| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-21页 |
| 1 苏云金芽孢杆菌概论 | 第9-15页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第9-11页 |
| ·苏云金芽孢杆菌毒素 | 第11页 |
| ·cry基因的表达调控机制 | 第11-15页 |
| 2 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白作用机理 | 第15-18页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的结构 | 第15-16页 |
| ·杀虫晶体蛋白活化模式 | 第16-18页 |
| 3 苏云金芽孢杆菌的研究现状 | 第18-20页 |
| ·高毒菌株的分离及新基因的克隆表达 | 第18页 |
| ·Bt基因的融合表达及转基因 | 第18-19页 |
| ·杀虫作用机制研究和抗性机理研究 | 第19-20页 |
| 4 立题依据和意义 | 第20-21页 |
| 材料与方法 | 第21-31页 |
| 1 材料 | 第21-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第21-22页 |
| ·培养基和抗生素 | 第22页 |
| ·试剂和引物 | 第22-24页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-31页 |
| ·菌体培养与伴孢晶体的分离 | 第25页 |
| ·伴孢晶体的选择性溶解和20-kb DNA的抽提 | 第25页 |
| ·20-kb DNA亚克隆文库的构建和PCR-RFLP筛选cry1Ac基因 | 第25-27页 |
| ·cry1Ac基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的克隆表达 | 第27-28页 |
| ·cry1Ac基因在无晶体突变株XBU001中的表达 | 第28-29页 |
| ·原子力显微镜观察 | 第29-30页 |
| ·杀虫毒力生测 | 第30-31页 |
| 结果与分析 | 第31-45页 |
| 1 20-kb DNA的抽提 | 第31-32页 |
| 2 20-kb DNA亚克隆文库的构建和PCR-RFLP筛选cry1Ac基因 | 第32-34页 |
| 3 cry1Ac基因在大肠杆菌中的克隆表达 | 第34-38页 |
| 4 cry1Ac基因在无晶体突变株XBU001中的克隆表达 | 第38-40页 |
| 5 表达产物的检测与分析 | 第40-45页 |
| ·原子力显微镜观察 | 第40页 |
| ·生测 | 第40-42页 |
| ·重组晶体中20-kb DNA的抽提与PCR鉴定 | 第42-45页 |
| 讨论 | 第45-49页 |
| 1 选择性溶解晶体和抽提20-kb DNA的技术特点 | 第45页 |
| 2 亚克隆文库的构建和cry1Ac基因的筛选 | 第45-46页 |
| 3 cry基因在大肠杆菌中的克隆表达策略 | 第46-47页 |
| 4 cry基因在无晶体突变株XBU001中超表达的机制探讨 | 第47-48页 |
| 5 20-kb DNA的PCR鉴定、来源及作用 | 第48-49页 |
| 结语 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
