| 1 绪论 | 第1-27页 |
| ·植酸 | 第9-12页 |
| ·植酸的理化性质 | 第9页 |
| ·饲料原料中的植酸 | 第9-11页 |
| ·植酸的抗营养作用 | 第11-12页 |
| ·植酸酶 | 第12-22页 |
| ·植酸酶的理化性质 | 第12-14页 |
| ·植酸酶的作用机理 | 第14-16页 |
| ·植酸酶的分类 | 第16页 |
| ·植酸酶的来源 | 第16-17页 |
| ·植酸酶的功能 | 第17-18页 |
| ·植酸酶的研究进展 | 第18-19页 |
| ·植酸酶基因研究进展 | 第19-22页 |
| ·植酸酶活性的测定方法 | 第22-23页 |
| ·硫酸亚铁-钼蓝法 | 第22页 |
| ·钒-钼酸铵法 | 第22-23页 |
| ·Vc-钼蓝法 | 第23页 |
| ·丙酮-磷钼酸铵法 | 第23页 |
| ·研究目标与整体设计 | 第23-24页 |
| ·研究目标 | 第23页 |
| ·研究整体设计 | 第23-24页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第24-25页 |
| ·宇佐美曲霉菌种的选育 | 第24页 |
| ·phyA基因的克隆 | 第24-25页 |
| ·phyA基因的表达与产物纯化 | 第25页 |
| ·表达重组蛋白的鉴定 | 第25页 |
| ·本研究的创新性 | 第25-27页 |
| ·高活性产植酸酶菌株的选育 | 第25-26页 |
| ·构建phyA基因的两种新型表达载体 | 第26-27页 |
| 2 实验材料与方法 | 第27-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·细胞株与质粒 | 第28页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要培养基 | 第29页 |
| ·phyA基因的克隆 | 第29-38页 |
| ·宇佐美曲霉菌株的选育 | 第29-31页 |
| ·宇佐美曲霉总DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·phyA基因的PCR扩增 | 第32-34页 |
| ·PCR扩增产物的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·扩增产物的回收 | 第34-35页 |
| ·克隆质粒pBS-T-phyA的构建 | 第35页 |
| ·感受态细胞制备与克隆质粒的转化 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第36-38页 |
| ·phyA基因的序列测定及氨基酸序列分析 | 第38页 |
| ·phyA基因表达载体的构建及表达 | 第38-42页 |
| ·phyA基因表达质粒的构建 | 第38页 |
| ·phyA基因表达质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| ·BL21-pET32a(+)-phyA表达条件的优化: | 第39-40页 |
| ·phyA基因表达蛋白的鉴定 | 第40-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-53页 |
| ·phyA基因的克隆结果. | 第42-47页 |
| ·宇佐美曲霉菌种的选育 | 第42页 |
| ·phyA基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·PCR扩增产物的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·克隆质粒pBS-T-phyA的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| ·phyA基因测序及DNA序列分析 | 第45-47页 |
| ·phyA基因表达载体的构建及表达结果 | 第47-53页 |
| ·phyA基因表达质粒的构建及鉴定 | 第47-48页 |
| ·表达及表达条件的优化 | 第48-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| ·宇佐美曲霉的诱变处理 | 第53页 |
| ·PCR引物设计 | 第53页 |
| ·克隆质粒的选择 | 第53-54页 |
| ·phyA基因的序列测定 | 第54页 |
| ·重组质粒在E.coli中的转化 | 第54-55页 |
| ·表达系统及表达质粒的选择 | 第55-56页 |
| ·重组植酸酶及其对畜牧研究的意义 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
| 附录一 phyA基因的测序结果 | 第64-67页 |
| 附录二 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |