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中国葡萄属野生种抗白粉病相关基因克隆及生物信息学分析

缩略词第1-6页
摘要第6-8页
英文摘要第8-14页
第一章 文献综述第14-45页
   ·白藜芦醇相关研究进展第14-23页
     ·白藜芦醇的化学结构、生物合成及其在自然界中的分布第14页
       ·白黎芦醇化学结构第14页
       ·白藜芦醇生物合成第14页
       ·白藜芦醇在自然界的分布第14页
     ·白藜芦醇作用研究进展第14-18页
       ·抗菌作用第16页
       ·抗氧化作用第16页
       ·预防心血管病和防癌作用第16-18页
       ·其它作用第18页
     ·白藜芦醇合酶(RS)的酶学性质第18-19页
     ·RS 基因研究第19-22页
       ·已克隆的 RS cDNA 分子及 RS 基因家族第19-20页
       ·RS 基因诱导表达及调控第20-22页
     ·RS 基因的转基因研究第22-23页
   ·植物的次生代谢研究进展第23-28页
     ·次生代谢过程的特点及种类第23-24页
     ·植物次生代谢的生理生态作用第24-27页
       ·植物次生代谢物与微生物的互作及其抗病作用第24-26页
       ·次生代谢物与植物信号传递第26-27页
       ·次生代谢物与环境的适应关系第27页
     ·植物次生代谢的基因工程第27-28页
   ·植物防卫基因研究进展第28-33页
     ·防卫基因概述第28-30页
       ·植物抗病的分子生物学机制第28页
       ·抗病基因第28-29页
       ·防卫基因第29页
       ·防卫反应类型第29-30页
     ·植物防卫反应基因与植物抗病性的关系第30-31页
       ·PAL 与植物抗病性的关系第30-31页
       ·CHS 与植物抗病性的关系第31页
     ·PPO、PAL 和 CHS 与植物诱导抗病性的关系第31-33页
   ·植物次生代谢与防卫反应的关系及研究策略第33-34页
     ·植物次生代谢与防卫反应的关系第33页
     ·植物次生代谢与防卫反应基因的研究策略第33-34页
   ·生物信息学发展及现代基因组学理论和技术在广义植物抗病基因工程中的作用第34-43页
     ·生物信息学研究第34-35页
       ·生物信息数据库第34-35页
       ·生物信息学分析方法第35页
     ·现代基因组学方法及其应用第35-40页
       ·结构基因组学在植物抗病性研究中的应用第36页
       ·功能基因组学在植物抗病性研究中的应用第36-37页
       ·比较基因组学在植物抗病性研究中的应用第37-38页
       ·基于同源序列的抗病基因克隆技术第38-40页
     ·定量 PCR 技术第40-41页
     ·简并 PCR 技术第41-43页
       ·简并 PCR 技术在基因克隆中的应用第41页
       ·简并引物及其设计第41-42页
       ·简并 PCR 的反应条件第42页
       ·应用简并 PCR 获得全长基因的方法第42页
       ·简并 PCR 技术的局限性第42-43页
   ·本研究的目的和意义第43-45页
第二章 材料与方法第45-51页
   ·试验材料第45页
     ·植物材料第45页
     ·主要试剂第45页
     ·主要仪器第45页
   ·实验方法第45-51页
     ·病原菌孢子萌发实验第45页
     ·病原菌田间人工接种第45-46页
     ·葡萄基因组 DNA 提取...........................?第46页
     ·葡萄材料总 RNA 提取第46-47页
     ·总 RNA 的纯化和检测第47页
       ·总 RNA 的纯化第47页
       ·总 RNA 检测第47页
     ·合成 cDNA 第一链第47-48页
     ·引物设计第48页
     ·PCR 试验程序第48-49页
     ·克隆测序第49-50页
       ·特异 PCR 产物回收第49页
       ·与载体的连接反应第49页
       ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备第49-50页
       ·连接产物的转化第50页
       ·重组质粒的筛选和鉴定第50页
     ·测序和生物信息学分析第50-51页
       ·序列测定第50页
       ·同源性分析第50-51页
第三章 结果与分析第51-85页
   ·葡萄苯丙氨酸代谢途径(PAL)抗白粉病相关基因研究第51-64页
     ·葡萄果皮总 RNA 提取第51页
     ·白藜芦醇次生代谢相关酶基因 cDNA 片段的分离第51-52页
     ·商南-24 芪合成酶基因家族三个成员 cDNA 片段的克隆与分析第52-57页
       ·商南-24 芪合成酶基因家族三个 cDNA 片段的克隆和测序第52-53页
       ·芪合成酶基因家族三个成员 cDNA 片段的生物信息学分析第53-57页
     ·商南-24 白藜芦醇合成酶基因启动子区的克隆与分析第57-59页
     ·商南-24 查尔酮合成酶基因的克隆与分析第59-62页
     ·商南-24 多酚氧化酶基因的克隆与分析第62-63页
     ·商南-24 中苯丙氨酸裂解酶基因 cDNA 片段的克隆与分析第63-64页
   ·葡萄 PAL 途径抗病相关基因表达与白粉病侵染关系研究第64-67页
     ·白粉菌室内萌发结果第64页
     ·田间人工接种白粉菌诱导第64-65页
     ·葡萄材料总 RNA 的定量第65页
     ·部分基因的表达与病原菌侵染关系的研究及定量 PCR 分析第65-67页
   ·抗白粉病相关新基因 cDNA 片断的克隆与生物信息学分析第67-85页
     ·涉及葡萄抗白粉病信号转导因子编码基因克隆第67-79页
       ·9-2 基因 cDNA 片段生物信息学分析第68-74页
       ·15#基因 cDNA 片段同源性分析第74-79页
     ·单引物定量 PCR 与新基因 cDNA 片段的克隆分析第79-84页
     ·抗白粉病相关新基因克隆小结第84-85页
第四章 讨 论第85-98页
   ·关于通过定量-简并 PCR 获得的几个中国葡萄属野生种抗白粉病相关基因 cDNA 片段的讨论第85-87页
   ·关于葡萄体内重要植保素物质白藜芦醇(Res)高产研究策略及STS 基因在葡萄属植物中不同株系的时空转录活性的差异第87-88页
   ·关于苯丙氨酸( PAL)次生代谢途径中的抗病相关基因克隆及其在优质抗病葡萄育种中的可能应用第88-91页
   ·关于葡萄抗病基因的克隆策略的一点探讨及本试验中抗病基因克隆新策略的制定第91-94页
   ·关于本试验实验技术改进方面第94-95页
   ·关于葡萄抗病优质基因工程育种的整体思路的一点探讨第95-97页
   ·关于抗白粉病基因表达时间确定和抗病基因克隆材料采样方法选择的一点讨论第97-98页
第五章 结 论第98-100页
致谢第100-101页
参考文献第101-111页
附录 1: 植物中主要次生代谢途径及相互关系第111-112页
附录 2: 苯丙氨酸代谢简图第112-113页
作者简介第113页

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