     ·酶膜生物反应器的应用第24-27页
     ·存在问题及发展方向第27-28页
   ·核苷酸及其研究进展第28-41页
     ·核苷酸的理化特性第28-29页
     ·核苷酸的应用第29-33页
     ·核苷酸的生产第33-36页
     ·核酸酶P1的研究进展第36-40页
     ·核苷酸的分离第40-41页
   ·本论文研究的目的、意义及主要研究内容第41-42页
第二章 核酸酶P1的制备第42-63页
   ·实验试剂与仪器第42-43页
     ·实验试剂第42页
     ·主要仪器第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·种子培养基第43页
     ·基础发酵培养基第43页
     ·培养及发酵方法第43页
     ·核酸酶P1酶活测定方法第43-44页
     ·还原糖的测定方法第44-45页
     ·生物量的测定—菌体干重法第45页
   ·结果与讨论第45-62页
     ·种子培养基的选择第45-46页
     ·碳、氮、磷源等的选择第46-49页
     ·发酵培养基单因子试验第49-52页
     ·发酵培养条件对产酶的影响.第52-56页
     ·发酵培养基的正交优化第56-58页
     ·发酵培养基的响应面法优化第58-62页
     ·菌体产酶生长曲线图第62页
   ·本章小结第62-63页
第三章 核酸酶P1的分离纯化第63-89页
   ·实验试剂与仪器第63-64页
     ·实验试剂第63页
     ·实验仪器第63-64页
     ·重要试剂的配制第64页
   ·实验方法第64-70页
     ·核酸酶P1的分离纯化第64-68页
     ·核酸酶P1纯度的鉴定—SDS-聚丙烯酰胺电泳法第68-69页
     ·核酸酶P1酶活测定第69页
     ·蛋白浓度的测定第69-70页
     ·柱层析实验装置图第70页
   ·结果与讨论第70-87页
     ·硫酸铵沉淀试验第70-72页
     ·疏水层析分离第72-76页
     ·离子交换纤维素对核酸酶P1的分离第76-81页
     ·葡聚糖凝胶层析第81页
     ·核酸酶P1分离纯化过程及结果第81-82页
     ·电泳图第82-83页
     ·核酸酶P1的部分酶学性质研究第83-87页
   ·本章小结第87-89页
第四章 游离酶膜反应器制备核苷酸的研究第89-112页
   ·实验试剂与仪器第89-90页
     ·实验试剂第89页
     ·主要仪器第89-90页
   ·实验方法第90-92页
     ·酶膜生物反应器的冷模试验研究第90-91页
     ·RNA含量测定第91页
     ·5’-核苷酸的测定第91-92页
     ·核酸酶P1活力测定第92页
     ·酶膜反应器生产能力的计算第92页
     ·转化率的计算第92页
   ·结果与讨论第92-110页
     ·聚醚砜膜对底物截留的可行性研究第92-93页
     ·聚醚砜膜对酶截留的可行性研究第93-94页
     ·膜通量衰减曲线第94-96页
     ·压力对膜通量的影响第96-97页
     ·膜截留分子量的影响第97-98页
     ·温度对膜通量的影响第98页
     ·流速的影响第98-99页
     ·平均停留时间的影响第99-100页
     ·底物浓度的影响第100-101页
     ·酶量的影响第101-102页
     ·温度的影响第102-103页
     ·Zn~(2+)浓度的影响第103-104页
     ·pH值的影响第104-105页
     ·醋酸缓冲液浓度的影响第105-106页
     ·酶解条件的优化第106-110页
   ·本章小结第110-112页
第五章 核酸酶P1的固定化—适合膜生物反应器催化剂的制备和选择第112-139页
   ·实验试剂与仪器第112-113页
   ·实验方法第113-115页
   ·结果与讨论第115-137页
     ·核酸酶P1几种不同固定化方法的选择第115-116页
     ·ABSE纤维素固定化核酸酶P1第116-121页
     ·壳聚糖微球固定化核酸酶P1第121-127页
     ·DEAE纤维素固定化核酸酶P1第127-132页
     ·固定化酶的部分酶学性质研究第132-137页
   ·本章小结第137-139页
第六章 不同形式催化剂截留于膜生物反应器内的反应特征第139-160页
   ·实验试剂与仪器第139页
   ·实验方法第139-140页
     ·不同形式催化剂的制备第139-140页
     ·催化剂负载量对膜透量影响的测定第140页
     ·膜的清洗第140页
   ·结果与讨论第140-159页
     ·物理吸附法膜固定化酶在膜生物反应器中水解核酸的反应特征第140-141页
     ·化学交联法膜固定化酶在膜生物反应器中水解核酸的反应特征第141-144页
     ·壳聚糖微球固定化酶在膜生物反应器中水解核酸的反应特征第144-146页
     ·DEAE纤维素固定化酶在膜生物反应器中水解核酸的反应特征第146-149页
     ·纸纤维固定化酶在膜生物反应器中水解核酸的反应特征第149-152页
     ·各种催化剂性能的比较第152-153页
     ·壳聚糖微球固定化酶在膜生物反应器中酶解条件的优化第153-159页
   ·本章小结第159-160页
第七章 酶解产物5’-核苷酸的分离纯化第160-178页
   ·实验试剂与仪器第160-161页
   ·实验方法第161-163页
   ·结果与讨论第163-177页
     ·树脂的筛选第163-165页
     ·静态吸附动力学第165-166页
     ·浓度对吸附的影响第166-167页
     ·pH对吸附的影响第167-169页
     ·NaCl浓度对吸附的影响第169-170页
     ·温度对吸附的影响第170-171页
     ·阳离子交换柱动态洗脱试验第171-175页
     ·阴离子交换柱CMP和UMP的分离第175-176页
     ·洗脱结果第176-177页
   ·本章小节第177-178页
第八章 结论与展望第178-183页
参考文献第183-196页
发表文章清单第196-197页
致谢第197页

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