第一章 前言 | 第1-31页 |
综述一 鸡传染性喉气管炎病毒研究进展 | 第9-22页 |
1 . 病原学 | 第9-12页 |
·流行病学 | 第9-11页 |
·理化特性 | 第11-12页 |
·抗原性 | 第12页 |
2. 分子生物学特性 | 第12-17页 |
·基因组结构 | 第13-16页 |
·ILTV 的复制和蛋白合成 | 第16-17页 |
3 . 诊断 | 第17-18页 |
·病原鉴定 | 第17页 |
·血清学试验 | 第17页 |
·生物学诊断 | 第17-18页 |
4 . 防治 | 第18-22页 |
·亚单位疫苗 | 第18-19页 |
·基因缺失疫苗 | 第19-20页 |
·基因工程活载体疫苗 | 第20-21页 |
·DNA 疫苗 | 第21页 |
·ILT 的根除 | 第21-22页 |
综述二 DNA 疫苗研究进展 | 第22-31页 |
1. DNA 疫苗的组成 | 第23页 |
2. 基因疫苗的免疫学特性 | 第23-24页 |
3. 基因疫苗免疫机制及特点 | 第24-26页 |
4. 影响基因免疫效果的因素 | 第26-28页 |
·保护性抗原基因 | 第26页 |
·载体 | 第26-27页 |
·免疫途径 | 第27页 |
·细胞因子 | 第27-28页 |
·其他 | 第28页 |
5. 基因免疫实验研究 | 第28-29页 |
6. 应用前景 | 第29-31页 |
第二章 研究报告 | 第31-59页 |
实验一 传染性喉气管炎病毒gB 和gD 基因的真核表达 | 第31-40页 |
1. 试验材料 | 第31-32页 |
·细胞、质粒载体与 ILTV 阳性血清 | 第31-32页 |
·酶及相关试剂 | 第32页 |
2 . 方法 | 第32-36页 |
·真核表达载体的构建 | 第32-35页 |
·目的蛋白表达的检测 | 第35-36页 |
3 . 结果 | 第36-38页 |
·真核表达载体的酶切坚定 | 第36-37页 |
·序列分析 | 第37页 |
·ILTV gB 和gD 基因在293T 细胞中的表达 | 第37-38页 |
4 . 讨论 | 第38-40页 |
实验二 传染性喉气管炎病毒基因疫苗免疫保护实验 | 第40-59页 |
1. 试验材料 | 第40-41页 |
·载体及试剂 | 第40-41页 |
·仪器 | 第41页 |
·引物设计 | 第41页 |
2. 试验方法 | 第41-44页 |
·免疫用重组质粒的制备 | 第41-42页 |
·荧光定量 PCR 标准品的制备 | 第42-44页 |
3. 试验设计 | 第44-46页 |
·动物试验的免疫方法 | 第44页 |
·免疫后样品收集 | 第44-45页 |
·Real-time RT-PCR 检测外周血淋巴细胞中细胞因子表达水平 | 第45页 |
·流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中细胞亚型的百分比含量 | 第45-46页 |
·间接 ELISA 法检测血清抗体水平 | 第46页 |
4 . 结果 | 第46-55页 |
·Real-time PCR 检测结果 | 第46-50页 |
·外周血CD4+T、CD8+T 及 TCR+T 淋巴细胞亚类的动态变化 | 第50-53页 |
·抗 ILTVgB 的 ELISA 血清抗体检测结果 | 第53-54页 |
·攻毒后各组发病和死亡情况统计 | 第54-55页 |
5 . 讨论 | 第55-59页 |
·Real-time PCR 技术检测 DNA 疫苗诱导的细胞因子表达水平 | 第55-56页 |
·DNA 疫苗诱导的细胞免疫应答 | 第56-57页 |
·DNA 疫苗诱导的体液免疫应答 | 第57页 |
·ILTV 基因免疫保护效果 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |